牛胰多肽（BPP）与DPPC脂质体相互作用的付立叶变换红外光谱研究

本文详细报导用付立叶变换红外光谱法研究去氧胆盐(DOC)和牛胰多肽(BPP)与DPPC脂质体的相互作用.发现DOC和脂质作作用后,DPPC的CH:对称和反对称伸展振动频率向高波数方向移动,相交曲线变宽,相变温度降低;BPP和DPPC作用后,红外光谱无明显变化,但它却能抑制由DOC对DPPC脂质体的上述作用.从而对BPP具有细胞保护作用的分子机制作了进一步的阐述.     

侧脑室注射牛胰多肽对家兔糖耐量和血清胰岛素浓度的影响

在家兔侧脑室内微量注射牛胰多肽能增加其糖耐量及血清胰岛素浓度。这种作用与牛胰多肽注射剂量有明显依从关系,并被预先皮下注射阿托品所部分阻断。结果提示,中枢给予牛胰多肽可能部分通过迷走神经途径增加血清胰岛素的释放而增加糖耐量。     

牛胰多肽（BPP）二级结构的红外光谱和圆二色谱分析

牛胰多肽（ｂｏｖｉｎｅ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ，ＢＰＰ）是胰脏分泌的一种含有３６个氨基酸的多肽「１」，ＢＰＰ能预防和治疗由胆酸盐诱发的大鼠急性胰腺炎，具有细胞保护作用。本文用傅里叶变换红外光谱（ＦＴ－ＩＲ）和圆二色谱（ＣＤ），对ＢＰＰ在水溶液中的二级结构进行了研究，两种方法的分析结果互相补充，进一步确定了ＢＰＰ在溶液状态的二级结构，本研究为进一步探讨ＢＰＰ抑制膜融合的机理打下     

牛胰多肽与脂作用时插膜状态的研究

利用单层膜和荧光技术,研究牛胰多肽（ＢＰＰ）和磷脂单分子层及脂质体的相互作用。ＢＰＰ与磷脂单分子层作用的动力学曲线以及临界插膜压表明它和磷脂,尤其是酸性磷脂有较强的相互作用;荧光研究表明,与脂作用后多肽内源性荧光光谱峰位蓝移,说明发荧光的酪氨酸残基存在由亲水环境向疏水环境的转变。荧光猝灭实验表明多肽与脂作用后,其内源性酪氨酸残基荧光更不容易被碘盐所猝灭,提示酪氨酸残基受到了脂双层的屏蔽作用;自旋标记磷脂的猝灭实验计算结果表明ＢＰＰ插膜深度在磷脂头部与脂酰链交界处稍内侧     

牛胰多肽（BPP）抑制CL／PC脂质体的膜融合

Ｃａ＾２＋能诱发ＣＬ／ＰＣ脂质体的聚集,漏出及进一步的融合,其作用大小随着Ｃａ＾２＋浓度的增高而增强。吸收、荧光和冷冻断裂电镜等方法所得结果证明了这一点。ＢＰＰ抑制由Ｃａ＾２＋诱发的ＣＬ／ＰＣ脂质体的聚集和融合,其作用的大小随ＢＰＰ的增加而增大。上述三种方法从不同角度都给出了同样结果,肯定了ＢＰＰ抑制ＣＬ／ＰＣ脂质体由Ｃａ＾２＋诱发的聚集和融合作用。     

牛胰多肽与CL／PC脂质体作用后二级结构的变化

用傅立叶变换红外光谱研究了ＢＰＰ与膜作用后其二级结构的变化,通过对红外光谱中酰胺Ｉ谱带进行解卷积、微分及曲线拟合等处理,结果表明,ＢＰＰ与脂膜作用后,其二级结构中α－螺旋成分增多,无规卷曲成分减少。     

胰多肽对急性胰腺炎大鼠的细胞保护作用

用5%牛磺胆酸钠-胰蛋白酶溶液直接注入大鼠胰导管,制备成急性出血坏死性胰腺炎模型。由腹腔于制备前预防性地和制备后治疗性地结合注射剂量为3μg/kg 的牛胰多肽,能使病鼠的死亡率由对照的100%降到33%,已死鼠平均存活时间由对照的13±3小时延长到20±2小时,血清淀粉酶浓度升高的峰值降为对照的35%,胰腺组织学切片呈轻度急性胰腺炎或向慢性胰腺炎转化。单纯在制备前预防性地注射牛胰多肽或仅在制备后作治疗性注射,也有同样作用,但效果较差。这项结果提示,胰多肽对急性出血坏死性胰腺炎具有预防和治疗两方面的功效,即对胰腺有细胞保护作用。抑制胰酶的分泌和释放可能是它的作用机制之一。     

牛胰多肽对急性胰腺炎大鼠胰组织中磷脂酶A和胰蛋白酶活性的影响

以0.25％牛磺胆酸钠-0.25％胰蛋白酶溶液注入大鼠胰导管制备急性(出血坏死性)胰腺炎模型。观察剂量为 3μg/kg的牛胰多肽(BPP)对胰腺炎大鼠胰组织磷脂酶 A(PA)活性、钙含量、胰蛋白酶活性以及血清α_1-抗胰蛋白酶抑制力(STIC)的影响。结果如下:1.在伴注BPP的胰腺炎组,PA 活性、钙含量、胰蛋白酶活性及STIC 分别降为胰腺炎组的51％(P<0.001),75％(P<0.001)、20％(P<0.001)以及24％(P<0.001);2.在伴注碳酰胆碱的胰腺炎组,上述四项指标的水平升高。但在伴注碳酰胆碱及BPP 两者的胰腺炎组却分别降至伴注碳酰胆碱的胰腺炎组的39％(P<0.005)、51％(P<0.001)、40％(P<0.001)以及 59％(P<0.001);3.在伴注Ca~(2 )的胰腺炎组,上述四项指标剧升,注射 BPP对其无影响。结果提示,BPP 能降低大鼠胰组织内磷脂酶A 和胰蛋白酶活性及胰内钙沉积量。机制可能与 BPP打断胰酶活化链有关,是否还影响腺泡细胞膜上M受体的功能,有待探讨。     

牛胰多肽对大鼠胰腺外分泌细胞膜流动性的影响

胰多肽为含有36个氨基酸残基的直链多肽,是70年代后期发现的一种胃肠激素.本工作用荧光偏振法观察到,牛磺胆酸钠降低胰腺外分泌细胞膜的平均微粘度,而牛胰多肽能抑制牛磺胆酸钠的这一作用.结果提示,牛胰多肽有稳定胰腺外分泌细胞膜流动性的功能.     

精氨酸对牛胰核糖核酸酶氧化复性的时相性抑制作用

精氨酸常在重组蛋白的体外复性中,作为一种小分子添加剂用于抑制蛋白聚集。精氨酸对蛋白复性折叠过程本身的影响尚不清楚。首次以不易聚集的牛胰核糖核酸酶为研究对象,通过飞行质谱检测氧化复性中间体的变化,通过酶学活性检测蛋白活性的恢复过程,观察了精氨酸对氧化复性的直接影响。发现不同浓度精氨酸对牛胰核糖核酸酶的氧化复性有直接的抑制作用。特别在0.5 mol/L浓度时,精氨酸对牛胰核糖核酸酶氧化复性的抑制作用具有独特的时相依赖性:早期复性可持续至4 h,其活性恢复达30%后,晚期复性基本终止。这种抑制特征与脲的抑制作用有明显的不同,精氨酸没有完全抑制关键结构中间体的形成。结果说明,牛胰核糖核酸酶的氧化复性,除经关键结构中间体的主要通路外,还可能存在一个潜在复性通路,它是其氧化复性后期的关键限速通路。该复性通路可以被0.5 mol/L精氨酸完全阻断。     

八种脑-肠肽侧脑室内注射对大鼠基础胃酸分泌的影响

用乌拉坦麻醉大鼠作急性实验,采用连续灌流胃并收集流出液的方法,观察向侧脑室内注射微量脑-肠肽对大鼠基础胃酸分泌的影响。实验结果如下:(1)雨蛙肽、八肽胆囊收缩素、促甲状腺素释放激素及四肽胃泌素均使总酸排出量增加;(2)生长抑素、胰多肽、P 物质、胰高血糖素则使总酸排出量减少;(3)上述肽类用侧脑室注射的剂量作肌肉注射,除四肽胃泌素也产生明显的刺激胃酸分泌作用外,对胃酸分泌均无明显影响。以上结果提示,脑内的一些肽类可能以神经递质或调制物的方式,参与中枢对胃酸分泌的调节。     

促胰液素、八肽胆囊收缩素和迷走神经刺激对狗胰液和血清中胰多肽含量的影响

对10只麻醉下主胰管内插置导管的家狗进行急性实验。用放射免疫测定法测定静脉注射促胰液素(8μg/kg)和八肽胆囊收缩素(CCK_8,40ng/kg)以及电刺激胸迷走神经前后的胰液和血清中胰多肽的含量。结果表明,基础胰液中含有大量胰多肽免疫活性物质,平均排出量为3130±2200pg/15min,其平均浓度高于血清水平40倍左右,但是个体之间的变异范围较大。当静脉注射促胰液素和 CCK_8以及电刺激胸迷走神经后,胰液胰多肽排出量和血清胰多肽水平均增多,其中以电刺激迷走神经后尤为明显。高峰都在刺激后15min 内出现。经促胰液素,CCK_8和迷走神经刺激后,胰液中胰多肽排出量比刺激前分别增加105%,52%和200%。外源性促胰液素或 CCK_8刺激后,胰液中胰多肽与 HCO_3~-出量之间或胰液中胰多肽与淀粉酶排出量之间,分别均呈一致的关系。本文结果提示,胰多肽不仅是一种内分泌,它亦具有外分泌的特性。迷走神经、促胰液素和胆囊收缩素对胰多肽的释放具有调节作用。     

血糖浓度对糖尿病大鼠胰腺外分泌功能的影响

用链佐霉素诱导大鼠产生尿病,其胰腺组织淀粉的含量降低,胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）刺激所引起的胰淀粉酶分泌也明显降低。用一种可以降低糖尿病大鼠血糖,但不影响其血清胰岛素水平的药物－－钒酸钠灌胃,可翻转上述变化。体外实验分析表明,高糖可抑制胰腺泡蛋白质的合成,还可以引起胰腺泡膜丙二醛含量增加,从而提示,糖尿病大鼠胰外分泌功能障碍与血液葡萄浓度过高有密切关系。     

生长抑素在糖尿病大鼠胰腺外分泌功能降低中的作用

本实验观察到,用链佐霉素造成大鼠糖尿病模型,其胰腺组织中生长抑素含量明显升高。大鼠皮下注射生长抑素(100μg·kg~(-1)·d~(-1))5d,其胰腺组织中淀粉酶的含量明显降低。体外胰腺灌流也表明,生长抑素能抑制CCK—8刺激引起的胰腺淀粉酶释放。以上结果提示,糖尿病时胰腺组织中生长抑素含量的增加可能在胰腺外分泌功能降低中有一定的作用。     

促胰液素和胆囊收缩素族激素对豚鼠肝胆汁分泌的影响

用具备胃瘘和胆瘘的豚鼠于人工维持胆汁酸池恒定的条件下,观察促胰液素(SEC)和胆囊收缩素(CCK)族激素[包括雨蛙肽(CAE)、五肽胃泌素(G5)和内源性CCK]对肝胆汁分泌的影响及其相互作用。结果表明:静脉灌注SEC、CAE或肠内灌注左旋苯丙氨酸(L-PHE,促内源性CCK释放剂)后,胆汁流量、胆汁HCO~-_3和Cl~-排出量均显著增多,并呈剂量-效应关系,但静脉注射G5则无利胆效应。在恒速灌注SEC的背景下,CAE或CCK对胆汁HCO~-_3排出的效应分别大于它们单独给予时的效应(P<0.05或P<0.01)。这些激素对胆汁酸的排出量均无影响。上述结果表明,SEC,CAE和内源性CCK均有利胆作用,所刺激的肝胆汁属于不依赖胆汁酸部分。G5则无利胆效应。对胆汁中HCO~-_3的排出,SEC与CAE或内源性CCK间有相互加强作用。     

哺乳动物胰腺体部胰多肽（PP）免疫反应细胞的比较研究

采用SPA-GDN免疫组化染色技术,对人、大鼠、小鼠、豚鼠、猪、狗和猫等七种哺乳动物胰腺体部胰多肽(PP)免疫反应细胞的分布和形态进行比较研究,结果表明,上述七种动物PP细胞的分布和形态有明显的种间差异。人、大鼠和小鼠PP细胞主要位于胰岛周边部,形成环形结构,少量PP细胞散布在外分泌部的腺泡和导管;而豚鼠、猪和猫的PP细胞则主要分布在外分泌部腺泡和导管上皮间;狗的PP细胞在内、外分泌部均有分布。PP细胞的形态在上述动物间也有明显的差异,这可能与该细胞在不同动物的作用途径及功能不同有关。