角结膜缘上皮良、恶性病变细胞核DNA原位图像定量分析

应用真彩色医学图像分析技术,对５１例角结膜缘上皮良、恶性病变（其中上皮增生１９例,不典型增生６例,原位癌１４例,鳞状细胞癌１２例）进行了ＤＮＡ原位定量分析研究．结果显示：原位癌和鳞状细胞癌ＤＮＡ含量明显增加,多为高倍异倍体细胞,ＤＮＡ直方圆明显右移,峰值主要位于＞５Ｃ处,≥５Ｃ细胞分别占７８．８９％和７８．３１％;上度增生病变ＤＮＡ含量较低,多为低倍整倍体细胞,ＤＮＡ直方图峰值位于２Ｃ～４Ｃ处,２Ｃ～４Ｃ细胞占８８．５９％;上皮不典型增生病变ＤＮＡ含量介于良性病变和癌之间,ＤＮＡ直方图逐渐右移,２Ｃ～４Ｃ细胞占５８．６２％,≥５Ｃ细胞占４１．３８％。以上数据经统计学处理各组间有显著性差异。表明ＤＮＡ倍性程度与肿瘤的增殖程度呈正相关,高倍异倍体细胞随肿瘤恶性程度的增高而增多。作者认为ＤＮＡ原位图像定量分析可为角结膜缘上皮良、恶性病变的诊断、分级及早期发现癌变趋势提供一个可靠的参考指标。     

流式细胞仪检测高等植物细胞核DNA含量的方法

相对于动物和微生物而言,流式细胞术在植物科学上的应用会因植物组织与细胞(如细胞壁、中央液泡、特殊细胞器等)的特殊结构以及次生代谢产物等特殊成分,造成样品在前期处理、染色及测试等方面的困难,甚至导致检测失败或结果不准确。笔者在长期运用流式细胞仪测试工作中,积累了大量的植物样本检测经验,并参考国内外相关文献,总结出从植物取材、样品制备到植物细胞核DNA流式检测的方法和技巧,可为植物科学研究者及从事流式细胞检测的技术人员提供实验参考。     

梨形四膜虫衰老过程中DNA含量的变化

应用一种新型的细胞核内DNA含量测定方法──图像分析法,测定真核细胞梨形四膜虫衰老过程中DNA含量的变化.根据Beer-Lambert定律,以细胞核在不同生长期内的积分光密度的水平表示核内DNA含量的变化.该方法具有测量速度快,重复性好,操作简单,结果可靠等优点.实验结果表明:四膜虫在进入对数生长期时,DNA含量逐渐达到高峰,随着细胞逐渐老化,细胞分裂次数及核内DNA含量逐步减少.     

黄喉拟水龟细胞核DNA含量的分析

以黄喉拟水龟 (Mauremysmutica)的红血细胞为材料 ,以鸡红血细胞为DNA标准 ( 2 5pg/2c) ,采用流式细胞仪测定了黄喉拟水龟及其两个种群的细胞核基因组DNA含量。黄喉拟水龟的细胞基因组DNA含量为 5 16± 0 2 9pg/2c (n =6 0 ) ;南方种群的细胞核DNA含量为 5 19± 0 30pg/2c (n =30 ) ,北方种群为 5 14±0 30pg/2c (n =30 ) ,两个种群的核DNA含量无显著差异 (t=0 6 84 7,df =5 8,P >0 0 5 )。     

膀胱肿瘤DNA含量、核形态学特点与AgNORs计数的研究

应用图像分析技术对４３例膀胱肿瘤细胞ＤＮＡ含量和核形态参数进行了定量测定,同时进行核仁组成区（ＡｇＮＯＲｓ）计数研究,结果表明：肿瘤细胞的ＤＮＡ含量及干系水平与组织学分级基本一致,ＤＮＡ含量及干系水平越高,则恶性程度越高,ＤＮＡ含量与核面积及核最短直径的变化里正相关性,与ＡｇＮＯＲｓ的计数无明显相关性。这三项检测方法对肿瘤生物学行为判断均有重要的参考价值。     

斑鳢、乌鳢及其杂种细胞核DNA流式含量分析

以斑鳢(Channa maculata)、乌鳢(C.argus)及其正交杂种斑乌鳢(斑鳢♀×乌鳢♂)和反交杂种乌斑鳢(乌鳢♀×斑鳢♂)的红细胞为材料,以鸡(Gallus gallus)血细胞为DNA标准(2.5 pg/2c,2c指2倍体),采用流式细胞仪测定了这4种鱼的细胞核DNA含量。斑鳢、乌鳢、斑乌鳢及乌斑鳢这4种鱼血细胞DNA的绝对含量分别为(1.488±0.035)pg/2c、(1.489±0.034)pg/2c、(1.522±0.077)pg/2c和(1.520±0.033)pg/2c。斑鳢和乌鳢的细胞核DNA含量差异不显著(P0.05),斑鳢和乌鳢与两种杂交鳢的DNA含量差异显著(P0.05),两种杂交鳢之间的细胞核DNA含量差异不显著(P0.05)。杂交鳢细胞核DNA含量显著高于亲本,可以作为杂种鉴定的依据。     

甲状腺球蛋白及抗体测定在结节性甲状腺肿与甲状腺癌鉴别诊断中的意义

目的:对结节性甲状腺肿患者和甲状腺癌患者术前的甲状腺球蛋白(TG)、抗甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)水平进行回顾性分析,并对TG、TG-Ab水平在结节性甲状腺肿、甲状腺癌诊断中的意义进行研究。方法:分别选取2011年1月-2013年12月我院收治的结节性甲状腺肿患者、甲状腺癌患者和正常健康者各60例作为本研究的观察对象,对三组观察对象TG、TG-Ab水平进行比较分析。结果:结节性甲状腺肿组、健康组患者TG阳性率分别为6.67%、8.33%,差异无统计学意义(P0.05);两组患者TG-Ab阳性率则分别为8.33%和11.67%,差异无统计学意义(P0.05)。而甲状腺癌组患者TG、TG-Ab阳性率分别为33.33%、40.00%,与其他两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。在结节性甲状腺肿患者中,其中结节液化型TG阳性率、TG-Ab阳性率明显高于非结节液化型,差异具有统计学意义(P0.05)。在甲状腺癌患者中,其中颈部淋巴结阳性者TG阳性率、TG-Ab阳性率明显高于颈部淋巴结阴性者,差异具有统计学意义(P0.05);单结节癌灶与多结节癌灶在TG阳性率、TG-Ab阳性率差异无统计学意义(P0.05)。结论:临床上采用TG、TG-Ab阳性率测定的方法对甲状腺肿、甲状腺癌进行鉴别和确诊是比较可靠的,值得推广应用。     

阿达玛变换显微图象法测定乳腺癌DNA含量

以吖啶橙为细胞DNA荧光探针,用阿达玛(Hadamard)变换显微图象分析仪和显微荧光光度计分别测定了4例乳腺肿瘤的细胞DNA含量(倍性),并对分析结果进行了比较,二者的分析结果均与病理学诊断结论相吻合.阿达玛变换显微图象分析仪作为一种新的细胞定量分析仪器,其分析结果的准确度可与显微荧光光度计相媲美,而且阿达玛变换显微图象分析仪还具有其独特的优点,如信噪比高、具有同时分析多个细胞和同步扣除背景信号的能力等.     

DNA 甲基化及其对肿瘤的作用

DNA甲基化是一种重要的表遗传修饰,在肿瘤细胞中表现为基因组整体水平的低甲基化和一些特定区域的高甲基化,发生低甲基化的序列主要是一些高度和中度重复序列,而发生高甲基化序列通常是跨越管家基因和肿瘤抑制基因启动子的CpG岛,它们在肿瘤的发生发展中起重要的作用,本文就这些序列的异常甲基化和其对肿瘤作用一些进展和观点作一介绍。     

DNA探针的诊断应用

<正>使用重组DNA技术制备特异的分子(常为DNA)探针已为医学和兽医诊断实验室提高对传染病、遗传紊乱、恶性肿瘤的诊断提供了新的强有力的工具,同时也给完成如组织分型、亲缘关系试验这类工作提供了更灵敏感更特异的方法,该技术对法医学也是很有用的(如表1)。DNA探针作为诊断试剂的应用或使实验室减少周转时间,拓宽所检测、鉴别和/或定量的试样的范围,且由于简化     

四种鱼类外周血红细胞细胞周期及DNA含量

通过流式细胞仪测量了兴国红鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓ ｃａｒｐｉｏ Ｖａｒ． Ｓｉｎｇｕｏｎｅｎｓｉｓ）、奥利亚罗非鱼（Ｓａｒｏｔｈｅｒｏｄｏｎ ａｕｒｅａ）、 鳙（Ａｒｉｓｔｉｃｈｔｈｙｓ ｎｏｂｉｌｉｓ Ｒ．）和团头鲂（Ｍｅｇａｌｏｂｒａｍａ ａｍｂｌｙｃｅｐｈａｌａ Ｙｉｎ．）红细胞的ＤＮＡ含量,四种鱼与鸡红细胞ＤＮＡ含量的比值分别为１·６５、０．９６、０．９１、１·１５,以鸡红细胞ＤＮＡ含量２．３ｐｇ／Ｎ计算,四种鱼二倍体体细胞的 ＤＮＡ含量分别为３．８０ ｐｇ／Ｎ, ２． ２２ｐｇ／Ｎ、２． ０８ｐｇ／Ｎ、 ２． ６６ｐｇ／Ｎ。另外,四种鱼外周血红细胞分别有２６％、 ２６％、 ２３％、 ２４％的细胞处于 ＤＮＡ合成期（Ｓ）,ＤＮＡ合成后期（Ｇ２）和分裂期（Ｍ）,这表明这四种鱼类的外周血红细胞并非失去分裂能力的特化细胞群,它们表现了较强的细胞周期现象。这有可能是这几种硬骨鱼类外周血仍具有造血功能的缘故。     

方正银鲫与扎龙湖鲫体细胞、精子的DNA含量及倍性的比较研究

经淋巴细胞培养方法制备染色体表明黑龙江银鲫[Carassius auratus gibelio(Bloch)]的染色体数为150±条,鲫[c.auratus auratus(Linnaeus)]的染色体数为100条。一些研究者将前者称为三倍体,后者称为二倍体。通过显微分光光度法测量了这两鲫鱼雄性个体的红血球和精子的DNA含量。前者分别为112.81和57.57单位,其比值为1.96∶1,后者分别为77.22和37.57单位其比值为2.06∶1。由此证明银鲫雄性的精子发生与鲫一样能正常完成减数分裂。因此,我们认为黑龙江银鲫不是三倍体而是一个二倍体种群(2n=150±,n=75±),鲫为2n=100,n=50。     

小麦根尖细胞分化过程中DNA,RNA和蛋白质含量变化的研究

小麦(Triticum aestivum L.)种子在25℃条件下萌发3d,根生长至1～2cm长时,于双筒解剖镜下严格切取根分生区、伸长区和成熟区。用专一性荧光染料Hochest33258、Pyronin G和FITC分别染细胞核DNA、RNA和蛋白质,并用自动图像分析技术和细胞荧光测定术分别测定三个区中各125个细胞核DNA的相对含量和各100个细胞中RNA和蛋白质的相对含量。核DNA相对含量随着根尖细胞分化的进程,DNA含量递增,成熟区细胞中含量最高。RNA的相对含量则与之相反,在分生区细胞中含量最高,成熟区细胞中含量最低。蛋白质的相对含量则在伸长区细胞中最高,分生区细胞中最低。讨论了根尖细胞分化过程中DNA、RNA和蛋白质三者之间变化的一些内在联系。     

从甲状腺肥大细胞探讨胎儿器官肥大细胞的差异

研究肥大细胞在人胎儿甲状腺发育中数量、分布及组化性质的改变,以探讨胎儿器官发育中肥大细胞的差异。取45例不同胎龄的人胎甲状腺石蜡切片做甲苯胺蓝染色和阿尔辛蓝－－藏红染色,并测定肥大细胞的临界电解质浓度值及进行硫酸小蘖硷荧光染色。结果显示：3月龄胎儿甲状腺内开始出现肥大细胞,数量极少,主要分布在被膜及小叶间结缔组织内,甲苯胺蓝染色肥大细胞颗粒呈淡紫蓝色,阿尔辛蓝－－藏红染色呈蓝色,临界电解质浓度值较低,硫酸小蘖硷染色未见显黄色荧乐的肥大细胞,从3月龄到足月随着胎龄增长,肥大细胞数量缓慢增多,8月龄时肥大细胞经甲苯胺蓝染色,其颗粒呈紫红色,阿尔辛蓝－－藏红染色出现少量含红色和红蓝混合染色颗粒的肥大细胞,临界电解质浓度值偏高,可见少量显黄色荧光的肥大细胞,结果表明：在人胎儿3月龄时甲状腺发育中开始出现肥大细胞,但随胎儿发育肥大细胞的组化性质改变不明显。     

流式细胞光度术DNA分析在非何杰金氏淋巴瘤预后中的意义

用流式细胞光度术对一组非何杰金氏淋巴瘤(NHL)存档石蜡标本进行DNA分析。DNA异倍体肿瘤占总例数的47.4％,高、中度恶性组异倍体肿瘤的比例(76.8％和51.9％)分别高于低度恶性组(17.6％)(P<0.05)。S期细胞比例(synthetic phase fraction,SPF)随组织学恶性程度升高而增大,低、中和高度恶性淋巴瘤平均SPF值分别是6.5(0.6—18.8)％,13.5(3.2—37.3)％和23.4(4.4—41.4)％。二倍体和异倍体肿瘤患者的生存率无差别。全部病例中高SPF值肿瘤患者具有生存短的趋向(P=0.1)。低度恶性组内也存在此种趋向(P=0.08)。上述结果表明流式细胞光度术DNA分析对估价非何杰金氏淋巴瘤生物学行为是一种不依赖形态学的有用方法。     

细胞凋亡调控因子基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义

目的研究细胞凋亡调控因子Fas、Fasl、Fadd和Caspase 8基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义。方法应用免疫组化S-P法检测食管黏膜中Fas、Fasl、Fadd和Caspase 8的蛋白表达。应用碘化丙啶染色和间接免疫荧光标记方法,采用流式细胞仪对食管黏膜组织进行定量检测。结果从食管正常黏膜组织到不典型增生组织和食管癌组织,Fas、Fadd和Caspase 8蛋白表达率呈逐渐下降的趋势,Fasl蛋白表达率呈逐渐上升的趋势,在食管癌和正常组织之间差异有统计学意义,x^2分别为5．659,7．73,6．32,5．65,P〈0．05或P〈0．01。Fas、Fasl和Caspase 8蛋白高中分化鳞癌中蛋白阳性表达率显著高于低分化鳞癌,两者差异有统计学意义,x^2分别为4．88,7．79,4．68,P〈0．05。与正常黏膜组织和不典型增生组织相比,癌组织中DNA含量明显增高,异倍体细胞显著增加;Fas、Fadd和Caspase 8蛋白表达水平明显降低,t值分别为8．131,7．39,5．44,Fasl基因蛋白表达水平升高,t值为6．671。结论Fas与Fasl的表达失衡与食管癌的发生、发展有密切关系,并与食管癌的分化和免疫逃避有关。Fadd与Caspase8基因表达异常在食管癌的发生发展中可能起着重要作用。食管上皮癌变过程中,DNA含量及异倍体率增加。     

细胞图象分析仪的研制及其对细胞DNA含量测定的初探

本文介绍在微机上开发的细胞图象处理分析系统,该系统图象处理功能强,细胞测量参数多,操作简便,实用性强。可用于生物医学图象的处理和分析。     

球壳孢目真菌DNAGC含量及其分类学意义

利用热变性温度法测得球壳孢目5属14种19个菌株DNAG十Cmol％的变化范围为48．08～53．7,平均值为51.12,与文献报道的丝孢菌类的平均值接近,也与子囊菌的平均值相差不大,提示该类群的种类及其与大多数丝孢菌间在系统演化上似具一定的同源性,与形态分类对半知菌的处理相吻合,也为其有性阶段大多属子囊菌这一事实提供了佐证;各属、种GC值接近,且相互间有交叉,种内菌株间差异小于2％,方差分析显示属间差异不显著,故认为GC含量分析不宜用于球壳孢目属、种级分类单位的划分,但可作为排除性指标辅助某些种类的否定性判定。