利用膜片钳技术标记脑片神经元的方法

目的: 介绍一种利用膜片钳技术标记脑片神经元形态的方法。方法: 利用振动切片机切好实验目标部位的脑片,用含有Neurobiotin^TM Tracer的电极内液灌注玻璃微电极,并进行全细胞膜片钳记录;实验结束后将脑片先用4％多聚甲醛固定、漂洗,再用含有Streptavidin-Texas Red和Triton X-100的PB染色,2 h后即可用荧光显微镜观察着色的神经元。结果: 将细胞膜电压钳制在-70 mV,阶跃刺激后神经元表现为逐渐增大的膜电流。电流钳模式记录时,阶跃刺激使神经元去极化,达到阈电位后爆发动作电位。荧光显微镜下可看到胞体和主要突起清晰完整的神经元形态。结论: 本方法适用于在膜片钳实验后观察所记录的神经元的形态特征,操作方便,图像直观清晰。     

重复-Gx加速度暴露对家兔心脏结构的影响*

目的: 重复-Gx加速度暴露对新西兰家兔心脏结构的影响。方法: 20只新西兰家兔随机分为2组(n=10):对照组、-Gx加速度暴露组。-3.6 Gx暴露2 s,间隔5 min,每天重复20次,共30 d;对照组不受加速度作用。末次-Gx加速度暴露后,用静脉注射空气法处死动物,迅速取左心室心肌组织,常规取样并采用光学显微镜及透射电镜进行组织学观察。结果: -Gx加速度暴露组家兔心肌切片在光学显微镜下可见心肌细胞的形态及排列等与对照组无显著区别;-Gx加速度暴露组家兔心肌在透射电镜下可见,心肌纤维断裂、排列紊乱、心肌细胞水肿、核膜扩张、血管内皮基膜分离。结论: -Gx加速度暴露可造成家兔心肌细胞超微结构损伤,提示应重视长期重复-Gx加速度暴露对舰载战斗机飞行员心脏功能的影响和防护。     

四逆散对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响及其机制*

目的: 探讨含四逆散药液血清对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法: 将人肝癌HepG2细胞分为5组,每组3个复孔。实验组细胞用五氟尿嘧啶(5-FU)或不同浓度的含四逆散药液血清处理48 h后,用倒置显微镜观察含四逆散药液血清处理后人肝癌HepG2细胞形态的变化;MTT法检测含四逆散药液血清对HepG2细胞生长的抑制作用;荧光染色和流式细胞术分别分析含四逆散药液血清对HepG2细胞凋亡的影响。Rho123染色法检测线粒体膜电位变化,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果: 与对照组比较,含四逆散药液血清处理人肝癌HepG2细胞后,细胞数量显著减少(P＜0.01),形态发生改变,呈现典型的凋亡细胞形态;G1期细胞数明显增加,而G2 期细胞数量显著减少(P＜0.05);Bax、Caspase-3、-9和Cyt-c的表达显著升高,而Bcl-2的表达显著降低(P＜0.05);随着含四逆散药液血清浓度增大,HepG2细胞线粒体膜电位显著下降(P＜0.05)。结论: 四逆散可以抑制HepG2细胞增殖,并通过线粒体途径诱导细胞凋亡。     

α-烯醇化酶基因干扰表达对籽鹅卵泡颗粒细胞增殖及凋亡的影响*

目的: 研究α-烯醇化酶(ENO1)基因干扰表达对籽鹅卵泡颗粒细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法: 原代培养籽鹅F1级卵泡颗粒细胞(复合培养),将ENO1基因干扰表达重组质粒转染至籽鹅卵泡颗粒细胞。实验分为四组:ENO1干扰表达组(RNAi)、无关序列干扰组(NC)、培养液组(Control)、转染试剂组(Lip)。流式细胞术检测干扰组和对照各组的凋亡率、细胞周期时相性。结果: ENO1基因干扰表达使籽鹅卵泡颗粒细胞增殖速度变慢,凋亡率增加,G2/M期颗粒细胞比例增高。结论: ENO1基因干扰表达可使籽鹅卵泡颗粒细胞周期发生G2/M期阻滞,诱导细胞发生凋亡,抑制细胞增殖。     

中国龙胆属植物研究(四)

龙胆属Gentiana (Tourn) L.是Tourneferot (1700)为纪念传说中的Illyria国王Gentius而建立的,对它作了描述,绘有墨线图。林奈在"植物属志"(1737),"植物种志"(1753)承认了该属,并重新进行了描述,记载23种。     

36 h完全睡眠剥夺对客体工作记忆相关电位的影响*

目的:采用事件相关电位(ERP)技术探讨36 h完全睡眠剥夺对客体工作记忆的影响。方法:本研究采用自身前后对照设计,16名睡眠质量良好的健康大学生(平均年龄为23岁,年龄范围21～28岁)分别在清醒状态下及36 h完全睡眠剥夺后接受2-back客体工作记忆任务,同时采集脑电数据。选用重复测量方差分析的方法比较睡眠剥夺前后与客体工作记忆有关的P2、N2、P3成分的波幅和潜伏期的差异。结果:在36 h完全睡眠剥夺后,与客体工作记忆加工相关的N2波的潜伏期显著延长(P＜0.05),波幅减少但未见统计学差异(P＞0.05); P2波潜伏期显著延长(P＜0.05),波幅未见明显变化(P＞0.05)。P3波波幅、潜伏期未见统计学差异(P＞0.05)。结论:36 h的完全睡眠剥夺影响了客体工作记忆相关电位,损害了个体的客体工作记忆加工能力。     

纳米二氧化硅复合寒冷对A549细胞毒性及其炎性因子分泌的影响*

目的: 本研究旨在探讨纳米二氧化硅(Nano-SiO₂)颗粒和寒冷复合对人肺腺癌上皮细胞A549细胞毒性及炎性因子分泌的影响。方法: 本研究以A549细胞为实验对象,分别用10, 50, 100, 200 μg/ml Nano-SiO₂颗粒对A549细胞染毒,以及分别在35℃,33℃,31℃条件下对A549细胞进行低温暴露,培养48 h后,观察细胞形态及测定细胞相对存活率。根据单因素分析结果,选出对A549细胞相对存活率有显著降低作用的Nano-SiO₂剂量和温度的基础上,按照2×2析因设计实验,分为4组:①37℃对照组;②Nano-SiO₂染毒组;③低温暴露组;④Nano-SiO₂和低温复合组,不同条件下暴露48 h后,收集细胞上清液采用比色法检测LDH活性,以及ELISA法测定细胞因子白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)的水平,采用qRT-PCR法检测细胞IL-6和IL-8的基因表达水平。结果: 100 μg/ml Nano-SiO₂组和31℃低温组能够显著降低A549细胞活性(P＜0.01),在复合条件作用下对A549细胞活性抑制最为显著,且炎性因子IL-6和IL-8及mRNA的表达水平均显著升高(P＜0.01)。结论: 100 μg/ml Nano-SiO₂与31℃低温复合暴露可协同降低A549细胞的相对存活率,增加炎性因子IL-6和IL-8表达水平。     

pcDNA3.1(+)-CTGF真核表达质粒构建及其在人成骨样细胞SaOS-2细胞中的表达*

目的:构建结缔组织生长因子(CTGF)的pcDNA3.1(+)真核表达质粒(pcDNA3.1(+)-CTGF),并检测其在人成骨样细胞SaOS-2中的表达,为进一步研究CTGF基因在骨发育和骨修复中的机制提供技术支撑。方法:采用PCR方法体外克隆CTGF基因全序列,将其用同源重组技术连接到线性pcDNA3.1(+)载体上,构建pcDNA3.1(+)-CTGF真核表达质粒,并对该质粒进行测序鉴定;鉴定无误后转染至SaOS-2细胞中,观察其48 h的表达情况。结果:基因测序证实pcDNA3.1(+)-CTGF真核表达重组质粒构建成功,与对照组相比,转染SaOS-2细胞48 h后的CTGF表达水平显著上调,达到对照组的4.8×10⁵倍(P＜0.01)。结论:成功构建了pcDNA3.1(+)-CTGF真核表达质粒,并能在人成骨样细胞SaOS-2中稳定表达,为深入研究CTGF基因对骨生成的调控机制奠定了基础。     

阿尼西坦对血管性痴呆大鼠的治疗作用

目的: 探讨阿尼西坦(Ani)对血管性痴呆(VD)大鼠的治疗作用。方法: 实验将45只大鼠随机分为对照组、模型组和Ani治疗组。采用改良四血管阻断法(永久灼闭椎动脉、可逆夹闭颈总动脉)建立VD大鼠模型,用Ani(300 mg/kg)灌胃治疗4周;对照组大鼠手术同上,但不阻断血供,生理盐水2 ml灌胃4周。4周后行Morris水迷宫实验,测试各组大鼠空间学习记忆能力;采用免疫组化法检测半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)在海马齿状回的表达。结果: Ani组大鼠学习记忆能力较模型组明显提高(P＜0.05),caspase-3在海马齿状回的表达水平比模型组明显降低(P＜0.05)。结论: Ani能增强VD大鼠的空间认知能力,机制可能与其下调caspase-3表达而保护海马细胞免受凋亡损伤有关。     

心源性运动呼吸异常：心衰患者运动期间波浪式呼吸的临床观察*

目的: 探讨心力衰竭患者在运动期间诱发的异常波浪式呼吸模式(EIOB)的临床特点及发生机制。方法: 回顾分析38例NYHA Ⅲ-Ⅳ级患者完成的症状限制性功率递增极限心肺运动试验(CPET)。观察分析计算心力衰竭患者在CPET中EIOB的发生时间、频率、振幅等临床特点。结果: 本组患者男17女21在38例患者中,31例发生EIOB,发生率为81.6%。EIOB组每分通气量(VE )波浪振幅是(12±4)L/m(为平均值的81%±30%),周期(77.0±20.0)s。EIOB组中OB发生在运动前、运动中功率低于无氧阈时、恢复期或者全程分别为24、31、4和4例;除VE 外,在CPET的各项参数中,全部31例患者均表现EIOB的指标为VO₂、VCO₂、RER和PETO₂;29例患者 VE / V CO₂、VO₂/ VE 和BF出现EIOB;26例患者PETCO₂出现EIOB;25例患者VT、VO₂/HR出现EIOB;2例患者HR出现EIOB。结论: 严重心力衰竭患者易发生EIOB。就心脏功能对呼吸调控的影响及心衰患者呼吸异常发生机制进行了探讨。     

Genetical identification of Akebia and Aristolochia species by using Pyrosequencing

This study was performed to determine if Akebia and Aristolochia species (Akebia quinata Decaisne and Aristolochia manshuriensis Kom.) could be identified by genetic analysis of Pyrosequencing method, which is used to assess genetic variation. The Pyrosequencing results of Akebia and Aristolochia species showed different patterns. The Pyrosequencing analysis of A. quinata Decaisne was very different compared with that of A. manshuriensis Kom. Pyrosequencing analyses might be able to identify the Akebia and Aristolochia species.     

黑龙江省野生大豆的考察和研究

黑龙江省是我国大豆主产区之一,又是我国大豆生产的北界,但对全省野生大豆资源缺乏全面考察,因此,考察我省野生大豆资源,对丰富大豆种质基因库,适应科研和育种工作的需要均具有重要意义。     

关木通水煎剂对大鼠肾脏毒性的实验研究

目的:了解关木通水煎剂对大鼠肾脏毒性作用的毒理学特点。方法:分别给予正常大鼠0．625g·kg-1和10g·kg-1关木通,观察其对肾脏形态和功能的影响。结果:给予0．625g·kg-1。关木通8w k,大鼠肾脏形态和功能无改变。给予10g·kg-1关木通8wk,大鼠小管细胞变性明显,并有肾间质纤维化。结论:长期应用药典剂量关木通不造成明显的肾脏损害,而较大剂量应用则可致明显的肾功能异常。     

卷叶锦鸡儿——锦鸡儿属(豆科)一新种

报道了产于蒙古、内蒙古、宁夏和甘肃的锦鸡儿属(豆科)一新种--卷叶锦鸡儿。该种因叶轴全部宿存,荚果里外均被毛,植株垫状而与Caragana tibetica Kom.相近,但因小叶内卷,管状,横切面呈"O"形,翼瓣耳圆钝而不同。     

甘肃锦鸡儿（Caragana kansuensis Pojark.）及其易混种的分类学探讨

对甘肃锦鸡儿（Caragana kansuensis Pojark.）及其易混种进行了探讨,认为甘肃锦鸡儿与短脚锦鸡儿（C.brachypoda Pojark.）是两个不同的物种。在陕西北部、山西西北部等地被鉴定为甘肃锦鸡儿的类群,实为错误鉴定,其与甘蒙锦鸡儿（C.opulens Kom.）相近,区别在于前者小叶较狭,两面被毛较密,背面干后常发红色,也与白毛锦鸡儿(C.licentiana Hand.-Mazz.)相近,区别在于前者叶柄较长,小叶较长而狭,荚果近光滑。同意赵一之教授的观点,将其作为C.opulens的一个变异类型处理,发表新变种狭叶甘蒙锦鸡儿（C.opulens Kom. var. angustifolia Y. Z. Zhao ex Zhao. Y. Chang et F. C. Shi）。     

长白松的木材解剖及其分类问题

关于长白松的分类问题一直有争议^[6-11],根据作者对吉林省安图县二道白河产的长白松的木材解剖研究,发现其木材的射线管胞内壁具深锯齿,颇与欧洲赤松(Pinus sylvestris Linn.)相近^{[14] [15]},但以其木射线薄壁组织细胞水平壁无纹孔和晚材最后数列管胞弦壁上存在着排列成轴向单行小形具缘纹孔来看,这又显属赤松(Pinus densiflora Sieb.et Zucc.)的特征。因此,作者认为长白松的木材结构是处于欧洲赤松与赤松之间而更偏于赤松^[10],故确认其当归属于赤松的种群范围。     

Extended plant protection by an epiphytic Pseudomonas sp. derivative carrying the cry9Aa gene from Bacillus thuringiensis galleriae against the pine processionary moth Thaumetopoea pityocampa

A strain of Pseudomonas sp. isolated from the phyllosphere of Pinus nigra in northern Italy was used for the introduction and high expression level of the gene encoding the Cry9Aa entomocidal toxin from Bacillus thuringiensis spp. galleriae. Laboratory tests showed that the resulting bacterial construct was more efficacious in terms of LC₅₀ when compared to the purified toxin alone, against the first instar larvae of the pine processionary moth (Thaumetopoea pityocampa), suggesting that the encapsulation of the toxin within the bacterial cell may prevent the degradation of the protein. When the efficacy of the strain was compared in a long-term greenhouse experiment (102 days) with that of a commercial preparation of Btk (Foray 48B), the latter was superior in terms of total mortality, but its effectiveness decreased with time at a faster rate than that of the cry9Aa-Pseudomonas. Overall data indicate that the expression of Bt toxins in heterologous epiphytic bacteria offers potential for more efficient and persistent delivery of toxins to the target insect pests.     

穆坪耳蕨及其近缘种研究

作者对耳蕨属的穆坪耳蕨群作了分类学的研究, 共记录了国产种类18种。其中P.habaense, P.obtusipinnum, P.salminense, P.nigrum, P.melano-stipes等为新种;P.lichiangense(Wright) Ching为新组合。对P.tsuchuense等4种及P.qamdoense var.elongatum作了归并。本文还附有分类检索表。     

大青杨对不同干旱胁迫强度的形态和生理响应

为了研究大青杨对干旱环境的耐受性,通过聚乙二醇(PEG-6000)模拟干旱胁迫,对不同胁迫强度下大青杨的生长状态、生物量分配、生理生化应答特征进行测定分析。结果显示,随着干旱胁迫时间的延长和强度的增加,大青杨幼苗的苗高、地径生长量和生物量积累明显减少,轻度、中度、重度胁迫下苗高生长量分别下降了17.71%、20.29%、45.96%,地径生长量下降了4.78%、13.62%、17.29%,根冠比上升了11.93%、32.61%、64.10%。叶片相对含水量呈下降趋势,相对电导率呈上升趋势,轻度、中度、重度胁迫下相对含水量分别比对照低23.60%、38.56%和66.78%,相对电导率比对照高106.97%、161.84%、241.75%,说明干旱胁迫对叶片造成了明显的损伤。脯氨酸、可溶性蛋白、可溶性糖含量均呈现先上升再下降的趋势,且轻度胁迫比中度、重度胁迫变化幅度小。在胁迫前期和中期均高于对照,说明大青杨幼苗有一定的抗旱能力。在胁迫末期有低于对照的趋势,此时幼苗细胞、组织受到了不可逆转的伤害。大青杨叶片的净光合速率明显呈现双峰模式,受胁迫幼苗显著低于对照且到达峰值的时间不同。胁迫后幼苗的第一个峰值出现的时间比对照提前2h。大青杨能够忍耐短时轻度的干旱胁迫环境,中度和重度干旱胁迫对大青杨幼苗期的生长和生理过程有显著影响。