桔梗科4种植物分离配囊的比较研究

应用酶解技术分离出桔梗科四种植物(桔梗、轮叶沙参、杏叶沙参和羊乳)的胚囊。对胚囊的形态结构和贮藏物质的变化作了观察比较。它们的成熟胚囊结构基本相同,均由卵细胞、一对助细胞和中央细胞组成。反足器退化较早。但形态、大小等有一定差异。桔梗胚囊狭长,细胞质浓密;沙参(包括轮叶沙参与杏叶沙参)的胚囊也较狭长,细胞质不如前者浓密;羊乳胚囊非常宽大,而细胞质相当稀薄,与前三种植物的差异较大。它们均含有贮藏物质,显微化学反应表明主要系多糖物质。多糖颗粒的形状、大小各有特点,在胚囊受精前后的消长变化也有不同。其中羊乳与其它三种植物之间的差别较大。     

几种植物生活胚囊的分离与鉴定

向日葵、金鱼草和烟草的成熟胚囊以及前两种植物受精后具原胚和胚乳的胚囊均已从新鲜胚珠中分离出来。干涉差显微观察与 H33258荧光显微技术表明它们确系保持了细胞结构和含有丰富内含物的完整胚囊。荧光素二醋酸酯的显微鉴定进一步证明它们是有生活力的。     

用酶解方法观察卷丹的贝母型胚囊发育过程

酶法分离技术作为观察胚囊发育的一种简捷技术已经应用于不少植物。然而,百合科植物迄今未见类似报道。最近,作者以卷丹为实验材料观察了大孢子发生和雌配子体发育,表明这一技术对于具有贝母型四孢子胚囊发育特点的百合属植物是同样适用的。     

濒危植物裂叶沙参的大小孢子发生及雌雄配子体发育

本文以近缘广布种泡沙参为对照,对濒危物种裂叶沙参进行了大小孢子发生和雌雄配子体发育的研究。裂叶沙参的药壁发育为双子叶型,绒毡层为腺质型,细胞含两核。小孢子母细胞在减数分裂过程中胞质分裂为同时型。小孢子四分体为四面体型,成熟花粉粒为2-细胞型。胚珠倒生,单珠被,薄珠心,大孢子四分体为线形排列,胚囊发育为蓼型。成熟胚囊中两极核在受精之前融合为一个大的次生核。当胚囊发育至单核胚囊时,珠被的最内层细胞发育为珠被绒毡层。濒危植物裂叶沙参在大、小孢子发生及雌、雄配子体的发育过程中,未见有败育及其它异常现象;与对照种泡沙参相比,也未见有差异,这说明裂叶沙参的致濒原因不在于有性生殖过程。     

短柄五加开花后雌蕊的发育状态与受精作用的研究

短柄五加（ＥｌｅｕｔｈｅｒｏｃｏｃｕｓｂｒａｃｈｙｐｕｓＨａｒｍｓ．）开花当天,花药散粉,而雌配子体需经４～５ｄ才发育成熟。证实短柄五加为雄蕊先熟植物。开花第５天,成熟胚囊的比率为５７６９％,其余为退化和不育胚囊。开花第６天,胚囊开始受精。开花第１０天,受精胚囊占胚囊总数的５３５７％。柱头的可授期自开花后第４～５天开始,自花粉萌发至雌雄性核融合大约有２～３ｄ的间隔期。短柄五加受精过程与一般被子植物相同,其受精作用属于有丝分裂前配子融合类型。观察并统计了合子中雌性核仁的数目、存在状态,指出短柄五加合子中从雄性核仁出现到与雌雄性核仁融合为一个大核仁需经历３ｄ左右;如果以胚乳游离核数目为对照,大部分合子中雌雄性核仁的融合发生在３２～１２８个胚乳游离核时期。大多数合子是以雌雄性核仁融合为一个大核仁后进入合子分裂期;少数合子的雌雄性核仁不经融合也进入合子分裂期。观察到多精入胚囊、多精入卵以及成熟胚囊退化的现象。讨论了被子植物受精过程中有关受精终结的标志等问题。     

刺五加开花后雌蕊的发育状态与受精作用

刺五加Eleutherococcus senticosus(Rupr． et Maxim．)Maxim．植株在开花后雌配子体的发育状态与 一般植物不同在于:雌配子体在开花当天均末成熟,在开花后经4-5天才发育成熟。开花第6天,雌株 和两性株的成熟胚囊百分率各为82．25％和67．25％,其余为未育、败育、退化或未成熟胚囊,未观察到 已受精的胚囊;而此时,雄株的雌配子体退化、花朵全部脱落。伴随着胚囊的分化,刺五加雌株和两性株 的花柱逐渐延长,蜜腺渐趋成熟。开花后4～6天,乳突细胞发育,柱头开始外翻;此后,蜜腺分泌花蜜, 柱头进入可授期。开花第7天,胚囊开始受精。开花后9～10天,雌株已受精的胚囊占胚囊总数的40～ 65％,两性株已受精的胚囊占胚囊总数的25～41％。刺五加花粉萌发至雌雄性核融合的间隔期约为2 ～3天。刺五加的双受精过程与一般被子植物基本相同。其受精作用属于有丝分裂前配子融合类型。 此外,还观察了成熟胚囊退化的类型,观察到多余花粉管进入胚囊以及两个精子与卵受精、两个精子与次生核融合的图象。     

钙调素mRNA在受精前后分离的烟草胚囊中的定位

建立了一种新的ｍＲＮＡ原位杂交方法,适用于微量材料的整体观察。应用这一方法定位烟草（ＮｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍＬ．ｃｖ．Ｗ３８）受精前后胚囊成员细胞中的钙调素ｍＲＮＡ（ＣａＭｍＲＮＡ）。结果显示成熟胚囊中的ＣａＭｍＲＮＡ主要分布于珠孔极的卵器和合点极的反足细胞;中央细胞中较少。受精前后胚囊中ＣａＭｍＲＮＡ的分布发生显著变化,特别是授粉后到受精前极核与卵器之间出现一条暂时的钙调素ｍＲＮＡ条带。受精前不久该带消失,ＣａＭｍＲＮＡ扩展为占据胚囊珠孔端的扇形区域。受精后胚囊中钙调素ｍＲＮＡ主要集中于伸长的合子和原胚的合点端。讨论了钙调素ｍＲＮＡ表达与受精的关系。     

烟草爱精后胚囊和合子的分离及合子的离体分裂

以酶解－振荡,酶解－解剖及酶解－研磨３种方法分离出烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ）受精后生活胚囊,其中以第三种方法效果最好,将分离在胚囊经再次酶解并结合显微解剖,进一步分离出合子,胚乳细胞及其原生质体。以微室饲养法培养离体合子,启动了第一次分裂。     

分离烟草胚囊的新方法及诱导卵细胞与助细胞原生质体的原位融合

用渗透压冲击和酶解相结合的技术,成功地分离出大量形态完整、结构清晰的烟草生活胚囊。此法用酶浓度低,操作时间短、例于纯化,易于分离胚囊细胞原生质体,为植物雌性细胞操作提供了一种较实用的技术。此外,通过整溶液渗透压,可有效地控制及诱导卵细胞与助细胞原生质体的原位融合。     

非洲狼尾草未受精无孢子生殖胚囊退化研究

为理解植物无孢子生殖胚囊未受精条件下的退化,对无孢子生殖植物非洲狼尾草未受精成熟胚囊中央细胞退化做了细胞形态学研究。没有受精的中央细胞退化时最显著的特点是细胞核产生核膜囊泡。核膜囊泡有两种类型:单层膜的囊泡和双层膜的囊泡,单层膜囊泡在细胞质中,双层膜囊泡在细胞核内。核膜囊泡有两种发生方式:1)核膜的外膜向细胞质一侧膨胀产生囊泡,囊泡进入细胞质;2)核膜向核内凹陷形成囊泡,囊泡进入细胞核。核膜囊泡类型与产生方式密切关联。核膜囊泡吞噬并消化包括线粒体在内的细胞质和核质。     

植物的生殖讲座（三）：胚囊的超微结构

植物的生殖讲座（三）──胚囊的超微结构赵云云，田汝岭（首都师范大学生物学系１０００３７）被子植物的胚囊发生过程中，在珠心中的大抱子母细胞减数分裂后，有功能的大孢子就是胚囊细胞。胚囊细胞是雌配子体的第一个细胞，它经过几次有丝分裂后就形成成熟的胚囊（雌配...     

一种单性结实枣的胚胎学观察

本文对一种单性结实枣做了较详细的胚胎学观察。结果表明:孢原由1—4个细胞组成,通常仅有一个可发育为大孢子母细胞。有二个大孢子核参与胚囊形成,胚囊属葱型。部分花柱中有花粉管,但不发生受精。果实的发育不依赖于受精,是一种稳定的单性结实类型。讨论了传粉与果实发育的关系。     

红花胚珠和雌配子体发育

用石蜡切片法研究了红花的大孢子发生和雌配子体发育过程,得到以下结果：（１）胚珠发育为薄珠心类型,倒生胚珠,具单珠被。（２）胚囊发育蓼型。（３）有珠被绒毛层,珠被绒毡层起始于大孢子母细胞时期,单核胚囊阶段高度发育,受精后从合点端逐渐退化。珠孔塞细胞呈毛状。     

蓝猪耳受精生物学研究进展

蓝猪耳(Torenia fournieri L.)胚囊半裸露,在光学显微镜下能清楚观察到卵细胞、助细胞及部分中央细胞的形态结构,有助于原位观察卵细胞在受精前后的变化状态,被认为是研究被子植物体内受精机理的一种模式植物。综述了蓝猪耳的受精机理:花粉管定向进入胚囊的方式与机理、钙在受精过程中的作用、受精前后胚囊细胞骨架的动态变化。简要介绍了离体受精技术在蓝猪耳受精生物学中的发展应用。根据前人对蓝猪耳的研究成果并结合我们的研究,指出蓝猪耳在受精生物学中的应用,特别是借助离体受精技术平台,将具有更大的研究前景。     

水稻PDER品系的特点和二倍体孢子生殖胚囊的形成和发育

对水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）早发生胚ＰＤＥＲ（ｐｒｅ－ｄｅｖｅｌｏｐｅｄｅｍｂｒｙｏｏｆｒｉｃｅ）品系的特点和细胞胚胎学研究表明,ＰＤＥＲ是二倍体植物２ｎ＝２４,约有５０％胚囊的卵细胞未经受精能自行发育形成胚,成熟种子的萌发和生长速度较常规正常水稻快。ＰＤＥＲ的大孢子母细胞经有丝分裂产生未减数的胚囊,即无融合生殖中的二倍体孢子生殖类型。在胚囊形成和发育过程中有如下几个特点：（１）孢原细胞至大孢子母细胞分裂前的过渡期持续时间较长,孢原细胞和大孢子母细胞的细胞质比周围的珠心细胞质稀淡。（２）大孢子母细胞经二次有丝分裂后形成直线排列的三个细胞（三分体）,珠孔端的两个解体,合点端的一个发育为功能细胞,有少数胚囊的三个细胞全部解体形成败育胚囊。（３）功能细胞经三次连续核分裂形成具八核七个细胞的成熟胚囊,它的结构与常规正常水稻基本相同,但助细胞呈长形而没有回抱着卵细胞。     

低温对蝴蝶兰胚珠发育的影响

低温(12-18℃)处理的蝴蝶兰,授粉50 d开始分化胚珠原基、60 d胚囊处于大孢子母细胞时期,比常温(20-25℃)下的推迟10-15 d;授粉70 d,常温下的蝴蝶兰植株已完成雌配子体发育和双受精,而低温处理的蝴蝶兰仍未完成大孢子的发生过程.低温处理的蝴蝶兰,胚囊发育过程中珠心细胞提前退化,在大孢子母细胞外围形成较厚的胚囊壁.胚囊只发育到单核胚囊阶段,没有形成成熟胚囊.     

水稻雌性不育材料FS-1胚囊败育的细胞学观察

以水稻雌性不育材料FS-1为试验材料,采用石蜡连续切片技术对FS-1及其亲本藤坂5号幼穗发育中期的胚囊进行观察,结果表明(1)亲本的胚囊都能正常发育分化,成为功能健全的雌配子体,而FS-1的胚囊却普遍发生败育,在胚囊原来的区域充满了胚囊残迹和解体的珠心细胞.(2)败育基本上发生在功能大孢子发生期,近合点端的大孢子和珠孔端的三个大孢子都发生解体,实验中未发现二核、四核或八核的败育胚囊,我们初步认为,FS-1胚囊败育发生在功能大孢子发生期.     

水稻双受精过程的共聚焦显微镜观察

(郑州大学离子束生物工程省重点实验室,郑州450052)摘要:首次利用核特异荧光染色与整体透明技术并利用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)对水稻双受精过程进行了观察。激光扫描共聚焦显微镜具有"组织与细胞CT"的功能,可以对整体组织进行扫描并构建三维结构。经荧光染色及透明处理后,在激光扫描共聚焦显微镜下经488nm激光激发,胚囊内各细胞的细胞核以及核仁发出明亮荧光,细胞核轮廓比较清晰,层次感强,并能清晰观察到胚囊内各细胞的结构特点和空间位置关系。不论是对开花前较小的成熟胚囊材料还是开花后较大的胚囊材料都取得了较好的观察效果。同传统的光学显微镜和荧光显微镜相比,其观察到的图像更清晰、更直观、更具立体感。     

多胚水稻品系APⅣ不同类型胚囊的受精及其胚胎形成

通过ＧＭＡ半薄切片技术对ＡＰⅣ不同类型水稻胚囊的受精及其胚胎发育的研究表明,ＡＰⅣ中５－２－１型胚囊的３个卵细胞在少数情况下都可受精并发育形成３个胚;但多数情况中只有１个或２个卵细胞受精发育成１个胚或２个胚。６－２－０型和５－３－０型胚囊多个卵受精频率都很低。由此证明ＡＰⅣ多胚是来自如５－２－１型胚囊的多卵卵器胚囊多个卵细胞都受精的结果,其中３胚来自３个卵细胞受精发育,２胚来自２个卵细胞受精发育。     

水稻受精前后胚囊内钙调素分布的变化：免疫金电镜观察

用胶体金免疫电镜技术观察了水稻 (Oryzasativasubsp .japonica)受精前后胚囊内钙调素的分布变化。授粉后 ,卵细胞、助细胞和中央细胞内的钙调素较授粉前均有所增加。中央细胞内钙调素的增加要比卵细胞中约早 2h ,退化助细胞与宿存助细胞之间的钙调素含量无明显差异。授粉到受精期间 ,钙调素的主要分布形式由分散的单颗粒转变为聚集颗粒 ,受精完成后再变为分散的单颗粒形式。胚囊壁及珠心细胞的细胞壁和胞间隙中也观察到钙调素的分布和数量变化。初步讨论了胞内和胞外钙调素在水稻受精与合子形成中的作用。