测定培养基pH值的试纸液滴法

AMethodforMeasuringpHValueofMediumbyTestPaperZHANOXian－Yin,LIURen－Xiang(DepartmentofAgronomy,GuizhouAgriculturalCollege,Guiyang55002）植物组织培养对培养基的pH值有严格的要求。pH值过高或过低不仅影响琼脂的凝固,而且也直接影响培养效果。测定pH值一般采用pH试纸或酸度计法。前者粗放,后者比较准确。我们在工作中观察到用pH试纸测定以蒸馏水配制的培养基时,纸上变色极不灵敏、准确度很低。如果将液滴转移到白瓷板上观察颜色变化,则可大大提高变色灵敏度,从而使测定的准确度大为提高,在某些方面甚至比用酸…     

植物组织培养因子与培养基中pH值的关系

MS培养基中添加不同种类和浓度的植物生长调节剂时,灭菌前后培养基中pH值均有一定幅度的下降,pH的变化值(△pH)为-0.2～-0.5,下降幅度因植物生长调节剂的种类和浓度而异;培养基中pH值随材料培养时间的延长而递减,降幅可达1.5,下降幅度与转接材料种类和多少也有关系.     

高压灭菌对培养基成分的影响

综述了高压蒸汽消毒对培养基无机盐,碳水化合物,氨基酸、渗压剂、植物激素和培养基渗透压、ｐＨ值的影响,就如何缩小高压蒸汽消毒对培养基成分的影响,提出了一些建议。     

遗传转化选择培养基的改良

用根癌农杆菌（Agrobacteriumtumefacirens）的Ti质粒进行植物基因转移的遗传操作过程中,必须配制含一定浓度卡那霉素（Km）和校等青霉素（Cb）的NBK和MS选择培养基。Km是遗传转化选择剂,Cb是剩余工程菌生长抑制剂k’,两者均不耐高温。高压灭菌后只能待琼脂培养基自然冷却到45”C左右（盛培养基的容器不烫手）时再另加入并摇匀,趁培养基尚未凝固这一段时间内及时分装到50～100ml的三角瓶中。显然,这在实际操作上较为麻烦：（回）培养基高压灭菌后必须随时观察它的温度变化;（2）安排稍有不周就会耽误其它事情;（3）时间太紧迫,…     

培养基琼脂用量计算的商榷

植物组织培养中,大多数采用固体培养基。固体培养基是以琼脂(又称洋菜)为支持物的。目前一些资料中一般报告用培养基琼脂的百分含量来表示培养基的硬度。笔者认为,这种提法不太科学,而应该用胨力强度(又称凝胶强度)来表示琼脂培养基     

镰刀菌李瑟组研究：Ⅲ.镰刀菌李瑟组的生长发育和培养基pH值关系的…

培养基的ｐＨ值能影响李瑟组镰刀菌的生长速度,菌落形态,色泽,产孢量及大孢子形状等。ｐＨ３－４菌落偏向红色,ｐＨ６－７菌落为紫色,ｐＨ１０则有此菌株变为淡蓝色,灰色。但菌株能改变基物的ｐＨ值。李瑟组镰刀菌的６个菌株最适生长发育ｐＨ值为６－７。     

植物组织培养中琼脂浓度和pH对培养基凝固程度的影响

植物组织培养中多数植物pH要求5.0～6.2,琼脂浓度一般选用7～8mg·L-1,最高可达16 mg·L-1,较低的5 mg·L-1,而我们观察到培养基凝固程度受pH影响较大,适当的降低琼脂浓度不仅可以满足外植体的正常支撑需求,且培养效果更佳.本文研究pH和琼脂浓度对培养基凝固程度的影响,以确定组织培养技术中合理的琼脂浓度.     

培养基中金属离子络合平衡的微机计算

CalculatingtheConcentrationofMetalIonsinCultureMediumwiththeAidofMicrocomputerZHAObeoHua，SUNDaye（Denytl；w？llOfmp，HdriN～［］jzz；m7’n－－y，Sh八邮M呷050016）现代植物生理学等领域中的实验研究常常采用由整株培养发展到细胞及原生质体培养的体系，特别是在Ca’”信使等功能的研究中更是如此。由于细胞及原生质体培养基中成分复杂，常含有多种金属离子及络合剂，因此在精确研究某一金属离子的生理作用时，为了消除其他离子的干扰，经常遇到几种金属离子与络合剂问络合反应的计算。这种计算非常复杂，有时须借助…     

培养基初始pH值对木聚糖酶合成的影响

本文探讨了培养基三种初始ｐＨ值对木聚糖酶合成的影响。试验结果表明,培养基初始ｐＨ值对木聚糖酶的合成有重大影响,低ｐＨ有利于提高木聚糖酶活力。在碳源为７ｇ／Ｌ条件下,初始ｐＨ值为４．０时合成的木聚糖酶活力高达３２．８７ＩＵ／ｍｌ,酶产率和得率分别为６５７４．０ＩＵ／Ｌ·ｄ和４６９５．７ＩＵ／ｇ木聚糖。酶活力和酶产率是初始ＰＨ５．０的１．７倍,分别是初始ＰＨ６．０的３．８倍和２．３倍。进一步研究表明,     

PH对苏去金杆菌晶体致病性的影响

报道了以苏去金杆菌５个菌株的晶体,经粘虫和黄粉虫幼虫的肠液在ＰＨ为６．４、７．４、８．４和９．４的缓冲液中（２８℃）消化６小时后,其上清液（消化部分）和沉淀（未消化部分）对三龄未粘虫和黄粉虫幼虫的毒力。结果表明,４５７株、ＨＤ－１株和１－４－１３株的上清液和沉淀对粘虫均有不同程度的毒效,Ｔ８４－１株和Ｔ２株的上清液和沉淀对粘虫均无毒效;而对黄粉虫幼虫,以ＰＨ９．４时的上清液和沉淀均无毒效,在ＰＨ６     

光质对一品红叶离体培养中形态发生及生化变化的影响

本文讨论了将光质应用于一品红(Euphorbia pulcherrima)大规模细胞繁殖及形态发生调控的可行性,并测定了一些形态及生化指标作为这种调控的参数。 以一品红试管苗的叶片作为外植体,置于MS培养基中并分别培养于白(W)、红(R)、黄(Y)、蓝(B)、绿(G)色光及黑暗(D)下,一个月后进行测定。蓝光和黄光明显促进出苗。而愈伤组织形成的情况则正相反,红光利于愈伤组织的形成,黄光效果最差。过氧化物酶、过氧化氢酶活力及蛋白质、RNA、碳水化合物的含量与愈伤组织形成有较为一致的关系,但与分化不直接相关。 实验中还测定了叶绿素a、叶绿素b及类胡萝卜素的含量。白光与蓝光均能促进叶绿素及类胡萝卜素的合成,但蓝光中chl b/chl a的比率较高。此外,本文尚涉及暗处理中的晶质化现象(vitrification)及其成因。     

SOME FACTORS AFFECTING GROWTH OF APHANOMYCES EUTEICHES IN SYNTHETIC MEDIA

Papavizas , G. C., and C. B. Davey . (USDA, ARS, Crops Research Division, Beltsville, Maryland.) Some factors affecting growth of Aphanomyces euteiches in synthetic media. Amer. Jour. Bot. 47(9) : 758–765. Illus. 1960.—Some nutritional requirements of 3 single-zoospore isolates of Aphanomyces euteiches Drechsler were studied in a synthetic medium (SM-1) consisting of mineral salts, D-glucose, DL-glutamic acid, and thioglycolic acid. Micronutrients were essential for growth, whereas vitamins were not. Controlled pH experiments showed that the fungus has a relatively wide pH range (5.2–7.7) for growth with an optimal range between 5.4 and 6.5. When the pH of the medium was maintained within the optimal range by periodic adjustments, ammonium nitrogen was utilized as the sole source of nitrogen. Nitrate nitrogen was unavailable to the fungus under all conditions. DL-glutamic acid was superior as a nitrogen source to either the D or the L isomer. Growth rate and final mycelial dry weight in a synthetic medium (SM-2) containing 14 amino acids in proportions found in 1.0% solution of yeast extract approximated those obtained in complex media. Mycelial dry weights in SM-2 were superior to those obtained in the glucose-glutamic acid-thioglycolic acid medium, but this superiority was due to DL-methionine, a sulfur-containing compound of the amino acid mixture. Sulfates were not utilized as sole source of sulfur, whereas cysteine, cystine, and thioglycolic acid supported fair amounts of growth. The optimal sulfur concentrations from thioglycolic acid for growth in SM-1 were between 128 and 192 mg/1. Mycelial yields equalling or exceeding those supported by complex media were obtained with high concentrations of D-glucose and DL-glutamic acid.     

影响紫背天葵试管苗花青甙含量的因素Ⅱ

本文叙述激素、光、培养温度和时间对紫背天葵试管苗花青甙含量的影响。NAA在0.125—1.0毫克/升范围内能增加花青甙含量,以0.125毫克/升效果最好,BA、2ip、ZT降低花青甙含量。光能明显地提高紫背天葵的花青甙含量,在试验范围内,花青甙含量随光照强度的增加而增加;比较了蓝、白、红三种单色光单独及结合照射的作用,对提高花青甙含量表现为蓝光>红光>白光,红、蓝两色光结合一起照射时比它们单独使用的效果更好,对促进生长的作用则是白光>红光>蓝光;单色光对花青甙含量的影响与照射的顺序无明显的关系。培养温度为25℃时,在90天内对紫背天葵的生长及花青甙含量的提高都有利。在试验条件下,培养95天左右的时间是适宜的采收期。     

离体培养下番红花花柱—柱头状物再生的研究

番红花(Crocus sativus L.)幼花被和幼花柱可以诱导花柱-柱头状物的再生,长度为24mm 的花芽上分离的花被具有最高的诱导频率(37.5%);花被外植体附加 K5 mg/L 和NAA 4mg/L 有利于再生花柱-柱头状物,频率达到35.3%;附加6-BAP 7 mg/L 和 NAA9mg/L 则有利于柱头状物的大量形成。     

利用组织培养选择烟草耐盐愈伤组织变异体并分化出再生植株

烟草(品种革新一号)叶片为外植体,直接置入含0.5%NaCl的修改MS培养基中,诱发产生耐盐的愈伤组织。然后采取逐步提高NaCl浓度的措施,分别获得耐0.5%、1.0%、1.5%及2.0%NaCl细胞系。耐盐细胞系在无盐条件下,生长9—11代后仍保持其耐盐性。从各个耐盐细胞系均分别获得再生苗。耐2.0%NaCl的04—9细胞系共得到15株再生植株,叶片狭长、多锯齿、并具有较多的花茎,多数花粉粒畸形,经过人工授粉获得少量种子。04-9变异型再生植株水培于含有1.0—2.0%NaCl的Hogland溶液中生长85天,仍然存活。原始型愈伤组织的细胞呈不规则椭圆形,耐盐细胞系的细胞均近似圆形;耐盐浓度愈高则细胞愈小。耐盐细胞系愈伤组织的叶绿素含量随耐盐浓度增高而增加;渗透势则随耐盐水平提高而降低。耐2.0%NaCl细胞系04—9愈伤组织内脯氨酸含量高40.7倍,其再生植株叶片内的脯氨酸含量亦较原始型增加两倍。耐2.0%NaCl细胞系再生植株的幼年与成年叶片的过氧化物同工酶的酶谱与原始型均有显著差别。以上试验结果均说明耐2.0%NaCl细胞系04—9及其再生植株是一个耐盐变异体。     

人参对非洲紫罗兰快速试管无性繁殖的促进作用

在试验的33个非洲紫罗兰(Saintpaulia ionantha Wendl.)品种中,有31个品种的叶片和叶柄外植体可在 MS+BA 0.1nag/l+NAA 0.1mg/l 琼脂培养基上再生出有少量根的小植株。按常规的试管繁殖法,需将这些小苗转移到无激素的 MS 琼脂培养基上作第二步培养,以便成长为具较多根的大试管苗,再移出栽种入育苗盆。本研究改用 MS+人参粉250mg/l液体培养基在摇床作第二步培养,提出了一个高效快速的非洲紫罗兰新的试管繁殖法,用此方法可在较短时间内得到比插叶繁殖法多470—780倍、比目前试管培养法多200%的大试管苗。本文还报道了器官发生过程的扫描电子显微镜研究结果。     

影响油菜子叶外植体不定芽高频率再生的因素

采用７个甘蓝型和２个白菜型油菜品种研究了影响子叶外植体芽再生的一些因素和不同基因型的子叶外植体的离子体培养反应和芽再生能力。结果表明,苗龄４ｄ的幼苗叶子含２,４－Ｄ０．５－１．２ｍｇ／Ｌ和６－ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ的培养基培养２或６ｄ后再转到分化培养基上培养,芽再生率３４％－４６％。     

影响小麦成熟胚再生频率因素的研究(简报)

以小麦成熟胚为外植体,研究了基本培养基、预处理类型、接种方式、植物激素的浓度和不同组合以及分化培养基中是否添加抗生素对愈伤组织诱导和分化的影响．在此基础上建立了一套高效的小麦成熟胚植株再生系统。经过试验,我们选择在MS培养基上接种经无菌水预处理的纵切成熟胚作为起始的试验条件。在含2mg／L2,4-D的MS培养基上．初级愈伤组织的诱导频率可达80％以上．在继代培养基中添加0．5mg／L6-BA和0．2mg／LNAA可以显著提高胚性愈伤组织的产生。而在再生培养基中加入适当浓度的头孢霉素可以有效提高胚性愈伤组织再生出小植株的比例。利用该再生系统,我们从5个小麦优良主栽品种的成熟胚再生出了可育的植株,再生频率达15．3％-34．5％。