一种新的生物组织固定方法——微波辐射固定

微波辐射使生物组织均匀产热,灭活酶,可以广泛用于光镜、电镜、常规染色、各种特殊染色及免疫组化研究中组织标本的固定。固定液浸泡微波固定的方法可用于大块组织的快速固定,且染色效果更好。是一种较为理想的固定方法。     

微波照射(M W I)在组织学中的应用

近年来国外利用微波（ＭＷＩ）技术对组织进行固定和染色均获得良好效果,在医学领域中,无论是基础医学还是临床学科,微波技术以其方便、快捷、无污染的优点,均证明是具有广泛前景的技术手段,目前日益得到大家的重视和应用。在组织学中一般组织的固定大多采用传统的化学固定及低温冷冻固定方法,化学固定组织时间较长,低温冷冻固定,存在着组织结构易被冰晶破坏,对比染色效果差,细胞核着色不清晰等缺点,我们采用化学固定剂结合微波辐射热固定法,即利用微波对组织均匀穿透的特点和其高频振动所产生的能量使组织迅速固定,对组织进行…     

Ramos免疫组织化学技术的敏感性研究

观察快速微波一步法（Ｒａｍｏｓ法）免疫组织化学技术的敏感性。选用１５种辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的特异性抗体（ＥＰＯＳ）,对５９例相应的恶性肿瘤组织进行快速微波免疫组织化学一步法标记。结果显示５８例为阳性（９８．３％）,其中弱阳性４例,中度阳性和强阳性为５４例。结果表明,Ｒａｍｏｓ法具有敏感性高、特异性强、快速而简便等特点,有广阔的应用前景     

微波对阿维拉霉素产生菌诱变效应的研究

阿维拉霉素产生菌SV微波诱变效应的研究发现：菌株SV对微波敏感（微波处理60s,SV菌株存活率低于10％）,菌落形态变化大。微波诱变处理最佳作用方式为培养皿不加盖、快速冰上冷却,最佳处理时间为50s（其正突变率25．3％）。通过微波诱变处理、阿维拉霉素推理筛选,最终获得一株稳定性良好,阿维拉霉素产量达到21．5mg／L,较出发菌株提高119．4％的突变株SV-15。     

应用微波辐射促进组织块浸银染色

目的：探索微波辐射对组织块浸银染色各步骤的作用及微波在其中的应用方法。方法：在组织块浸银染色过程中,对组织块的固定,浸银,还原等步骤进行不同强度的微波辐射处理。结果：微波辐射明显促进了浸银,还原作用,应用适宜强度的微波辐射染色效果比常规染色有更多的优点。结论：恰当地应用微波辐射缩短组织块浸银染色时程,切实可行。     

微波高温灭活及自体髂骨异体骨粒复合骨水泥修复治疗长骨骨巨细胞瘤骨缺损

目的：探讨微波高温灭活及自体髂骨、异体骨粒复合骨水泥修复骨巨细胞瘤病灶刮除后骨缺损的临床应用效果。方法：应用原位分离插入式微波天线高温灭活技术,自体髂骨、异体骨粒复合骨水泥修复21例长骨骨巨细胞瘤术后骨缺损,从手术技术、肿瘤复发情况、肢体关节功能等方面全面综合评价此方法临床应用效果。结果：21例患者均获得骨性愈合,无骨折及内固定断裂发生,2例复发,复发率9.8%;肢体关节功能优18例（85.7%）、良3例（14.3%）、中差0例。结论：微波高温能彻底杀灭肿瘤组织降低复发率,自体髂骨保证与近关节软骨下骨愈合,异体骨粒复合骨水泥能良好充填残余瘤腔、且具有良好的生物力学性能,以防发生关节软骨面塌陷。     

Wnt信号通路GS蛋白在胃癌中的表达和临床意义

目的：研究wnt信号通路的中GS蛋白（谷氨酰胺合成酶）在胃癌组织中的表达,探索其在胃癌发生、发展中的意义。方法：用免疫组织化学法测定胃癌组织（110例）、肠化生组织（30例）、不典型增生组织（20例）及慢性浅表性胃炎组织（60例）中GS蛋白表达。用快速尿素酶法与病理组织切片染色法检测上述各组织中HP感染的情况,并予统计学分析比较其差异。结果：胃癌组织GS高蛋白表达与组织分型、分化程度、淋巴结转移密切相关（P〈0．05）,与肿瘤大小、部位、TNM分期、Borrmann分型、性别、年龄等无明显相关（P〉0．05）。GS表达与HP感染密切相关。结论：GS蛋白高表达同胃癌生物学行为密切相关,在胃癌的发生、发展中起重要作用。     

AO微型钢板与克氏针固定在断指再植术中的临床应用比较

目的：比较AO微型钢板与克氏针内固定在断指再植术中的临床应用效果。方法：断指患者52例,其中26例（34指）断指采用AO微型钢板内固定治疗（观察组）,另26例（37指）采用克氏针交叉固定治疗（对照组）,术后均辅以功能康复训练。比较两组患者的手术时间、骨折愈合时间及断指功能恢复优良率。结果：观察组与对照组断指再植平均耗时分别为（83．5±10．2）min、（62．7±8．3）min（P〈0．01）,骨折愈合时间分别为（5．8±0．9）周、（8．4±1．7）周（P〈0．01）,断指功能恢复优良率分别为91．2％、62．2％（P〈0．01）。结论：在断指再植术中应用AO微型钢板内固定与克氏针比较,虽手术耗时较长,但骨折愈合时间短,断指功能恢复优良,值得临床推广应用。     

利用微波固定组织的收缩率

目的探讨利用微波辐射固定、微波辐射与固定液结合固定组织的收缩程度。方法将组织分成40组,用一定强度的微波辐射或一定强度的微波辐射与不同固定液结合方法固定动物组织,并制做石蜡组织切片和HE染色,在此过程中测定各步骤前后的组织块体积,计算出收缩率。结果与结论一定强度的微波辐射和一些微波辐射与固定液结合方法固定的组织收缩率低,这些组织的切片具有细胞质均匀,染色鲜艳,细胞核大而清晰的良好效果。     

应用坚固内固定技术治疗颌骨骨折的效果分析

目的：探究坚固内固定技术对颌骨骨折的治疗运用,为颌骨骨折的治疗方法选择提供理论指导。方法：选取我科自2009年4月-2012年7月收治的80例下颌骨骨折患者行手术切开复位、小型和微型钛板坚固内固定术治疗,纳入内固定组,并选取同期80例行颌间固定的颌骨骨折患者,纳入颌间固定组,对比两组患者治疗效果。结果：两组患者术后3个月张口度及张口型均得到明显改善,内固定组改善程度较颌间固定组更为显著（P〈0．05）;内固定组治疗周数、口臭及咬合错乱发生率均低于颌间固定组（P〈0．05）;内固定组疗效评价优43例,良26例,有效率86．3％,颌间固定组分别为31例和17例,有效率60．0％,内固定组治疗效果显著优于颌间固定组（P〈0．05）。结论：坚固内固定技术具有组织相容性高、口功能恢复快、不良反应发生率低等优势,是治疗颌骨骨折的安全、可靠、简便的治疗方案,能够有效保证患者的预后和生活质量,值得临床普遍应用。     

动力髋螺钉和股骨近端髓内钉两种内固定方式治疗老年股骨粗隆间骨折临床疗效

目的：比较动力髋螺钉（DHS）和股骨近端髓内钉（PFN）两种内固定方式治疗68例老年股骨粗隆间骨折临床疗效。方法：将68例股骨粗隆间骨折老年患者随机均分为两组,分别采取DHS和PFN不同内固定方式进行治疗,比较两组的术中出血量、手术时间、术后疗效及术后并发症发生率。结果：PFN组的优良率为91．18％,明显高于DHS组的70．59％（P=0．031〈0．05）;PFN组的术中出血量、手术时间及愈合时间均优于DHS组（P均〈0．05）。PFN组的并发症发生率为2．94％,低于DHS组的17．65％（P=0．046〈0．05）。结论：PFN较DHS固定方式治疗老年股骨粗隆间骨折更有效,并发症少,安全性大。     

不同内固定方式对后踝骨折固定的生物力学效果及临床疗效分析

目的：比较不同内固定方式对后踝关节骨折固定的生物力学效果及临床疗效。方法：选择2009年1月-2010年12月来我院就诊经X线检查确诊的后踝骨折患者28例为研究对象,根据所使用内固定方法不同,分为拉力螺钉组和微型钢板组,随访比较两组的手术时间、出血量、固定成功率、住院时间、后遗症及生物力学效果。结果：所有患者均随访至拆除内固定,拉力螺钉组和微型钢板组随访时间（t=-2．102）进行比较,P〉0．05两组差异无统计学意义。两组手术时间（t=4．293）、手术出血量（t=6．827）、固定成功率（2=,5．568）和住院时间（t=3．903）比较,P均〈0．05,差异有统计学意义。当骨折块波及胫骨远端关节面s25％和其〉25％时,两组内固定失效临界压力比较,P〈均0．05,两组内固定压力差异无统计学意义。结论：由于后踝关节的特殊结构和复杂的力学特点,拉力螺钉内固定在治疗效果优于微型钢板内固定法,但当骨折块波及胫骨远端关节面〉25％生物力学效果微型钢板内固定法更佳,因此根据患者个体骨折差异选择合适的内固定方法。     

高压消毒蒸锅在石蜡切片免疫组织化学反应抗原恢复中的应用

将石蜡切片浸泡于１ｍｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ缓冲液（ｐＨ８．０）中,置入高压消毒蒸锅处理（１２０℃,１０３ｋＰａ）１０ｍｉｎ,以恢复组织中因甲醛固定而被封闭的抗原。结果表明,一些常规免疫组织化学反应呈阴性的组织抗原,经本法处理后呈阳性反应;对不经本法处理即呈阳性的组织抗原,可大大提高第一抗体的稀释度或缩短孵育时间。同微波方法相比,本法可一次处理数百张切片,且对切片和组织的形态无明显损害。因此是石蜡切片免疫组织化学反应组织抗原恢复的理想方法     

喉癌组织内皮素-1和血管内皮生长因子-C的表达与预后的关系

目的：探讨喉癌组织内皮素-1（ET-1）和血管内皮生长因子-C（VEGF-C）的表达与预后的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测80例喉癌组织及62例喉良性组织ET-1和VEGF．C的表达,探讨二者与喉癌患者预后的关系。结果：喉癌组织ET-1及VEGF-C阳性率分别为56．3％和57．5％,喉良性组织分别为19．4％和21．0％,差别具有统计学意义（P〈0．05）;ET-1及VEGF-C与喉癌患者TNM分期、淋巴转移显著相关（P〈0．05）,与组织学分级、年龄及性别无关（P〉0．05）。结论：ET-1与VEGF-C参与喉癌的发生机制,且与肿瘤的转移侵袭等生物学行为显著相关。     

AF系统手术结合中药治疗胸腰椎骨折脱位的临床研究

目的为了探讨AF系统手术在治疗胸腰椎骨折脱位中的效果及中医药在促进胸腰椎骨折脱位康复中的作用。方法选取46例胸腰椎骨折脱位患者．随机分成两组（手术组和手术加中药组）,手术组切开复位采用AF系统内固定,手术加中药组在手术前后辨证给予中药治疗,平均随访2．5年,并分别于装、取内固定物时取标本行组织切片,观察患者症状改善及组织学改变情况。结果两组胸腰椎骨折脱位均达良好的复位固定（P〉0．01）;两组症状恢复比较,手术加中药组优于手术组（P〈0．01）;组织学观察发现取出内固定时手术组组织较致密。结论AF系统手术能使胸腰椎骨折脱位达到满意的复位及固定．中药的使用促进了病人康复。     

胃癌组织中EN01、M2-PK蛋白表达及其临床意义

目的：探讨胃癌组织中烯醇化酶-α（enolase-α,ENOD、肿瘤型丙酮酸激酶（tumor M2pyruvatekinase,M2-PK）的表达、相互关系及临床病理学意义。方法：应用免疫组织化学SP染色方法分别对55例胃癌组织和23例胃良性病变组织切片染色,观察胃癌组织和良性病变组织EN01、M2．PK的表达情况及分析两者临床病理关系。结果：胃癌组织中EN01阳性表达率为67．3％（37／55）,明显高于胃良性病变组30．4％（7／23）（P〈0．01）,其表达与胃癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均显著相关（均P〈0．05）。M2-PK在胃癌组织中的阳性表达率为78．2％（43／55）,明显高于胃良性病变组织39．1％（9／23）（P〈0．01）,其表达与胃癌分化程度、浸润深度均显著相关（均P〈0．05）。胃癌组织中EN01与M2-PK的表达呈正相关（r：=0．5729,P〈0．05）。结论：EN01和M2-PK的表达上调与胃癌的发生、发展可能有关,联合检测两种蛋白在肿瘤组织中的表达,对临床判断胃癌的预后有一定的指导意义。     

用疏水色谱法复性并同时纯化重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子

目的：建立一种简单、快速复性并同时纯化大肠杆菌表达的重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）的方法。方法：研究rhGM-CSF在疏水色谱（HIC）上的复性和纯化机理,并对固定相和流动相进行选择和优化,包括固定相配基、流动相中盐的种类、流动相pH值、流动相中还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）的比例,以及流动相中尿素的浓度。结果：优化后的固定相为PEG600,流动相中的盐为（NH4）2SO4,流动相pH值为7．0,流动相中添加2．0mol／L尿素、1．8mmol／LGSH和0-3mmol／LGSSG。在优化条件下,HIC可使rhGM-CSF在分离纯化的同时得到复性,比活达1．58×10^7U／mg,纯度为95．7％,质量回收率为56．8％。结论：建立的疏水色谱复性和纯化工艺可简化操作步骤,缩短生产周期。     

油菜花粉总黄酮的微波辅助提取及其抗氧化活性研究

采用微波辅助提取法提取油菜花粉总黄酮,通过单因素和正交试验,得到最佳提取条件：80％的乙醇、1：20的料液比、提取时间140s、微波功率242W、提取3次,总黄酮质量分数为（2．64±0．05）％。同时还研究提取物对羟自由基、DPPH自由基的清除作用,以及对小鼠肝组织脂质过氧化的抑制作用,自由基半清除质量浓度和脂质过氧化丰抑制盾奄浓度分剐为0．115、0．325和0．065mg／mL。     

EPR和MDA两种方法在自由基检测中的应用比较

目的：利用快速减压动物模型,比较电子顺磁共振（EPR）和MDA测定在自由基检测中的应用。方法：大鼠在0．6MPa abs压缩空气中暴露60min,快速（1min）减至常压,分别于45min、90min、180min处死,取肺组织匀浆,检测自由基、MDA含量和总抗氧化能力。结果：大鼠肺内自由基、MDA含量在快速减压后90min均显著增高（P＜0．05）,180min恢复至正常,但Vc处理组在180min时自由基含量仍很高（P＜0．01）,而MDA未见明显异常,各组总抗氧化能力均增高。结论：EPR方法可直接对自由基进行定性定量分析,而MDA测定则说明自由基累积致组织损伤的程度,两者可互为补充。     

EGFR和EGFRvⅢ在胃癌中的表达及意义

目的：检测表皮生长因子受体（EGFR）及表皮生长因子受体Ⅲ型突变体（EGFRvⅢ）在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌发生、发展的关系及其与各,临床病理特征之间的关系。方法：采用免疫组织化学染色法（S-P法）检测105例胃癌组织及癌旁正常胃组织中EGFR和EGFRvⅢ蛋白的表达水平,并将检测结果与临床病理参数进行综合分析。结果：胃癌组织及正常胃组织EGFR和EGFRvⅢ的表达率分别为46．67％、35．24％和7．62％、3．81％,胃癌组织表达明显高于正常胃组织（P〈0．01）;二者的表达与性别和年龄均无相关性（P〉0．05）,与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期有相关性（P〈0．05）。结论：EGFR和EGFRvⅢ在胃癌组织中存在高表达,与胃癌的发生、发展有一定关系,并与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期密切相关。