国产避孕疫苗研究现状和前景

国产第１代避孕疫苗已经研制成功。疫苗构建是采用妊娠特异性强、妊娠期短暂出现的糖蛋白激素－－人类绒毛膜促性腺激素（ｈｕｍａｎ ｃｈｏｒｉｏｎｉｃ ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｃ ｈｏｒｍｏｎｅ,ｈＣＧ）为靶抗原,应用蛋白质工程技术研制的。抗原不但保留了ｈＣＧ的生物活性,而且不与垂体的其他３种激素交叉,并克服了“自身免疫耐受性”,使免疫系统对它作为“非自身”而产生抗体反应。以此构建的第１代避孕疫苗原型,经临     

去Ｎ端信号肽和Ｃ端跨膜区猪卵透明带—３β蛋白在原核系统表达的研究

猪卵透明带（Zona pellucida,ZP)由生物化学和免疫学性质截然不同的三种糖蛋白（pZP１、pZP3α和pZP3β）组成由于抗pZP3β抗体能在体外与人ＺＰ发生交叉反应,因此pZP3β一直被认为是研制抗受精避孕疫苗的潜在抗原之一,为了能在原核系统中获得无卵巢因子污染的pZP3β蛋白,本文采用ＰＣＲ方法删除了原cDNA中编码５′-和３′－端信号肽和跨膜区的ＤＮＡ顺序。扩增的pZP3β基因核心片段（pZP3β″）经ＤＮＡ测序验证后,通过引入其两端的ＥcoRⅠ和SalⅠ酶切位点被定向插入pＢＶ２２１质粒ＰＲＰＬ启动子下游的多克隆区。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明：工程菌在热诱导后能特异地表达pZP3β蛋白,并能在蛋白印迹实验中被兔抗pZP IgGs识别。     

研制透明带肽避孕疫苗的新策略

研制透明带肽避孕疫苗的新策略谢毅,徐万祥（复旦大学遗传工程国家重点实验室,上海２００４３３）（上海市计划生育科学研究所,上海２０００３０）关键词透明带,抗原表位,嵌合肽疫苗研制阻断精卵识别、结合或穿透等较早生殖环节的抗生育疫苗,一直是免疫避孕研究中孜...     

米非司酮在计划生育领域中的应用

米非司酮（简称Ｒｕ４８６）,于１９８０年由法国ＫｏｕｓｅｌＵｃｌａｆ公司合成,经过十几年的大量实验室研究、动物实验及临床应用,对于米非司酮的抗孕酮作用的疗效及安全性得到肯定,在临床上用作终止早孕、紧急事后避孕疗效肯定。目前正在探索米非司酮在终止中、晚...     

抗人绒毛膜促性腺激素避孕疫苗的研制

<正>一、研制避孕疫苗的童义: 计划生育是我国的一项基本国策,它关系到我国各族人民的健康和繁荣。我国现有11亿多人口,占世界人口的1/4,而国土面积只占全世界的1/7,人口增长速度过快已经制约了国民经济的发展。为了依法推行计划生育,控制人口数量,提高人口素质,使人口增长与国民经济发展相适应,必须研究有效的避孕方法。     

小剂量米非司酮和左炔诺孕酮用于紧急避孕的临床研究

目的：以左炔诺孕酮为参比制剂,探讨10mg米非司酮用于紧急避孕的临床效果。副反应及可接受性。方法：采用随机对照性的试验方法,征集100例单次无保护性交72小时内来院就诊的要求紧急避孕的妇女,随机分配到观察组（n=50）和对照组（n=50）,观察组单次口服10mg米非司酮,对照组口服左炔诺孕酮0．75mg,12小时后再服左炔诺孕酮0．75mg,服药后嘱两组对象按时随访直至月经复潮。并观察其避孕效果,副反应,对月经的影响及药物的可接受性。结果：采用Dixon方法计算。两组对象各有1例妊娠,观察组避孕效果达81．19％,对照组为81．06％,统计学上无明显差并,两组副反应轻,无任何不良反应发生。结论：小剂量米非司酮用于紧急避孕与左炔诺孕酮是同样有效的。     

免疫不育疫苗的研究进展

免疫不育疫苗主要以哺乳动物的精子或卵子蛋白以及在受精和胚胎早期发育过程中发挥重要作用的激素为靶抗原。以激素为抗原的不育疫苗产生的不育效果多为不可逆的,且对机体损伤较大。以精子表面抗原制备的疫苗能够诱导产生精子抗体和不育效果,目前已成为避孕研究的一个热点。哺乳动物卵透明带（zona pellucida,ZP）是覆盖于卵母细胞及着床前受精卵外的一层基质,其在调节精卵特异性结合、诱导获能精子发生顶体反应和阻止多精受精等方面发挥着重要作用。ZP相对分子质量较小且免疫原性强,是免疫不育疫苗理想的靶抗原,抗ZP抗体可阻断精卵结合,故可被用作人类避孕和免疫不育控制有害动物种群数量的靶抗原,但人用ZP疫苗免疫机体后造成的卵巢功能损伤和免疫抑制等问题尚有待明确。     

抗小鼠精子特有乳酸脱氢酶C4的与分泌片装配或未装配的单克隆抗体IgA的生物学功能

为了测定抗精子ＩｇＡ在免疫不育和抗精子避孕疫苗研制方面的生物学作用,用肠道内免疫的方法制备了一组抗乳酸脱氢酶Ｃ４（ＬＤＨ－Ｃ４）的单克隆ＩｇＡ抗体（ｍｏＩｇＡ）。以免疫印迹证实了它们的异质同形体。大部分ｍｏＩｇＡ（ＰＡ１－ＰＡ５）是用肠道内免疫和以派依尔氏淋巴细胞作为亲本细胞进行融合来获得的。在豚鼠血清补体存在的情况下,小鼠精子可以被ｍｏＩｇＡＰＡ１、ＰＡ２和ＰＡ４所制动。高浓度ＰＡ４和ＰＡ５可凝集小鼠精子。小鼠体外受精率可被３个ｍｏＩｇＡ（ＰＡ２、ＰＡ３和ＰＡ４）显著降低,但用ＰＡ１、ＰＡ２和ＰＡ５被动免疫之后,小鼠体内受精无明显变化。纯化的小鼠胆汁分泌片可同纯化的ｍｏＩｇＡ或腹水中的ｍｏＩｇＡ在体外组装起来。同分泌片结合之后,ｍｏＩｇＡ对精子的制动、凝集和体外受精无明显变化。这些研究结果提供了抗ＬＤＨ－Ｃ４的ｍｏＩｇＡ和分泌性ＩｇＡ对精子功能和体外受精的生物学作用的直接证据,在免疫不育的防治,避孕疫苗的研制以及性传播疾病的防治方面均有一定的指导意义。     

rHB-DTaP联合疫苗中抗-HBs抗体应答

在乙肝、白喉、破伤风、无细胞百日咳（ｒＨＢ－ＤＴａＰ）四联疫苗的研制过程中,我们采用基因工程乙肝疫苗（ＣＨＯ）,精制白喉、破伤风类毒素和无细胞百日咳菌苗原液,按不同的稀释液,不同的加入顺序以及不同的含量等制备四联疫苗,并以单价基因工程乙肝疫苗（ｒＨＢ）做对照,进行小鼠试验,接种４周后采血检测抗－ＨＢｓ水平。结果表明,不同配方的四联疫苗中ｒＨＢ与ＤＴａＰ均无干扰,相容性好;抗－ＨＢｓ免疫应答水平与单价苗（ｒＨＢ）无显著性差异（Ｐ＞０．０５）,使用生理盐水制备的ｒＨＢ－ＤＴａＰ其抗－ＨＢｓ免疫应答水平较醋酸盐缓冲液者高（Ｐ＜０．０５）,ｒＨＢ－ＤＴａＰ中的抗－ＨＢｓ免疫应答水平与ｒＨＢ原液的加入顺序无关（Ｐ＞０．０５）;ｒＨＢ含量以２０μｇ／ｍｌ为宜。     

支持细胞紧密连接与男性避孕

支持细胞的紧密连接是血睾屏障的主要组成成分,对支持细胞紧密连接结构与功能的深入研究有助于探讨男性避孕的新的研究方法。对紧密连接动力学的影响因素以及其与精子发生和男性避孕间的关系进行了分析。为进一步探讨男性避孕的研究方法提供新思路。     

早期妊娠妇女人工流产的因素调查

目的：了解早期妊娠行人工流产妇女的人群特征,探讨导致妇女人工流产的相关因素,为减少非意愿妊娠提供干预依据。方法：采用整群抽样方法,对丰台区四家二级医院计划生育门诊同期行人工流产的妇女进行问卷调查。结果：共回收调查问卷4381份。调查对象中,平均年龄26岁（16．54岁）,本市户籍占26．8％,外地户籍73．2％;已婚65．33％,未婚34．67％;文化程度初、高中占62．5％;职业列前三位的分别是服务员23．5％、公司职员18．2％、个体工商户10．5％;重复流产为37-3％。非意愿妊娠占83．24％,,非意愿妊娠的原因,39．53％是未避孕,43．71％为避孕失败,而避孕失败的原因中又以避孕套避孕失败居首;意愿妊娠占Ⅲ6．7鹞％,最终选择终止妊娠的原因分别为个人工作因素、情感因素及优生考虑。结论i为降低l妇女非意愿妊娠及重复流产率,对育龄妇女,尤其是流动、未婚人群,需广泛开展性健康教育及避孕方式知情选择,加强避孕知识以及人工流产危害的宣教,指导避孕方法的正确使用,同时,各级医院亟待开展流产后服务。     

应用流行性出血热病毒抗NP和G1、G2单抗检测感染细胞和疫苗内的不同抗原成分

应用出血热病毒的抗核蛋白（ＮＰ）和糖蛋白（Ｇ１、Ｇ２）单克隆抗体的ＥＬＩＳＡ夹心法对感染细胞培养物和灭活疫苗内的ＮＰ和Ｇ１、Ｇ２抗原成分进行检测,结果表明感染Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞内ＮＰ和Ｇ１、Ｇ２含量均高于细胞外培养液上清,前者的抗原滴度分别为≥５１２和２５６,后者仅为６４和１６。比较三种不同疫苗内的抗原成分,显示乳鼠脑纯化疫苗内的ＮＰ抗原最高,滴度达３２０－≥６４０,而二种细胞疫苗（沙鼠肾和地鼠肾细胞）则较低,一般在２０－８０,相反二种细胞疫苗的糖蛋白滴度则高于脑疫苗（８－３２对２－８）该方法可用于疫苗生产过程中检测ＮＰ和Ｇ抗原成分。     

卵透明带ZP3的研究及其应用

卵透明带蛋白围绕在卵母细胞外,在受精过程中起着重要作用。ZP3蛋白是卵透明带蛋白家族中的重要成员,在功能上,ZP3作为初级精子受体,起始精卵结合和顶体反应。由于ZP3在受精中的重要作用,它成为免疫避孕的有效靶点。ZP3蛋白疫苗和DNA疫苗可以诱导机体产生较强的免疫反应,导致生育降低,同时带来一定程度的副作用。本文重点介绍了ZP3的免疫特性及其应用。     

登革疫苗研究进展

登革病毒是一种危害较严重的病原体,在世界范围内的流行颇为频繁,然而目前仍设有安全有效的疫苗。近年来,人们对传统疫苗（灭活疫苗、减毒疫苗和亚单位疫苗）及新型疫苗（cDNA疫苗、嵌合体疫苗和DNA疫苗）的研究已取得了一定的成果。本文就这方面的进展作一综述。     

抗小鼠精子特有乳酸脱氢酶C4的与分泌片装配或未装单克隆抗体IgA的…

为了测定抗精子ＩｇＡ在免疫不育和抗精子避孕疫苗研制方面的生物学作用,用肠道内免疫的方法制备了一组抗乳酸脱氢酶Ｃ４（ＬＤＨ－Ｃ４０的单克隆ＩｇＡ抗体（ｍｏＩｇＡ）。以免疫印迹证实了它们的异质同形体。大部分ｍｏＩｇＡ（ＰＡ１－ＰＡ５）是用肠道内免疫和以派依尔氏淋巴细胞作为亲本细胞进行融合来获得的。在豚鼠血清补体存在的情况下,小鼠精子可以被ｍｏＩｇＡＰＡ１,ＰＡ２和ＰＡ４所制。高浓度ＰＡ４和ＰＡ５可凝集     

疑似百日咳病人血清中特异性抗体的研究

对北京地区９份疑似百日咳病人血清进行特异性抗体（抗－ＰＴ和抗－ＦＨＡ抗体）的检测中,有７份血清中抗－ＰＴ和抗－ＦＨＡ抗体两者或单个高于百日咳病患者恢复期２０－３０Ｅｕ／ｍｌ的抗体阳性指标。结果表明,在未免疫或免疫不完全以及学龄前儿童和免疫过的青少年人群中仍有百日咳疾病的感染。建议考虑对学龄前儿童或中小学生进行百、白联合疫苗或无细菌百日咳疫苗的加强接种。     

精子特异性乳酸脱氢酶DNA疫苗的构建及免疫避孕效果的实验研究

精子特异性乳酸脱氢酶是精子能量代谢的一个关键酶,具有很强的组织特异性和免疫原性．在本研究中,将人和小鼠（Mus musculus）的精子特异性乳酸脱氢酶编码序列分别与真核表达载体pVAX1连接,构建了两个DNA疫苗：pVAX1-hLDHC和pVAX1-mLDHC．将这两个DNA疫苗通过黏膜表面滴注的方式分别免疫雌雄两性BALB／c小鼠,在实验小鼠的血清和雌性实验小鼠的阴道分泌液中均检测到特异性抗体的存在,滴度随免疫次数的增加而升高．交配实验中,实验组出生子代的数量明显减少,有的小鼠甚至未生育,与未免疫组和pVAX1空质粒免疫组在统计学上有显著性差异．精子凝集实验表明,实验小鼠血清和雌性实验小鼠阴道分泌液均可引起正常雄性小鼠的精子悬液发生凝集反应．免疫组化结果显示：实验小鼠血清和雌性实验小鼠阴道分泌液中的抗体与位于正常精子胞质、顶体外膜及顶体囊中的乳酸脱氢酶抗原发生特异性结合．本研究初步显示了人用避孕DNA疫苗免疫效果,为以后可能进行的临床实验奠定了基础．     

诺如病毒疫苗研究概况

诺如病毒（norovirus,NoV）是引发急性胃肠炎疾病的主要病原体之一。NoV易发生突变产生多种毒株,对人类健康造成严重威胁。由于缺乏成功的动物模型,抗NoV药物和疫苗的后续评价受到了限制,目前尚没有上市的疫苗用于NoV的预防。对NoV疫苗的研究进展进行了综述,重点阐述了病毒样颗粒（virus like particles,VLP）疫苗、病毒载体疫苗和基于P颗粒疫苗的研究现状和发展前景,以期为NoV疫苗的研发提供新思路。     

糖类抗原的抗独特型抗体疫苗

糖类抗原以其免疫性较弱,常规疫苗的免疫效果一般欠佳,特别是对新生儿的免疫更是如此。糖类抗原又以其本身结构上的复杂人工合成较为困难,也不能通过重组DNA技术由基因工程直接制得。为此,不少免疫学家都在探寻有效的抗糖疫苗。本文作者长期从事糖类抗原的抗位特型抗体研究,认为目前的研究为寻求一条糖类抗原的抗独特型抗体疫苗奠定了基础;列举了细菌的果聚糖,大肠杆菌K13多糖,克氏锥虫的表面糖蛋白, A组链球菌糖,脑膜炎奈瑟氏菌C组多糖,以及肿瘤相关抗原上的糖表位等的研究材料。本文为1991年出版的抗独特型抗体疫苗一书中的一章。     

猪卵透明带ZP3α真核表达载体的构建及体外瞬时表达

目的：构建猪卵透明带zP3α真核表达栽体,为探讨卵透明带DNA疫苗避孕疫苗奠定基础。方法：采用PCR法获得了去除N端信号肽序列和C端跨膜区序列的猪卵透明带ZP3α的cDNA序列片段,以专门用于发展DNA疫苗的质粒pVAX1为载体构建了真核细胞表达质粒pvAX1-pZP3α。通过脂质体转染将之导入HeLa细胞进行体外瞬时表达,然后采用RT—PGR和间接免疫荧光技术(IIF)检测pZP3α在mRNA水平的转录和蛋白质水平上的表达。结果：真核细胞表达质粒pVAX1-pZP3α构建成功,用RT-PCR和IIF技术检测到了pZP3α在HeLa胞中的转录与表达。结论：真核表达载体pVAX1—pzP3aα的成功构建和表达为研制开发有效的人用卵透明带DNA避孕疫苗奠定了基础。