蚯蚓谷胱甘肽还原酶分离提取的研究

本研究利用闪式提取与超声提取相结合的方法从蚯蚓中提取纯化了谷胱甘肽还原酶(GR),利用正交试验对提取条件进行了优化,并对GR的酶学性质进行了研究。结果表明,GR的最佳提取条件为:p H值7.5,料液比1∶5,闪提时间45 s,超声时间15 min。提取的GR比活力达到655.9 U/mg pr.,纯化了32.3倍,回收率为58.4%。利用SDS-PAGE电泳测得蚯蚓GR的分子量为110 k Da。GR的最适p H值和温度分别为8.0和50℃。     

蚯蚓谷胱甘肽转硫酶分离纯化的初步研究

本研究利用闪提技术,通过连续两次硫酸铵沉淀与柱层析的方法从蚯蚓中提取了谷胱甘肽转硫酶(GST),对提取条件和GST性质进行了初步探究。结果表明,GST的提取条件为:p H值7.0,闪提时间30 s,料液比1∶8,连续两次硫酸铵沉淀选取最佳饱和度分别为40%和80%。提取的GST比活力达到了1.236 U/mg Pr,纯化倍数达到了14倍,收率17.7%。利用SDS-PAGE电泳,得到GST亚基分子量约为25 k Da,GST分子量约为50 k Da。GST保持稳定的p H和温度的范围分别为p H 5.0~9.0和温度0~40℃。     

蚯蚓葡萄糖氧化酶的提取纯化研究

本研究采用闪式提取技术提取蚯蚓葡萄糖氧化酶(GOD)。利用正交设计优化实验条件,得到最优条件为:固液比1∶4.5(g/m L),闪提时间45 s,超声时间30 min。通过酸沉淀,羧甲基纤维素CM-22离子交换层析和DEAE离子交换层析实现了GOD的纯化,回收率达到了60.8%,比活达到了2684.2 m U/mg,纯化倍数达到37.2倍。     

响应面优化丙酮粉法提取金银花多酚氧化酶

对丙酮粉法提取金银花多酚氧化酶的工艺进行研究,结果表明,缓冲液p H、料液比、提取时间对PPO比活力影响显著。缓冲液p H与料液比交互作用极其显著,回归模型拟合性良好(R2=99.31%);影响显著顺序为:静置时间缓冲液p H值料液比;最优化工艺参数为:缓冲液p H7.5,料液比为1∶120,提取时间为14.5 min。在此条件下,酶比活力为137.389 U/mg。     

蚯蚓GSH-Px提取与纯化的研究

以蚯蚓为原材料提取纯化了GSH-Px,通过比较超声波提取法、组织匀浆法和闪式提取法,得出闪式提取法提取效果最佳.通过正交实验优选得到蚯蚓GSH-Px的最佳闪式提取条件为:料液比1:6(m/V)、提取液pH值8.0、提取时间1min.在最佳条件下锝到的粗提液经硫酸铵沉淀、选择性酸碱变性、DEAE-cellulose和Sephadex-G100柱层析,最终得到纯化的GSH-Px,比活达到157.08 U/mg,活性回收率达到12.32％.产物在SDS-PAGE上为单一条带,其亚基分子量约为26 kD.     

羊蹄叶过氧化物酶的纯化和酶学性质研究北大核心CSCD

采用磷酸缓冲液浸提法提取羊蹄叶POD,对影响酶提取的主要因素(料液比、浸提液p H、浸提温度和浸提时间)进行单因素实验和正交实验,用p H沉淀和丙酮沉淀对酶进行了纯化,并研究了其酶学性质。结果表明,羊蹄叶POD的最佳提取条件是料液比为1∶40,提取液p H为9,浸提温度是35℃,浸提时间为30 min。调节提取液的p H为5以及用1倍和0.8倍体积的丙酮沉淀提取液时蛋白相对沉淀量多和酶的比活性大。羊蹄叶POD以愈创木酚和H2O2为底物的Km分别是0.12 mmol/L和0.62×10-3mmol/L。Cu SO4对羊蹄叶POD活性有激活作用,而Zn SO4、Mg SO4、Ca Cl2、KCl和Na Cl对POD活性有抑制作用。研究证明羊蹄叶POD的提取和纯化方法简单有效,其酶学性质为理解羊蹄植物的生长特性和酶学应用提供依据。     

羊蹄叶过氧化物酶的纯化和酶学性质研究

采用磷酸缓冲液浸提法提取羊蹄叶POD,对影响酶提取的主要因素(料液比、浸提液p H、浸提温度和浸提时间)进行单因素实验和正交实验,用p H沉淀和丙酮沉淀对酶进行了纯化,并研究了其酶学性质。结果表明,羊蹄叶POD的最佳提取条件是料液比为1∶40,提取液p H为9,浸提温度是35℃,浸提时间为30 min。调节提取液的p H为5以及用1倍和0.8倍体积的丙酮沉淀提取液时蛋白相对沉淀量多和酶的比活性大。羊蹄叶POD以愈创木酚和H2O2为底物的Km分别是0.12 mmol/L和0.62×10-3mmol/L。Cu SO4对羊蹄叶POD活性有激活作用,而Zn SO4、Mg SO4、Ca Cl2、KCl和Na Cl对POD活性有抑制作用。研究证明羊蹄叶POD的提取和纯化方法简单有效,其酶学性质为理解羊蹄植物的生长特性和酶学应用提供依据。     

响应曲面法优化方格星虫多糖提取工艺

为了优化提取方格星虫多糖工艺实验条件,本研究以海南三亚海域方格星虫为主要原料,用胰蛋白酶作为酶解酶,在单因素实验基础上,采取响应面法研究超声波辅助酶法提取方格星虫多糖最佳工艺条件;探讨了p H值、液料比、超声波时间、酶底比、超声波温度、超声波功率、反应时间等7个因素的交互作用及其最佳水平。结果表明在超声波辅助酶法提取方格星虫多糖的实验过程中,单因素的最佳条件酶底比为2.5%、温度为50℃、浸提时间为2 h、料液比为1:17 g/m L、超声时间为1 h、pH值为8、超声功率为960 W,多糖的最大提取率为3.24%。该方法实验条件要求不苛刻,浸提时间短,提取率高,是一项新的实验尝试,实验结果为优化方格星虫的多糖提取理论参考。     

酶法协同超声波提取赤芝菌丝体多糖条件的优化

目的:本研究旨在优化赤芝菌丝体多糖提取条件。方法:采用酶法协同超声波法提取赤芝菌丝体多糖,以赤芝菌丝体粗多糖提取率为考察目标,通过单因素试验和正交试验,确定赤芝菌丝体多糖提取的最佳条件。结果酶法最佳提取条件为:果胶酶用量2.0%,酶解温度45℃,p H值为6.0,酶解时间60 min,多糖提取率为2.38%。在酶法处理基础上,进行超声波处理,超声处理最佳提取条件是:超声功率550 W,超声时间30 min(占空比5s/5s),料液比为1:35,多糖提取率为3.12%。     

超声辅助索氏提取忍冬果实中绿原酸的工艺优化

利用超声辅助索氏提取的方法从忍冬果实中提取绿原酸。单因素和正交试验表明,影响绿原酸提取率的主次顺序为:超声温度>乙醇浓度>超声时间>索氏提取时间>液料比;提取的最佳条件为:超声温度60℃,超声时间40min,乙醇浓度70%,液料比(mL∶g)30∶1,索氏提取时间2.5h。忍冬果实中绿原酸的提取率为2.95%;柱色谱分离纯化后的绿原酸红外谱图和标准品的红外谱图基本一致。本研究表明,超声辅助索氏提取忍冬果实中绿原酸的方法,缩短了提取时间,绿原酸提取率高。对忍冬果实的开发利用具有重要的指导意义。     

忽地笑中石蒜碱酶法提取及分离工艺研究

对复合酶法提取忽地笑石蒜碱的工艺进行优化,并用阳离子交换树脂分离石蒜碱。以纤维素酶与果胶酶的水溶液为提取溶剂,采用L9(34)正交试验考察了酶解p H、酶加入量、酶解时间和酶解温度等影响因素,以石蒜碱得率为指标,得最优提取工艺为:料液比1∶10,p H 4.5,酶添加量4%,酶解温度50℃,提取时间2.0 h,石蒜碱得率为0.1750%。D-001树脂纯化条件为:上样液p H为2,以3 BV/h流速上样,以含1.5 mol/L氨水的70%乙醇洗脱,流速为3 BV/h,初步分离后石蒜碱含量为15.28%。研究结果可为石蒜碱工业化生产提供参考。     

千年健总黄酮的超声提取工艺

为了研究千年健黄酮的超声提取工艺,通过单因素实验,研究了超声功率、超声时间、乙醇浓度、液固比等因素对黄酮得率的影响,利用正交试验对提取工艺进行优化。结果表明,各因素的影响次序为:超声功率乙醇浓度液固比超声时间,其最佳提取工艺条件为:超声功率为300W、超声时间15min、乙醇浓度50%、液固比30:1,最佳工艺条件下黄酮提取率为0.5868%。     

木瓜蛋白酶法提取荸荠皮多糖

本文以低温烘干的荸荠皮为原料,利用木瓜蛋白酶提取荸荠皮中的多糖。通过单因素实验和正交实验研究了p H、木瓜蛋白酶用量、液料比、酶解温度、酶解时间对多糖提取效果的影响。结果表明,最佳提取工艺条件为:p H 4,木瓜蛋白酶用量0.3%,液料比25∶1 m L/g,酶解温度50℃,酶解时间2 h。验证实验表明,多糖平均得率可达30.03%,远高于相同条件下水提法的得率21.23%,且重现性好。本实验为提高荸荠的综合价值提供了理论基础和实验方法。     

沙棘果渣总黄酮提取工艺优化及抗氧化活性研究

利用果胶酶协同超声波法,对沙棘果渣有效成分总黄酮的提取工艺及其抗氧化活性进行了研究.以提取率为指标,通过酶用量、液料比、乙醇浓度、提取时间、提取温度、超声功率等单因素分析,选定酶用量、液料比、超声提取时间3个因素进行响应面试验,确定提取优化工艺条件为:果胶酶用量5.1％,液料比41∶1,超声提取时间81 min,此条件...     

从蚯蚓中联合提取抗氧化酶SOD、CAT的方法研究

本研究采用闪式提取技术,固液比为1:4(m/V)的2.5 mmol/L pH 7.0磷酸缓冲液,提取转速5500 rpm,提取时间2 min,从蚯蚓体内提取出SOD、CAT,并通过羧甲基纤维素CM-22离子交换层析实现SOD和CAT的联合提取分离,SOD、CAT的活性回收率分别达到88.23%和69.5%。在纯化工艺中经过丙酮沉淀和柱层析技术得到蚯蚓SOD纯品,比活达到9352 U/mg,产物在SDS-PAGE上为单一条带,其亚基分子量约为17 kD;通过柱层析纯化了蚯蚓CAT,比活达到22606 U/mg。     

纤维素酶法提取川牛膝多糖

以得率为评价指标,采用纤维素酶提取川牛膝多糖。对药材粒径、酶的用量、酶解温度、酶解时间、溶剂p H、液固比和提取时间等因素进行了考察,结合正交试验设计,得到最佳工艺条件:药材粒径550~830μm、酶用量4 mg/g、酶解温度50℃、酶解时间90 min、溶剂p H5.0、液固比60(m L/g)和提取时间30 min,发现在此条件下,川牛膝多糖得率为71.70%。     

花魔芋中三种功能性成分联产分离工艺

采用超声辅助联产工艺法对魔芋活性成分的提取及分离进行了研究。用正交优化试验考察了提取神经酰胺与生物碱的影响因素,确定了最佳提取工艺条件:提取温度60℃、乙醇浓度70%、提取时间20 min、料液比1∶40。在此条件下得到魔芋中神经酰胺提取量为1.57 mg/g,生物碱提取量为0.41 mg/g。采用柱层析、重结晶等技术纯化后神经酰胺和生物碱的纯度分别为80.77%和71.68%;采用乙醇沉淀法从魔芋残渣中提取KGM类化合物,提取量为0.51 g/g,纯化后的纯度为93.86%。进一步对神经酰胺的保湿性能进行研究,结果显示其保湿效果强于橄榄油和甘油。本研究对提高魔芋的综合利用、降低生产成本、增加附加经济值以及提高经济效益具有重要意义。     

海参制备胶原蛋白肽工艺研究

主要研究以海参体壁为原料制备胶原蛋白肽的工艺条件,通过单因素和正交试验对酶解条件进行优化。结果表明,使用木瓜蛋白酶的酶解效果最好,最佳酶解条件为:酶解温度55℃、p H值7.0、加酶量2%、料液比1:30和提取时间3 h,此条件下海参胶原蛋白肽水解度达到14.23%。     

响应面优化塔拉种子多糖的超声波提取及其抗氧化性研究

为获得塔拉多糖超声波提取的最佳工艺,利用中心组合实验设计原理,采用四因素三水平的响应面分析法,获得多元二次线性回归方程,以多糖提取率为响应值做响应面。并考察塔拉多糖的体外抗氧化活性。结果表明：塔拉多糖的最佳提取工艺条件为,超声辅助提取超声功率363 W,超声温度56℃,超声时间23 min,料液比1：17（g·mL^-1）,塔拉粗多糖的最大提取率（25.56%）与理论推测值（25.71%）相差较小。经纯化后塔拉多糖提取率为17.82%。以VC为阳性对照,对不同纯度的塔拉多糖进行抗氧化性的研究,发现其纯度越高,对ABTS自由基的清除能力越强。     

泽漆中金丝桃苷的提取工艺

对大戟科植物泽漆(Euphorbia helioscopia L.)中金丝桃苷的提取工艺进行优化。首先就溶剂p H(A)、液料比(B)、浸渍时间(C)和浸渍温度(D)等单因素进行考查,再进一步选择溶剂p H(8,9,10和11)、液料比(15∶1,20∶1,25∶1和30∶1)、浸渍时间(8,10,12和14 h)为考察因素,通过正交试验方法,以金丝桃苷为指标,优选提取工艺A2B2C2,即在25℃,溶剂p H为10,液料比为20∶1,浸渍12 h条件下金丝桃苷的提取率最高,为2.286 mg/g。同时发现在此条件下药材中2'-O-没食子酰基金丝桃苷基本转化成金丝桃苷。这为全面利用该药材提供了重要参考。