乳杆菌肽聚糖对β-乳球蛋白致敏小鼠脾细胞Th1/Th2及Treg/Th17失衡的体外影响

【目的】观察嗜酸乳杆菌完整肽聚糖(Whole peptidoglycan,WPG)对致敏脾淋巴细胞Th1/Th2及Treg/Th17平衡的体外调节作用。【方法】通过腹腔注射β-乳球蛋白(β-Lg)建立BALB/c小鼠牛乳过敏模型。造模成功后,分离致敏小鼠的脾淋巴细胞并分别与不同剂量的WPG共同孵育,酶联免疫法检测细胞上清液中抗体(总IgE和特异性IgE),Th1/Th2及Treg/Th17相关细胞因子(IFN-γ,IL-4,TGF-β,IL-17)水平,流式细胞术检测脾淋巴细胞中CD3+、CD4+和CD8+的百分含量,荧光定量PCR法检测过敏小鼠脾细胞中Th1/Th2及Treg/Th17相关转录因子T-bet、GATA-3、Foxp3和RORγt mRNA的表达量。【结果】WPG体外刺激致敏脾细胞后可显著抑制IgE的产生,上调CD3+、CD4+细胞数及CD4+/CD8+比值,下调Th2型因子(IL-4,GATA-3mRNA)和Th17型因子(IL-17,RORγt mRNA)的表达,且与过敏组相比,中、高剂量WPG的作用效果显著(P0.05);另外,WPG体外作用还上调了Th1型因子(IFN-γ,T-bet mRNA)及Treg型因子(TGF-β,Foxp3 mRNA)的表达,且具有剂量依赖性。【结论】嗜酸乳杆菌WPG体外刺激可有效纠正致敏脾淋巴细胞的Th1/Th2及Treg/Th17失衡。     

干酪乳杆菌干预对花生过敏小鼠模型的免疫调节作用

【目的】研究干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)Zhang在预防及治疗花生过敏方面的作用。【方法】构建小鼠花生过敏模型,饲喂L.casei Zhang,并检测血清中IgE、IgG1和IgG2a抗体,粪便中组胺和IgA抗体,细胞因子和CD4+Foxp3+Tregs细胞的含量。【结果】与模型组相比,口服L.casei Zhang的实验组小鼠血清过敏原特异性的IgG2a和粪便总IgA抗体水平有所上调,花生过敏症状及Th2型反应(血清总IgE、特异性IgE、粪便组胺和IL-4水平等指标)明显降低。L.casei Zhang的摄入对血清IgG1抗体和其他细胞因子(IL-10、IL-12及IFN-γ)的表达水平没有明显影响,而IFN-γ/IL-4的比例及实验组脾脏和肠系膜淋巴结中CD4~+Foxp3~+Tregs细胞的表达增加。【结论】L.casei Zhang能促使Th2优势反应向Th1方向转变,从而起到预防和治疗花生过敏的作用。     

应用体内外实验筛选可降低牛乳β-乳球蛋白过敏的乳杆菌

【目的】通过体内外实验评估5种乳杆菌缓解牛乳β-乳球蛋白(BLG)过敏的作用,为今后筛选具有抗过敏活性的乳杆菌提供参考。【方法】首先体外分析5种活的/热致死的乳杆菌促进小鼠原代淋巴细胞分泌细胞因子(CK)IFN-γ和IL-4的水平,随后应用小鼠BLG过敏模型评估这5种乳杆菌抑制过敏的能力。将实验动物随机分为空白组、BLG致敏组和5种活的/热致死乳杆菌组。采用ELISA法检测各组小鼠淋巴细胞分泌Thl/Th2型CK的水平,并测定小鼠血清中总IgE和BLG特异性IgE的含量。【结果】在体外可促进淋巴细胞分泌IFN-γ、抑制IL-4,使其IFN-γ/IL-4比值(代表Thl/Th2细胞平衡)显著高于正常对照组(P<0.05)的乳杆菌,在体内实验中也能有效提高致敏小鼠淋巴细胞的IFN-γ/IL-4分泌率,并显著降低致敏小鼠血清中总IgE和BLG特异性IgE的水平(P<0.05)。相反,在体外的IFN-γ/IL-4比值较低的乳杆菌,不能缓解特异性IgE抗体介导的食物过敏反应。【结论】基于乳杆菌体外刺激小鼠原代淋巴细胞分泌Th1/Th2型CK的结果,可以预测菌株在体内具有可通过纠正Th2占优势的Th1/Th2细胞失衡,下调抗体分泌量,缓解小鼠BLG过敏症状的能力。     

婴儿型双歧杆菌对哮喘小鼠气道炎症的作用研究

目的探讨婴儿型双歧杆菌对气道过敏小鼠的气道炎症作用及其机制。方法 6周龄BALB/c雄性小鼠40只,随机分为4组:阴性对照组、哮喘组、婴儿型双歧杆菌预防组和婴儿型双歧杆菌治疗组。哮喘组、预防组和治疗组用卵清蛋白(Ovalbvmin,OVA)进行致敏和激发诱发哮喘,阴性对照组用生理盐水进行致敏和激发。预防组第0至14天灌胃菌液;治疗组第15至28天灌胃菌液;阴性对照组和哮喘组全程灌胃生理盐水作对照。观察小鼠气道过敏表现;计数肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中细胞总数评估气道炎症程度;肺组织行HE染色;ELISA法测定血清中IL-10、OVA特异性IgE和OVA特异性IgG1的浓度以及肺泡灌洗液中细胞因子IL-4、IL-5、IL-10、IL-13和IFN-γ的浓度。结果 (1)哮喘组小鼠在激发后出现搔抓口鼻、竖毛、打喷嚏、腹肌扇动、弓背直立、二便失禁以及体重下降等表现,预防组和治疗组的症状较轻。(2)预防组和治疗组BALF细胞数量明显低于哮喘组(P0.05)。(3)肺组织HE染色后,哮喘组小鼠肺组织出现明显的炎症细胞浸润,预防组和治疗组肺组织炎症明显减轻。(4)预防组和治疗组血清OVA特异性IgE浓度明显低于哮喘组(P0.05),并且预防组低于治疗组(P0.05);治疗组血清OVA特异性IgG1浓度明显低于哮喘组和预防组(P0.05);预防组和治疗组血清IL-10浓度明显高于哮喘组(P0.05),且治疗组高于预防组(P0.05);(5)预防组和治疗组肺泡灌洗液中IL-4、IL-13含量明显低于哮喘组(P0.05);IL-5、IL-10、IFN-γ各组浓度都较低,未测出有效浓度。结论口服婴儿型双歧杆菌可以减轻过敏症状,降低肺组织炎症浸润程度,抑制Th2免疫反应。     

婴儿双歧杆菌对花生过敏小鼠模型肠道Th2反应的调节

目的研究婴儿型双歧杆菌对花生过敏小鼠肠道Th2型反应的调节作用。方法通过应用花生蛋白诱导肠道的Th2型反应,建立食物过敏小鼠模型。过敏小鼠灌胃给予婴儿型双歧杆菌（ATCC菌或CGMCC0313-2）或不做处理。然后分离小鼠小肠黏膜CD4＋T细胞或DC,另取肠黏膜组织进行石蜡包埋甲苯胺蓝染色肥大细胞计数,HE染色进行嗜酸细胞和单个核细胞计数,流式细胞检测CD4＋T中Th2（CD4＋IL4＋T）细胞和Treg（CD4＋CD25＋Foxp3＋T）比例,另取CD4＋T进行CFSE标记,与DC共培养4d后流式细胞检测CD4＋T增殖反应,收集细胞培养液ELISA检测IL-4、IL-5和IL—13分泌水平。结果过敏组小鼠Th2型细胞数,CD4＋T细胞增殖反应,IL4、IL-5和IL-13水平,肠黏膜中肥大细胞、嗜酸性细胞和单个核细胞数均明显高于对照组（P〈0．01）,而Treg数目低于对照组（P〈0．01）,婴儿双歧杆菌干预后,婴儿双歧杆菌组Th2型细胞数,IL4、IL-5和IL-13水平,肠黏膜中肥大细胞、嗜酸性细胞和单个核细胞数均明显低于过敏组（P〈0．01）,而Treg数目高于过敏组（P〈0．01）。结论口服婴儿型双歧杆菌可以抑制花生过敏导致的肠道Th2型反应。     

青春双歧杆菌对NOD小鼠1型糖尿病的免疫调节作用

目的 探讨早期应用青春双歧杆菌对NOD小鼠1型糖尿病发病的影响.方法 给予NOD小鼠口服青春双歧杆菌,观察实验组和对照组(PBS)糖尿病发病率,HE染色观察胰岛炎,免疫组化检测胰岛Bcl-2和Bax的表达,RT-PCR测定TNF-α、IFN-γ和IL-10 mRNA表达.结果 实验组胰岛炎程度较对照组明显减轻(P＜0.01),胰岛Bcl-2的表达高于对照组,而Bax的表达低于对照组(P＜0.05);胰腺TNF-α、IFN-γ mRNA表达实验组明显低于对照组(P＜0.05),而IL-10 mRNA表达差异无显著性;实验组发病率低于对照组(P＜0.05).结论 青春双歧杆菌对NOD小鼠1型糖尿病有预防作用,其机制可能与调节Th1/Th2型细胞因子的免疫失衡有关.     

乳杆菌对牛乳β-乳球蛋白致敏小鼠淋巴细胞分泌Th1/Th2型细胞因子和抗体的体外影响

为了分析乳杆菌对致敏小鼠脾淋巴细胞分泌Th1/Th2细胞因子及抗体的体外影响,用牛乳β-乳球蛋白腹腔注射BALB/c小鼠建立过敏症模型,造模成功后,分离致敏小鼠的脾淋巴细胞并与4种活/死乳杆菌(107 CFU/mL)体外共同孵育,ELISA法检测细胞上清液中细胞因子(IL-12、IFN-γ和IL-4)和抗体(总IgE、β-Lg特异性IgE和总IgG)含量。4种活/死乳杆菌均可体外调节致敏小鼠脾淋巴细胞分泌细胞因子和抗体的水平,特别是热致死的发酵乳杆菌和嗜酸乳杆菌可提高淋巴细胞IL-12和IFN-γ的分泌,抑制IL-4的分泌,使其IFN-γ/IL-4比值(代表Th1/Th2细胞平衡)高于活菌,与空白对照组比较差异显著(P<0.05)。同时,这两株热致死菌还可显著下调细胞上清液中总IgE、特异性IgE和总IgG抗体的浓度(P<0.05)。试验结果表明乳杆菌可提高牛乳β-乳球蛋白致敏小鼠脾淋巴细胞的IFN-γ/IL-4比值,进而纠正Th2占优势的Th1/Th2失衡,下调抗体分泌量,且具有菌株特异性。     

木犀草素调节SIRT3/AMPK/mTOR信号通路对溃疡性结肠炎小鼠Th17/Treg免疫平衡的影响CSCD

探究木犀草素对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠模型中辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫平衡的影响,并分析其潜在机制。60只BALB/c雄性小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、木犀草素组、木犀草素+3-TYP组,每组12只。采用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导建立UC模型,观察并记录小鼠体重变化、大便稠度和大便潜血情况,计算疾病活动指数(DAI);HE染色观察结肠组织病理学变化;流式细胞术检测脾脏Th17、Treg细胞比例,计算Th17/Treg比值;ELISA检测结肠组织中IL-6、IL-10、IL-17和IL-23含量;RT-qPCR检测结肠组织RORγt和Foxp3的mRNA表达;Western blot检测结肠组织SIRT3、AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR蛋白表达。与正常组相比,模型组小鼠DAI评分、组织病理学评分、脾脏Th17/Treg比值、结肠组织IL-6、IL-17、IL-23、RORγt mRNA水平和p-mTOR/mTOR比值升高,IL-10、Foxp3 mRNA和SIRT3蛋白水平以及p-AMPK/AMPK比值降低(P<0.05)。经药物干预后,小鼠DAI评分、组织病理学评分、脾脏Th17/Treg比值、结肠组织IL-6、IL-17、IL-23、RORγt mRNA水平和p-mTOR/mTOR比值降低,IL-10、Foxp3 mRNA和SIRT3蛋白水平以及p-AMPK/AMPK比值升高(P<0.05);3-TYP可减弱木犀草素对UC小鼠Th17/Treg细胞分化平衡的影响(P<0.05)。木犀草素可改善DSS诱导的UC小鼠模型中Th17/Treg失衡,其机制可能与激活SIRT3/AMPK/mTOR通路有关。     

自身免疫性心肌炎中Th17/Treg细胞及其相关因子的动态变化

目的研究Th17与Treg细胞相关因子在实验性自身免疫性心肌炎(EAM)中的动态变化,探讨EAM发病机制。方法注射心肌肌球蛋白免疫Balb/C小鼠构建EAM模型(EAM组,n=18),随机分成7d、21d、56d不同时间段3个亚组;正常对照组18只,用PBS代替心肌肌球蛋白皮下注射。取各组心肌组织行HE染色观察病理变化,RT-PCR法检测心肌组织RORγt、Foxp3、IL-17和TGF-β的mRNA表达水平,ELISA方法检测血清IL-17和TGF-β的变化。结果 EAM各组小鼠出现不同程度心肌炎症改变;EAM 21d组心肌组织RORγt、Foxp3、IL-17和TGF-βmRNA表达水平较正常对照组明显升高(P0.01),血清IL-17和TGF-β水平也显著高于正常对照组(P0.05);EAM 56d组血清IL-17和TGF-β含量比21d组有所降低,但仍高于正常对照组(P0.05)。结论 Th17与Treg细胞及其相关因子参与自身免疫性心肌炎的发生与发展。     

耐受性树突状细胞预防和治疗卵清蛋白过敏小鼠的的研究

目的 比较腺病毒重组CTLA4Ig/α4β7诱导的耐受性树突状细胞对卵清蛋白(OVA)致敏小鼠的预防和治疗效果.方法 BALA/c小鼠32只,分为4组.基础致敏24h后回输耐受性树突状细胞为预防组;肠道激发4h后回输耐受性树突状细胞为治疗组;回输生理盐水为阴性对照组和OVA过敏小鼠为阳性对照组.观察各组小鼠过敏症状缓解情况;HE染色观察空肠形态;甲苯胺兰染色观察小肠固有层肥大细胞聚集及脱颗粒现象;ELISA测定各组血清中OVA特异性IgE水平.结果 与阳性对照组相比,治疗组小鼠OVA特异性IgE水平显著降低(0.25±0.05 vs 0.17±0.03) (P ＜0.05);体重增长明显(3.16 g±0.75 g vs 5.04 g±0.49 g)(P ＜0.05);腹泻症状减轻;HE染色可见治疗组小肠绒毛中上皮细胞局灶性坏死、脱落,固有层炎症细胞浸润现象明显改善;肥大细胞聚集和脱颗粒现象改善.而预防组较阳性对照组过敏症状、小肠形态学及OVA特异性IgE水平差异均无统计学意义.结论Ad CTLA4Ig/Adα4β7修饰的致耐受性树突状细胞对卵清蛋白过敏小鼠具有治疗作用而无预防作用.     

肺炎支原体肺炎伴喘息儿童血清25(OH)D_3、Th17/Treg表达水平与肺功能的关系

目的:探讨肺炎支原体肺炎伴喘息儿童血清25羟基维生素D3[25(OH)D_3]、辅助性17细胞/调节性T细胞(Th17/Treg)表达水平与肺功能的关系。方法:将新疆医科大学第五附属医院收治的肺炎支原体肺炎伴喘息患儿26例作为肺炎伴喘息组,肺炎支原体肺炎不伴有喘息患儿54例作为肺炎不伴喘息组,另选取健康儿童30例作为对照组,比较各组血清25(OH)D_3、白细胞介素(IL)-10、IL-17、Th17细胞及Treg细胞占CD4+T细胞比例及肺功能,并分析其相关性。结果:肺炎伴喘息组血清25(OH)D_3、IL-10、Treg细胞占CD4+T细胞比例低于肺炎不伴喘息组、对照组,Th17细胞占CD4+T细胞比例、Th17/Treg、IL-17高于肺炎不伴喘息组、对照组(P0.05)。各组第一秒最大呼气量占用力肺活量百分比(FEV1/FVC)比较差异无统计学意义(P0.05),肺炎伴喘息组FEV1占预计值百分比(FEV1%pred)、峰值呼气流量(PEF)低于肺炎不伴喘息组、对照组(P0.05),肺炎不伴喘息组与对照组FEV1%pred、PEF比较无统计学意义(P0.05)。肺炎伴喘息组患儿血清25 (OH)D_3与Th17/Treg、IL-17呈负相关(P0.05),与IL-10、FEV1%pred、PEF呈正相关(P0.05),血清Th17/Treg与IL-10、FEV1%pred、PEF呈负相关(P0.05),与IL-17呈正相关(P0.05)。结论:肺炎支原体肺炎伴喘息儿童血清25(OH)D_3、Th17/Treg表达水平异常,肺功能下降,且25(OH)D_3、Th17/Treg表达水平与肺功能相关。     

牙龈卟啉单胞菌感染对慢性牙周炎患者牙周指标、NLRP-3炎性小体通路和Th17/Treg细胞平衡的影响

摘要 目的：探讨牙龈卟啉单胞菌（PG）感染对慢性牙周炎（CP）患者牙周指标、Nod样受体蛋白-3（NLRP-3）炎性小体通路和辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）平衡的影响。方法：选择2018年6月至2021年11月在本院进行拔牙治疗的慢性牙周炎患者106例为CP组,根据是否感染PG分为感染组和未感染组;另选择因阻生齿、错位牙在本院进行治疗的牙周健康患者63例为对照组。记录所有对象的探诊深度（PD）、菌斑指数（PLI）、出血指数（BI）、附着丧失（AL）,采用聚合酶链式反应（PCR）技术检测PG感染率,采用RT-PCR技术检测牙周膜组织中NLRP-3 mRNA,接头蛋白凋亡相关斑点样蛋白（ASC） mRNA、半胱氨酸天冬氨酸酶-1（Caspase-1） mRNA的表达量,采用FACSCalibur流式细胞仪检测外周血Th17、Terg 水平并计算Th17/Treg,比较两组各检测指标水平。结果：对照组PG感染阳性率为17.46%,低于CP组的79.25%,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。感染组PD、PLI、BI、AL水平均高于非感染组,差异有统计学意义（P＜0.05）。感染组NLRP-3 mRNA、ASC mRNA、Caspase-1 mRNA表达量均高于非感染组,差异有统计学意义（P＜0.05）。感染组外周血Th17细胞、Th17/Treg水平高于非感染组,Treg水平低于非感染组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：CP患者多数存在PG感染,PG感染对患者的牙周健康、炎症及免疫有明显的影响。     

妊娠梅毒患者外周血中Th17和Treg细胞水平及其临床意义分析

目的:探讨妊娠梅毒患者外周血中Th17和Treg细胞水平及其临床意义。方法:选择2015年4月至2016年5月我院收治的35例妊娠梅毒患者作为观察组,并选择同期进行孕检的健康孕妇30例作为对照组。分析和比较其外周血Th17和Treg细胞水平及其诊断妊娠梅毒的临床价值。结果:观察组患者外周血Th17水平显著高于对照组,而外周血Treg水平显著低于对照组(P0.05)。多因素logistic回归分析结果显示外周血Th17和Treg水平与妊娠梅毒发病具有明显相关性。外周血Th17诊断妊娠梅毒的AUC为0.776,95%CI为0.656～0.896,外周血Treg诊断妊娠梅的ROC曲线下的面积(area under curve,AUC)为0.947,95%CI为0.897～997,Th17+Treg诊断妊娠梅毒的AUC为0.960,95%CI为0.913～1.000;Th17和Treg单独检测分别和联合检测曲线下面积比较均具有显著差异(Z=-2.807、-0.375,P0.05);Th17+Treg联合检测的特异度、准确度分别为91.73%、93.28%,显著高于各指标单独检测(P0.05)。结论:妊娠梅毒患者外周血Th17细胞增多,Treg细胞减少,联合检测外周血Th17和Treg细胞水平诊断妊娠梅毒具有较高的准确度,可作为诊断妊娠梅毒的重要参考指标。     

不明原因复发性流产再次妊娠患者血清1,25(OH)2D3、sTim-3与Th17/Treg免疫失衡和妊娠结局的关系

摘要 目的：探讨不明原因复发性流产（URSA）再次妊娠患者血清1,25-二羟维生素D3[1,25（OH)）₂D₃]、可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3（sTim-3）与辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）免疫失衡和妊娠结局的关系。方法：选择于湖南省妇幼保健院2020年1月~2022年1月就诊的62例URSA再次妊娠患者作为研究组,另选择同期进行孕检的正常早孕妇女30例作为对照组。比较两组孕早期血清1,25(OH) ₂D₃、sTim-3及外周血Th17细胞、Treg细胞水平、Th17/Treg比值。Pearson法分析URSA再次妊娠患者血清1,25(OH) ₂D₃、sTim-3与外周血Th17细胞、Treg细胞水平、Th17/Treg比值平的相关性。根据URSA再次妊娠患者妊娠结局的不同分为妊娠成功分娩组和妊娠再次流产组,比较两组孕早期血清1,25(OH) ₂D₃、sTim-3与外周血Th17细胞、Treg细胞水平、Th17/Treg比值。受试者工作特征（ROC）曲线分析血清1,25(OH) ₂D₃、sTim-3与外周血Th17细胞、Treg细胞水平、Th17/Treg比值对妊娠结局的预测价值。结果：研究组血清sTim-3、外周血Th17细胞水平、Th17/Treg比值高于对照组,血清1,25(OH) ₂D₃、外周血Treg细胞水平低于对照组（P<0.05）。Pearson相关分析显示,URSA再次妊娠患者血清1,25(OH) ₂D₃与血清sTim-3、外周血Th17细胞水平、Th17/Treg比值呈负相关,与Treg细胞水平呈正相关（P<0.05）;血清sTim-3与外周血Treg细胞水平呈负相关,与Th17细胞水平、Th17/Treg比值呈正相关（P<0.05）。妊娠再次流产组血清sTim-3、外周血Th17细胞水平、Th17/Treg比值高于妊娠成功分娩组,血清1,25(OH) ₂D₃、外周血Treg细胞水平低于妊娠成功分娩组（P<0.05）。ROC曲线分析显示,血清1,25(OH) ₂D₃、sTim-3及外周血Th17细胞、Treg细胞水平及Th17/Treg比值均可预测URSA再次妊娠患者妊娠再次流产的发生风险,且上述指标联合检测的预测效能更高。结论：血清1,25(OH) ₂D₃水平异常降低、sTim-3水平异常升高可导致Th17/Treg免疫失衡,导致URSA再次妊娠患者再次发生流产。上述指标联合检测对URSA再次妊娠患者妊娠再次流产的预测效能更高。     

小肠结肠炎耶尔森菌对多粘菌素B的压力应答

【背景】小肠结肠炎耶尔森菌(Yersinia enterocolitica)是重要的人畜共患食源性病原菌。由于其生存环境与传染性生活方式,小肠结肠炎耶尔森菌暴露在各种生存压力中,而胞膜压力应答能力对维持其环境耐受性和毒力发挥着重要作用。【目的】探究小肠结肠炎耶尔森菌在胞膜压力应答中的调节机制。【方法】通过使用多粘菌素B破坏小肠结肠炎耶尔森菌细胞膜的稳定性,并从生长能力、运动能力、生物被膜形成能力以及相关基因表达的变化探讨Rcs (Regulator of Capsule Synthesis)系统对多粘菌素B产生的胞膜压力的应答。【结果】多粘菌素B引起的细胞胞膜压力抑制了小肠结肠炎耶尔森菌的运动和生物被膜形成能力;而阻断Rcs信号途径后,小肠结肠炎耶尔森菌的运动和生物被膜形成能力有所恢复。对flhC、hmsS、hmsT等关键下游表型基因的表达水平的分析结果表明Rcs双组分系统对由多粘菌素B诱导的胞膜压力作出响应,通过感知胞膜胁迫向胞内传递信号,积极地调控细菌增强对抗菌肽的抗性。【结论】明确了Rcs双组分系统在响应多粘菌素B压力胁迫中的特异性调控作用,加深了对小肠结肠炎耶尔森菌环境应答机制...     

多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞Treg、Th17和血清IL-6、IL-10与临床分期以及治疗效果的关系分析

摘要 目的：探讨多发性骨髓瘤（MM）患者骨髓单个核细胞调节性T细胞（Treg）、辅助性T细胞（Th17）和血清白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）与临床分期以及治疗效果的关系。方法：选择2016年3月至2020年12月河北医科大学第一医院收治的MM患者60例为研究对象,检测并对比不同Durie-Salmon分期患者的骨髓单个核细胞Treg、Th17、Treg/Th17及血清IL-6、IL-10水平;患者入院后均给予常规治疗,根据疗效分为有效组和无效组,比较两组治疗前后骨髓单个核细胞Treg、Th17、Treg/Th17及血清IL-6、IL-10水平;分析Treg、Th17、Treg/Th17及血清IL-6、IL-10与MM患者Durie-Salmon分期、治疗效果的相关性。结果：MM患者骨髓单个核细胞Treg、Treg/Th17及血清IL-6、IL-10水平III期组高于II期组,II期组高于I期组（P＜0.05）。有效组治疗后骨髓单个核细胞Treg、Treg/Th17水平及血清IL-6、IL-10水平较治疗前明显降低（P＜0.05）;治疗后,骨髓单个核细胞Treg、Treg/Th17及血清IL-6、IL-10水平无效组高于有效组（P＜0.05）。骨髓单个核细胞Treg、Treg/Th17及血清IL-6、IL-10水平与MM患者Durie-Salmon分期呈正相关,与治疗效果呈负相关（P＜0.05）;骨髓单个核细胞Th17水平与MM患者的Durie-Salmon分期、治疗效果无明显的相关性（P＞0.05）。结论：骨髓单个核细胞Treg、Treg/Th17水平及血清IL-6、IL-10水平与MM患者肿瘤临床分期、治疗效果密切相关,检测其水平可对MM的临床治疗及预后起到一定评估作用。     

Circulating FoxP3+ Regulatory T and Interleukin17-Producing Th17 Cells Actively Influence HBV Clearance in De Novo Hepatitis B Virus Infected Patients after Orthotopic Liver Transplantation

Objective

To longitudinally investigate the role of FoxP3+ Regulatory T cells (Treg) and interleukin17-producing T helper 17 cells (Th17) in De Novo Hepatitis B Virus infection after orthotopic Liver Transplantation (DNHB-OLT), and analyze the possible correlation between these cells and HBV clearance of the disease.

Methods

We enrolled 12 control cases after orthotopic Liver Transplantation (OLT) and 24 patients, including 12 diagnosed with DNHB-OLT and 12 diagnosed with Acute Hepatitis B Virus infection (AHB), into the study from the liver transplantation and research center at Beijing 302 Hospital. Flow cytometry was used to detect the frequencies of Treg and Th17, and ELISA was applied to detect the concentration of IL6, IL22, TGF-β and IL2 in peripheral blood. We also measured the gene expression level by real time-quantitative PCR and protein expression using immunohistochemistry and western-blot. Furthermore, we divided DNHB-OLT patients into the clearance and non-clearance groups and examined longitudinally Th17, Treg cells at different times.

Results

The percentage of Treg cells, expression of FoxP3 mRNA and related anti-inflammatory cytokines such as IL2 and TGF-β1 in the DNHB-OLT group were significantly higher than that in the AHB and OLT groups. The percentage of Th17 cells, expression of RORγt mRNA and related pro-inflammatory cytokines such as IL17 and IL22 in the DNHB-OLT group were significantly lower than that in the AHB group, but the levels of these cytokines are very similar to the OLT group. The ratios of Treg to Th17 in the DNHB-OLT group were significantly higher than that in the OLT and AHB groups. Treg frequencies significantly correlated with HBV DNA, whereas IL17 frequencies didn’t significantly correlate with ALT. In DNHB-OLT patients, the clearance group was accompanied by a rapid increase in the Th17 cells during the first 4^th week and afterwards continuously decrease to the control group, together with a continuously decrease in Treg cells from the onset time point, which lead to a significant reduction in the ratios of Treg to Th17. The non-clearance group was accompanied by an increase in the Treg cells during the first 4^th week and afterwards sharply decrease, together with a relatively stable and unchanged Th17 cells, which lead to a significant change in the ratios. In addition, compared to clearance group, the ratios of Treg to Th17 in non-clearance group were significantly higher at the onset point, 4^th and 12^th week, but no difference at 24^th week.

Conclusion

DNHB-OLT patients possessed a favorable Treg differentiation environment, accompanied by a sustained higher preferentially Treg frequencies and up-regulation of related anti-inflammatory cytokines. The immune imbalance of the ratios between Treg and Th17 existed in DNHB-OLT patients. The changes of the ratios during the DNHB-OLT events were associated with HBV clearance, which suppressed immune inflammation reaction as well as inhibited ability of specific HBV clearance and led to immune escape and chronicity.     

染色体核型异常、Th17/Treg免疫失衡与复发性流产的关系及其影响因素分析

摘要 目的：研究染色体核型异常、辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）免疫失衡与复发性流产（RSA）的关系及其影响因素。方法：选择石家庄市妇幼保健院从2019年2月～2022年2月收治的421例RSA患者,记作研究组。另取同期无生殖系统异常女性400例作为对照组。比较两组染色体核型异常、Th17/Treg免疫情况以及各项基线资料。采用多因素Logistic回归分析明确RSA的影响因素。结果：研究组染色体核型异常发生率为10.21%,高于对照组的1.50%（P＜0.05）。研究组Th17、Th17/Treg比值高于对照组,而Treg低于对照组（均P＜0.05）。研究组文化程度初中及以下、生殖道感染、难闻性气味以及噪音人数占比均高于对照组（均P＜0.05）。经多因素Logistic回归分析可得：RSA的危险因素有文化程度初中及以下、生殖道感染、难闻性气味、噪音、染色体核型异常、Th17/Treg比值升高（均P＜0.05）。结论：染色体核型异常以及Th17/Treg免疫失衡均会增加RSA的发生风险,且文化程度初中及以下、生殖道感染、难闻性气味、噪音亦会增加RSA的发生风险,临床工作中可根据上述因素制定针对性干预措施,以达到降低RSA发生率的目的。