芸薹链格孢致病毒素分析Ⅰ.：腐败菌素B的分离提纯和结构鉴定

芸薹链格孢（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｂｒａｓｓｉｃａｅ）在ＰＤ液体培养其中黑暗培养２０ｄ,过滤获得培养滤液,经乙酸乙酯萃取,４５℃减压浓缩得ＡＢ－粗毒素。ＡＢ－粗毒素经ＨＰＬＣ分析,在λ＝ｎｍ波长下具有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ４个明显的吸收峰。组分Ⅲ的红外吸收光谱、ＦＡＢ／ＭＡＳＳ和＾１Ｈ－ＮＭＲ与已报道的腐败菌素Ｂ基本一致,由此确定组分Ⅲ为腐败菌素Ｂ。试验发现,芸薹链格孢的培养滤液,ＡＢ－粗毒素和毒素组分Ⅲ     

链格孢菌粗毒素对菊花‘神马’幼苗生长及生理代谢的影响

由链格孢菌引起的菊花黑斑病严重降低了菊花的品质和产量.链格孢菌在代谢过程中分泌的粗毒素是菊花黑斑病发生的主要致病因子之一.本文从菊花黑斑病发病叶片中分离筛选出致病真菌链格孢菌1株,研究其粗毒素对菊花幼苗‘神马’生长的影响以及测定盆栽幼苗叶片细胞膜相对透性、抗性物质含量、诱导酶活性及代谢物质含量变化.结果表明:链格孢菌粗毒素对菊花‘神马’幼苗的株高、茎粗、根长均有抑制作用,毒素浓度与抑制效果呈正相关,且粗毒素原液处理14 d后,菊花幼苗株高、茎粗、根长受到显著抑制,分别比对照减少了28.9%、21.4%和23.3%;链格孢菌粗毒素处理菊花‘神马’幼苗后,根系组织细胞膜透性随着毒素浓度的增加而增加,在同一毒素浓度处理下,菊花幼苗叶片细胞膜透性随着处理时间的增加呈先增大后降低的趋势;毒素原液处理菊花幼苗后,菊花幼苗叶片中抗性物质可溶性蛋白、丙二醛(MDA)以及脯氨酸含量均显著提高.链格孢菌10倍稀释液处理对叶片苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性的提高最为显著.链格孢菌粗毒素对切花菊‘神马’幼苗的致病作用主要通过抑制菊花幼苗根、茎的正常生长,增加菊花幼苗叶片细胞膜透性,影响切花菊幼苗叶片中抗性物质代谢以及提高叶片保护酶活性而影响植株正常生理代谢.     

链格孢菌粗毒素对菊花‘神马’幼苗生长及生理代谢的影响

由链格孢菌引起的菊花黑斑病严重降低了菊花的品质和产量.链格孢菌在代谢过程中分泌的粗毒素是菊花黑斑病发生的主要致病因子之一.本文从菊花黑斑病发病叶片中分离筛选出致病真菌链格孢菌1株,研究其粗毒素对菊花幼苗‘神马’生长的影响以及测定盆栽幼苗叶片细胞膜相对透性、抗性物质含量、诱导酶活性及代谢物质含量变化.结果表明: 链格孢菌粗毒素对菊花‘神马’幼苗的株高、茎粗、根长均有抑制作用,毒素浓度与抑制效果呈正相关,且粗毒素原液处理14 d后,菊花幼苗株高、茎粗、根长受到显著抑制,分别比对照减少了28.9%、21.4%和23.3%;链格孢菌粗毒素处理菊花‘神马’幼苗后,根系组织细胞膜透性随着毒素浓度的增加而增加,在同一毒素浓度处理下,菊花幼苗叶片细胞膜透性随着处理时间的增加呈先增大后降低的趋势;毒素原液处理菊花幼苗后,菊花幼苗叶片中抗性物质可溶性蛋白、丙二醛(MDA)以及脯氨酸含量均显著提高.链格孢菌10倍稀释液处理对叶片苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性的提高最为显著.链格孢菌粗毒素对切花菊‘神马’幼苗的致病作用主要通过抑制菊花幼苗根、茎的正常生长,增加菊花幼苗叶片细胞膜透性,影响切花菊幼苗叶片中抗性物质代谢以及提高叶片保护酶活性而影响植株正常生理代谢.     

芸薹生链格孢产孢缺陷突变体的鉴定与表型分析

芸薹生链格孢侵染导致的黑斑病是十字花科蔬菜的重要病害,常造成严重的经济损失。其分生孢子对于病害的侵染循环起着重要作用,但目前对于芸薹生链格孢的产孢机制及产孢相关基因的研究较少。本研究从构建的芸薹生链格孢转化子库中筛选得到了9株产孢缺陷突变体,发现其在菌丝生长形态和孢子产量等方面明显异于野生菌。利用TAIL-PCR技术确定突变体M37的插入位点侧翼序列,研究表明,插入位点为芸薹生链格孢一个G蛋白α亚基基因(Ab G1)编码区。该研究将有助于芸薹生链格孢产孢基因和产孢机制的相关研究。     

中国月季上两株链格孢属真菌的分离鉴定及TeA毒素的测定

细交链格孢菌酮酸(Te A)是链格孢菌毒素中最为重要的一种,其在适合的浓度对月季没有伤害而对月季长管蚜有趋避作用。从中国月季上分离纯化得到的两株链格孢属真菌,编号为0363和0645,经过培养性状对比、ITS和18S基因序列分析及显微形态观察,鉴定0363为链格孢(Alternaria alternate.Keissler),0645为细极链格孢(Alternaria tenuissima)。用有机溶剂对两株菌株的毒素进行提取,得到的毒素粗提物利用HPLC分析测定,结果表明,两株菌的毒素粗提物中均含有细交链格孢菌酮酸(Te A)。以上研究结果为中国月季病虫害的防治及寄主植物介导的间接病虫互作机理研究提供实验材料和理论依据。     

芸薹生链格孢致病缺陷突变体的筛选及初步分析

芸薹生链格孢(Alternaria brassicicola (Schwein.) Wiltshire)引起的黑斑病是十字花科蔬菜生产上的重要病害之一,在全球主产区都有报道。目前关于该病菌的致病机理的研究还较少。因此,查找和鉴定芸薹生链格孢致病相关基因,不仅有助于认识该类病原真菌致病的分子机制,还有助于发现病害防治新靶标。本研究从本实验室已构建的芸薹生链格孢转化子库中筛选得到了7株致病性缺陷的突变菌株。进一步利用Hi TAIL-PCR技术对插入位点的侧翼序列进行了扩增,并通过生物学分析方法进行了初步分析。相关研究结果将有助于对芸薹生链格孢致病机理的认识,为发现病害防治新靶标提供理论基础。     

链格孢霉醇和链格孢霉醇单甲醚产生菌株的筛选

本文对分离自小麦、马铃薯、番茄和茄子上链格孢霉属(Alternaria)2个种(链格孢和茄链格孢)的96个菌株,用枯草杆菌生长抑制试验筛选链格孢霉醇(AOH)和链格孢霉醇单甲醚(AME)的产生菌株,有48株产生毒性作用(占所测菌株的50％)。18株产强、中毒性菌用高效液相色谱分析,有13株产AOH和AME(占所测菌株的72.2％)。链格孢的产毒素菌株率比茄链格孢低。但产毒素含量却是前者明显高于后者。其中产AOH和AME的最高含量,链格孢菌株XA-8分别为280和5140mg/kg,而茄链格孢菌株SA-10分别为95.9和94.3mg/kg。     

大丽轮枝菌毒素的分离、提纯及生物测定

试验用Czapek's培养液培养大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb.)不同致病力类型的5个菌株的培养滤液,经浓缩、离心和透析制成的粗毒素,再经DEAE-纤维素柱层析得到初提毒素,最后通过琼脂糖凝胶过滤层析获得纯毒素样品。生物活性测定表明初提毒素的最低生物活性浓度为5.0—5.5μg/ml。纯毒素的最低生物活性浓度为4.0—4.5μg/ml。配制相同浓度的不同致病力类型菌株的毒素液,它们的培养滤液、粗毒素或纯毒素对棉苗的致萎能力相同。     

水稻尾孢霉毒素

水稻尾孢霉(Cercospora oryzae)是水稻条叶枯病的致病菌。24个菌株用抑制稻种胚根生长生物测定法进行产毒筛选。大部分菌株培养滤液对胚根生长有抑制作用。6个菌株:I-16,I-26,I-28,I-38,I-42和I-49选为进一步试验的菌株。添加10％稻叶汁马铃薯蔗糖培养液适于菌株的生长和产毒。生长适宜的温度和pH范围分别是25°-30℃和pH 6—7,光线和通气可促进菌株生长,但温度、光线和通气对培养滤液的毒性无影响,pH6—7的培养滤液毒性最强。接种后3周的培养滤液表现强毒性。多数菌株生长高峰出现在第4周。对水稻尾孢霉毒素进行了初步鉴定。结果表明菌株都能产生红色色素和黄色物质,红色色素经薄层色谱,可见光谱分析和颜色反应证明与尾孢霉毒素相同。培养滤液和尾孢霉毒素提取物能抑制稻种和4种作物种子胚根生长,并能在损伤稻叶上引起褪绿和枯死。这一作用与稻秧的品种抗性和秧龄无关。     

辣椒炭疽病菌毒素

辣椒炭疽病菌(辣椒刺盘孢Colletotrichum capsici)在25—28℃的Czapek-Dox培养液中振荡培养时分泌出毒素,这种毒素能引起辣椒叶片形成坏死斑,类似于病原菌侵染形成的症状。辣椒叶煎汁培养液和Czapek-Dox培养液适于C.capsici的生长和产毒,生长适宜温度和范围分别为25℃和pH6—7,在25—28℃,pH6—7的条件下培养滤液毒性最强;光线和通气条件可促进C.capsici的生长和产毒;培养14天的培养滤液毒性最强。培养滤液经丙酮沉淀及离子交换树脂柱和Sephadex G-50柱层析将毒素纯化。实验结果表明该毒素为多聚糖类物质。生物检测结果表明:培养滤液和C.capsici毒素溶液能抑制辣椒、绿豆、豌豆、豇豆种子胚根生长;并能使辣椒幼苗发生萎蔫,这一作用与辣椒品种抗性有关。     

芸苔链格孢菌丝生长温度的研究

通过对芸苔链格孢[Alternaria brassicae(Berk.)Sacc.]17个单孢系菌丝在PDA培养基上生长温度的研究,结果表明各菌系在相同的温度下,菌丝生长的速度存在着明显的差异。经新复极差分析,其速度可分为三个等级。其间最高与最低可相差4.7倍。对该菌菌丝最适生长温度的研究表明,17个菌系的平均最适温度为25℃。但各菌株间有着明显的差异。作者根据其最适温度的高低及其对温度的敏感性,将这17个单孢系划分为6个温度型。即:不敏感低温型、敏感亚低温型、不敏感亚低温型、敏感中温型、不敏感中温型及不敏感亚高温型等。病菌温度型的划分可作为使用该类病菌进行抗病筛选时确定最适温度的参考。     

黑曲霉A3木聚糖酶酶学性质研究*

黑曲霉A3（AspergillusnigerA3）的固体培养物浸出液,经过多步分离纯化后,获得三个组份的木聚糖酶,称为xⅠ、xⅡ和xⅢ。经7％凝胶浓度的盘状电泳分析均为单一组份。经等电聚焦电泳测xⅠ、xⅡ和xⅢ的等电点分别为6.8、5．5和6.1。SDS－PAGE测得亚基分子量（Da）分别为xⅠ,42000;xⅡ,20000;xⅢ,3000。三个酶组份的最适反应温度分别为xⅠ,40℃i;xⅡ,50℃;xⅢ,50℃。最适反应pHxⅠ,3．5;xⅢ,4．5;xⅢ,5．0。保温一个小时后,酶的半失活温度分别为xⅠ,55.6℃;xⅡ,54.8℃;xⅢ,46.6℃。金属离子Ag+、Hg2+、Ni2+和脲对不同的酶组份具有一定的影响。     

Characterization of a New Chlorophyll-Protein Complex and Studies on Some Properties of Other Chlorophyll-Containing Bands

1. The chlorophyll-protein complexes of sun plant spinach and shade plants Malaxis monophyllos (L.) Sw. and Chlorophytum comosum (Thunb.) Jacques were resolved by SDS-PAGE at lower temperature (2—4 ℃). Besides 8 chlorophyll-containing bands Ⅰa, Ⅰb, Ⅰc, Ⅱa, Ⅱb, Ⅱc, Ⅲ and Ⅳ mentioned in our previous paper (Chu et al., 1980), three more small chlorophyll-containing bands were also observed. Among these small bands Ⅱa which often appeared between Ⅰc and Ⅱa looked like a oligomer of LHCP complex according to its properties in colour, absorption spectrum and fluorescence emission etc. 2. When electrophoresis was carried out at lower temperature (2—4 ℃), the quantity of free pigments (Ⅲ) was obviously lower, while the relative quantities of LHCP Ⅱa, Ⅱb and PS Ⅱ’s band (Ⅳ) were apparently higher than those carried out at higher temperature (12—15 ℃). At lower temperature three bands of Ⅰ could be resolved in shade plants M. monophyllos and C. comosum, and at higher temperature there was only one band of Ⅰ (Ⅰc). But at higher temperature three bands of Ⅰ could be resolved in sunflower. 3. The percentage of LHCP complexes of shade plant M. monophyllos in total amount of chlorophyll (57%) was obviously higher than that of sun plant spinach (43%). The percentage of complexes Ⅰ of sun plant spinach in amount of total chlorophyll (27%) was obviously higher than that of shade plant M. monophyllos (14%). The relative quantity among three bands of Ⅰ in different Plants is different. 4. The chl a/b ratio of LHCP bands of shade plants were lower than that of corresponding bands of sun plants. The chl a/b ratio of Ⅱa of M. monophyllos was 1.1, Ⅱc, 1.2; but that of Ⅱa of spinach was 1.4, Ⅱc, 1.66.     

三角帆蚌内脏团不同插核部位对机体生理代谢的影响

研究旨在探明内脏团不同插核部位对三角帆蚌机体生理代谢的影响。试验选取2龄三角帆蚌180只,随机分成5个实验组和1个对照组,实验组按内脏团5个部位（Ⅰ. 斧足内脏团前端;Ⅱ. 斧足内脏团中部;Ⅲ. 近生殖腺部;Ⅳ. 近胃部;Ⅴ. 近肾部）进行插核,并分别在插核后第5、10、20、50天（thd）采集蚌体淋巴血样,检测机体的尿酸及肝、肾生理指标的变化,以及插核对珍珠质沉积相关的钙含量和碱性磷酸酶活力的影响。结果表明:（1）与对照组相比,插核手术处理的蚌体与对照组机体生理指标有显著差异（P0.05）。（2） 5个插核组试验蚌术后520thd尿酸含量显著高于50thd时（P0.05）,且Ⅴ组尿酸含量在1050thd显著高于其余各组。（3）各插核组尿素氮、肌酐含量5thd时均显著高于50thd （P0.05）,其中Ⅰ、Ⅲ组2050thd无显著变化,Ⅴ组的尿素氮含量除5thd外,其余各个时期均显著高于其他各组（P0.05）。（4）Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组谷丙和谷草转氨酶活性在20thd前均显著低于50thd时（P0.05）,Ⅳ 组谷丙和谷草转氨酶活力除了10thd外,均显著高于其余插核组,Ⅴ组的谷丙和谷草转氨酶活力,在20thd之后均仅次于Ⅳ组,并显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。（5）Ⅰ组插核后10thd血液钙含量显著低于5thd时,1050thd间无显著变化;Ⅱ、Ⅲ组血液钙含量变化呈先增大后降低的趋势,在20thd达到峰值;Ⅳ组血液钙含量随着试验期的延长显著降低,Ⅴ组血液钙含量10、50thd时显著高于其余4组。Ⅱ、Ⅲ组碱性磷酸酶活力无显著变化,Ⅰ、Ⅳ组显著降低（P0.05）,而Ⅴ组在520thd显著升高,2050thd显著降低,20thd时出现峰值。研究结果显示,三角帆蚌内脏团插核后20d内机体各生理指标显著变化,之后趋于稳定,表明其术后20d可能是机体损伤的修复和功能恢复以及钙性磷酸酶含量逐步稳定的关键时期。       

毕氏海蓬子类囊体膜与卵磷脂重组脂质体的耐热性研究

采用卵磷脂(PC)构建脂质体,然后将毕氏海蓬子类囊体膜蛋白复合物重组到脂质体中.分析不同温度(25℃、35℃、45℃和55℃)处理后蛋白脂质体的电子传递活性、吸收光谱和荧光光谱的变化,以探讨膜脂与膜蛋白在高温胁迫下的交互作用.结果显示:蛋白脂质体光系统Ⅱ(PSⅡ)的放氧活性和光系统Ⅰ(PSⅠ)的耗氧活性随着PC比例的提高而增加,在PC与类囊体膜比例为4∶1(Lipid∶Chl,w/w)时达到最高,同时蛋白脂质体的吸收光谱和荧光光谱也呈上升趋势;在PC与类囊体膜重组比例为4∶1条件下,高温处理后的蛋白脂质体的PSⅡ放氧活性和PSⅠ耗氧活性显著大于未经重组的,其吸收光谱和荧光光谱峰值下降幅度低于未经重组的,且峰位基本没有变化.研究表明,PC可能通过增加结合天线的大小来促进蛋白脂质体对光能的吸收和能量从外周天线到PSⅡ和PSⅠ核心复合物的传递;在脂质体中,PC与类囊体膜的交互作用提高了PSⅡ和PSⅠ在高温胁迫下的光化学效率,增强了PSⅡ和PSⅠ的耐热性.     

变温对甘蓝夜蛾生长发育和繁殖的影响

【目的】明确自然变温环境对甘蓝夜蛾Mamestra brassicae生长发育和繁殖的影响,深入研究其对环境温度的适应性。【方法】在13~25℃(日平均19℃), 16~28℃(日平均22℃), 19~31℃(日平均25℃), 22~34℃(日平均28℃)和25~37℃(日平均31℃) 5个梯度变温条件下,以大豆Glycine max植株叶片为寄主材料饲养甘蓝夜蛾卵,测定其各虫态发育历期、发育速率、成虫繁殖力及发育起点温度和有效积温。【结果】变温范围为13~25℃时甘蓝夜蛾发育历期最长,世代发育历期为65.93 d,显著长于其他变温处理。且随温度升高,其发育历期缩短,变温范围为22~34℃时,该虫发育历期最短,世代发育历期为38.46 d,显著短于其他变温处理。在变温范围为25~37℃时,该虫不能正常完成个体发育。在日平均温度(T)19~28℃范围内(最大温差12℃),甘蓝夜蛾卵、幼虫及蛹期的发育速率随温度升高而加快,且各个虫态发育速率(V)拟合方程均符合线性方程模型：V_卵期=0.125+0.048T, V_幼虫期=0.023+0.012T, V_蛹期0.027+0.013T, V_成虫=0.073+0.47T。甘蓝夜蛾雌雄成虫的寿命随着日平均温度的升高而逐渐缩短,雌雄成虫寿命在日变温范围13~25℃时最长,分别为7.91 d和8.00 d;在变温范围22~34℃时最短,分别为3.00 d和3.57 d。甘蓝夜蛾卵、幼虫、蛹、成虫发育起点温度分别为7.98, 6.54, 9.36和10.78℃,有效积温依次为87.00, 607.36, 351.51和108.52 d·℃。16~28℃的变温范围更适合甘蓝夜蛾种群的生存与繁殖,其种群趋势指数I为117.81。【结论】甘蓝夜蛾属于偏低温适应性害虫,对高温环境适应能力较低。研究结果为进一步研究甘蓝夜蛾自然种群发生规律及其发生期、发生量预测预报提供了科学依据。     

不同温湿度下球孢白僵菌对小猿叶甲的致病力

本文在室内研究了分离自小猿叶甲的一株球孢白僵菌(SCAU-BB01D)在不同温度和湿度条件下对小猿叶甲成虫和2龄幼虫的致病力。结果显示温度和相对湿度对白僵菌的致病力有显著影响。在17℃和29℃,小猿叶甲成虫和2龄幼虫的死亡率显著低于其他温度; 在23℃下,成虫接菌后第14天的累计死亡率达到最高为95.60%; 在23℃和26℃下,2龄幼虫接菌后第10天达到最高累计死亡率96%。随着相对湿度的提高,球孢白僵菌对小猿叶甲的致病力显著增加,当相对湿度从50%增加至100%时, 成虫第14天的累计死亡率从55.70%增加到88.80%,2龄幼虫第10天的累计死亡率从62.00%增加到96.00%。机率值分析结果表明,在17、20、23、26和29℃温度下,白僵菌对小猿叶甲成虫和2龄幼虫的LT₅₀分别为 13.63、10.27、8.05、8.87、12.41天和 6.06、5.72、4.90、4.86、6.73天。随着相对湿度的升高,球孢白僵菌对小猿叶甲的致死中时(LT₅₀)呈缩短的趋势,当相对湿度为50%、60%、70%、80%、90%、100％时,成虫和2龄幼虫的LT₅₀分别为12.97、10.97、10.13、9.79、9.14、8.29天和7.68、6.92、5.76、5.57、5.48、4.82天。由实验结果可以得知,23～26℃是球孢白僵菌感染小猿叶甲最适宜的温度范围,环境湿度越高越有利于病原菌侵染,当相对湿度大于90%时,最有利于球孢白僵菌对小猿叶甲的感染。     

豆壳过氧化物酶的电子吸收光谱性质

应用电子吸收光谱技术研究了豆壳过氧化物酶 ( EC1 .1 1 .1 .7)的不同氧化态电子吸收光谱 ,并与其它来源的过氧化物酶作了比较研究 .天然态酶的特征吸收峰位为 40 4 nm的 Soret带 ,638nm的α带和 50 8nm的β带 ,与过氧化氢反应可生成三类复合物 .复合物 ( Com )在 40 8、580、61 8和 655nm处出现特征吸收 ;复合物 ( Com )在 41 9、52 9和 556nm处显示特征吸收 ;复合物 ( Com )则于 41 8、543和 578nm处显示特征吸收 .天然态酶经连二亚硫酸钠还原则出现 435和 558nm的特征峰 ,与氰化钾作用在 42 2和 544nm处显示特征吸收 .氰化钾对该酶的抑制为竞争性抑制 ,其 Ki 值为 2 .4μmol/L.     

嗜线虫致病杆菌HB310菌株杀虫蛋白的纯化及活性鉴定

嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophila HB310是从河北省土壤中筛选出的一株昆虫病原线虫体内分离纯化获得的共生菌,该菌的发酵液对多种昆虫有较高的杀虫活性。利用85％饱和度的硫酸铵盐析分别获得胞内蛋白提取物和上清液中胞外蛋白提取物,生测结果表明这两种蛋白提取物中都含有胃毒素和血腔毒素。通过制备型非变性凝胶电泳对蛋白提取物进行分离和纯化,得到了3种有杀虫活性的毒素蛋白（毒素Ⅰ、毒素Ⅱ和毒素Ⅲ）,胞内的毒素蛋白与分泌到胞外上清液中的毒素蛋白是同种蛋白。毒素Ⅰ和毒素Ⅱ对棉铃虫初孵幼虫有明显的胃毒活性,但没有血腔毒性;毒素Ⅲ对大蜡螟幼虫有很强的血腔毒性,LD₅₀为0.18 μg/头。SDS-PAGE图谱显示毒素Ⅰ和毒素Ⅱ是由多个多肽组成的复合蛋白,而毒素Ⅲ只分离出一条多肽。毒素Ⅱ在50℃处理10 min,其杀虫活性没有显著变化;70℃处理10 min对毒素Ⅲ杀虫活性没有显著影响。     

An Apomictic Autotriploid Line TAR Identified in Oryza sativa

Since apomixis has a close correlation with polyploidy and sterility, a number of autotriploids with no sexual reproductivity were induced and apomictic germplasm were screened in Oryza sativa L. As a result, an autotriploid line, named TAR, was cytoembryologically identified which possessed apomictic property, with an average seed-set rate of 10% per panicle. Karyotype analysis proved that all the progeny seeds of TAR carried 36 chromosomes in the generations tested. Priliminary cytological observations revealed that all the ovaries of TAR had embryo sac differentiation, 33% of which developed into normal megagametophyte, 9% with previous embryogenesis prior to anthesis, and about 58% differentiated abnormally, i.e. disordered polarization, absent female generative unit and more than 2 polar nuclei. In TAR, the frequencies of chromosome configuration of 12 Ⅲ, 11 Ⅱ + 1 Ⅱ +1 Ⅰ. L0Ⅲ +2Ⅱ +2 Ⅰ, 9Ⅲ+3Ⅱ +3 Ⅰ, 8Ⅲ+4Ⅱ +4 Ⅰ and 7Ⅲ+5 Ⅱ +5 Ⅰ were ll%, 17%, 15%, 26%, 20% and 11% respectively at metaphase Ⅰ . While in the check line T-15 of autotriploid only 7 % of the ovaries observed had embryo sac development, and the progenies of this triploid line were aneuploids with chromosome number of 25～27. In T-15, the frequencies of chromosome configuration of 12 Ⅲ, 11Ⅲ +1 Ⅱ +1 Ⅰ, 10 Ⅲ +2 Ⅱ +2 Ⅰ , 9Ⅲ+3 Ⅱ +3 Ⅰ and 8 Ⅲ+4 Ⅱ +4 Ⅰ were 24%, 16%, 36%, 17% and 7% respectively at metaphse Ⅰ . The above observations indicated that some megaspore mother cell in TAR might undergo apomeiosis and where it gave rise to unreduced embryo sac, the unreduced eggs or synergids developed into embryos without fertilization and polar nuclei produced endosperm by pseudogamy.