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vi—PHA试剂的研制及其在检测伤寒带者中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
Purified S. typhi Vi antigen is sensitized with equal volume of tannic acid treated formalational sheep erythrocytes (SRBC) at a final concentration of 1 microgram/ml. The Vi-passive hemagglutination assay (Vi-PHA) diagnostic reagent is developed to detect Vi antibodies to S. typhi for the detection of chronic carriers after typhoid fever and the screening S. typhi healthy carriers from food-handlers, which is characterized with high sensitivity, strong specificity and good stability. This Vi-PHA reagent is able to detect 1.16 micrograms/ml of Vi antibodies and doesn't make any cross reaction with healthy sera. For the sera of other diseases, the cross rate is only 0.84%. Using this reagent, 19 positive sera (6.93%) are detected from 274 convalescent sera from typhoid fever, 14 convalescents of which are stool-culture S. typhi positive, that persists a positive rate of 73.68%; 3 positive sera are detected from 106 foodhandlers, one of which is stool-culture S. typhi positive. Therefore, the reagent is simple, convenient, rapid and easy to be applicated in basic unit. 相似文献
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被动血凝试验测定伤寒Vi抗体 总被引:4,自引:0,他引:4
作者从拘橼酸杆菌中提取纯化获得其Vi多糖抗原,该抗原具有伤寒沙门氏菌Vi抗原的免疫学特性,而不含伤寒沙门氏菌0,H抗原,用其致敏新鲜羊血球作被动血凝试验,特异性敏感性均很好。所需Vi抗原致敏浓度极低,仅为0.05ug/ml。使用新鲜羊血球凝模式较好,便于观察结果,采用被动血凝试验检测106名健康中学生肌肉注射30ug伤寒Vi多糖菌苗前后Vi抗体的变化情况,发现免疫后血清抗体的四倍增长率达89%,表明伤寒Vi多糖苗具有良好的免疫原性。 相似文献
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作者对国产伤寒Vi多糖菌苗和法国Merieux产伤寒Vi多糖菌苗人体接种反应及血清抗体应答情况进行比较,接种后6~8小时法国菌苗的体温反应同国产菌苗相比有显著性差异(x2=5.347,0.25>P>0.01),24小时后反应消失,免后一月国产菌苗和法国菌苗Vi抗体四倍增长率分别为91.80%和89.6%(x2=0.164,P>0.05),GMT分别为36.94和35.49(t=0.653,P>0.05),二者均无显著性差异。 相似文献
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伤寒─鼠伤寒重组株Vi4072所产生Vi抗原以伤寒Ty2株所产Vi抗原作对照,通过ED50测定和小白鼠被动保护试验作了比较,结果表明Vi4072株Vi抗原的半数有效剂量为0.0136μg,Ty2株的半数有效剂量为0.0183μg,说明Vi4072─Vi对小白鼠的保护作用不低于Ty2─Vi。被动保护试验证明,在同等条件下,两种Vi抗原的免疫血清对小白鼠提供的保护作用相同。 相似文献
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伤寒─鼠伤寒重组株Vi4072所产生Vi抗原以伤寒Ty2株所产Vi抗原作对照,通过ED50测定和小白鼠被动保护试验作了比较,结果表明Vi4072株Vi抗原的半数有效剂量为0.0136μg,Ty2株的半数有效剂量为0.0183μg,说明Vi4072─Vi对小白鼠的保护作用不低于Ty2─Vi。被动保护试验证明,在同等条件下,两种Vi抗原的免疫血清对小白鼠提供的保护作用相同。 相似文献
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以伤寒─鼠伤寒双价重组株Vi4072的3×108CFU一次口服感染BALB/C小鼠,4天后即可从小鼠的集合淋巴结、肝、脾中分离到该菌,49天后该菌始被小鼠机体彻底清除。血清和小肠匀浆液中Vi抗体检测结果证明Vi4072菌株有刺激特异性免疫应答的功能。血清、小肠匀浆液中Vi抗体明显升高。 相似文献
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为了研制百日咳抗体酶联检测试剂盒以调查吉林省2~8岁儿童百日咳、白喉及破伤风抗体水平。采用百日咳菌液经硫酸铵盐析、PBS溶液浸提及蔗糖密度梯度离心提取的PT和FHA作为包被抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗人IgG,作为抗体制备ELISA试剂盒。并经敏感性、特异性、重复性试验考查该试剂盒质量。结果显示,试剂盒敏感性可达0.0036 IU/m l;重复性较好,CV<4%。试剂盒置于37℃3d敏感性无明显变化。吉林省2~8岁儿童白喉、破伤风的抗体水平较高,百日咳的抗体水平相对较低。此方法制备的百日咳抗体酶联检测试剂盒的质量符合要求,可应用于临床检验与流行病学监测。 相似文献
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金黄色葡萄球菌滤液制剂中肠毒素的检测研究 总被引:3,自引:2,他引:3
使用反向被动血凝试验(RPHA),对金黄色葡萄球菌滤液制剂中的肠毒素(SET)进行了检测研究.证明已生产和临床应用近10 a的金黄色葡萄球菌滤液制剂中检测到SET存在.其型别系属SET中的C型.按原生产工艺所生产的金黄色葡萄球菌滤液制剂原液中SET的含量在12.5~50 mg/L.生产时欲提高SET含量的条件试验中证实,使用葡萄球菌产毒的胰酪胨综合培养基,以摇瓶方式培养24~36 h,可使SET含量比用生产培养基培养提高16倍.金黄色萄萄球菌滤液制剂中SET的成分是极其稳定的,室温存放2 a未见该成分降低.其半衰期可达4 a.在采用RPHA和RPLA检测SET比较试验中证明:RPLA试剂的敏感性高于RPHA的4倍.但对于检测金黄色葡萄球菌滤液制剂中SET的实际含量几乎是相等的. 相似文献
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羊抗人IgG的纯化及其在抗—HCV检测中的应用 总被引:3,自引:0,他引:3
单独或联合应用辛酸沉淀、饱和硫酸铵沉淀、阴离子交换等方法对羊抗人IgG进行纯化,对纯化前后抗体的纯度和免疫学活性进行比较,并与辣根过氧化物酶连接,作为二抗用于抗-HCV的ELISA检测。结果表明,不同方法纯化的抗体其纯度和免疫学活性具有一定程度的差别,其中经辛酸+饱和硫酸铵沉淀纯化的抗体为最佳,凝胶扫描纯度为98.05%,比活性近1800,为纯化前的6.8倍。用痞根过氧化物酶标记后,作为酶标二抗检测HCV阴性和阳性标准血清各40份,阴性符合率为97.5%,阳性符合率为95%,可用于抗-HCV的ELISA检测。 相似文献
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【目的】建立一种同时快速检测大肠杆菌O157:H7(E.coli O157:H7)和鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)的可视化抗体阵列技术。【方法】将免疫学技术与蛋白芯片技术相结合,基于双抗体夹心法检测原理利用蛋白质芯片技术的高通量,结合可视化结果判定技术,用一份样品,同步检测大肠杆菌O157:H7和鼠伤寒沙门氏菌两种病原。【结果】检测结果肉眼可见,检测周期短至90 min,纯菌液检测灵敏度达105 CFU/mL,模拟带菌检测灵敏度为106 CFU/mL,与常规的ELISA灵敏度等同且具有良好的特异性和重复性。【结论】该可视化抗体阵列检测结果肉眼可见,检测通量高,无需大型设备,操作简便,检测成本低廉,同时为快速检测致病菌提供一种新途径。 相似文献
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制备一种精确的破伤风抗体定量试剂,用于人源破伤风抗体的定量及人群破伤风抗体水平的测定。以人源破伤风免疫球蛋白国家标准品建立定量反应曲线,经系统优化后建立双抗原夹心法定量检测系统。定量反应曲线显示,抗体浓度在10~120m IU/m l之间,相关系数r=0.9993。精密度(CV)≤7%。实际应用验证,未经(TTC)免疫的献血员中,具有保护性抗体水平(0.01 IU/m l)的比例只占12.2%。经3针(TTC)免疫后,抗体水平均大于0.01 IU/m l,经动物体内中和试验法(NT)定量的3批破伤风免疫球蛋白,用制备的酶联免疫破伤风抗体定量试剂测定,其回收率分别为109%、98%和93%。结论,该试剂可用于破伤风抗体的精确定量。 相似文献
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用戊肝病毒(HEV)基因组编码氨基酸序列1-901-914/2-515-530、3-91-123、2-613-654相应的三段合成多肽为抗原、研制出一种检测抗-HEVIgG的ELISA试剂。以该试剂检测中国、缅甸、印度和前苏联肠道传播非乙型肝炎(ET-NANBH)病人血清105份,仅3份中国病人血清阴性,阳性率为97.1%;检查实验感染HEVL赤猩猩血清,感染前阴性,感染后阳性;检查正常人血清99 相似文献
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用流行性出血热病毒(EHFV)李株和陈株血凝素(HAN)分别免疫Balb/C小鼠,取其脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/O融合,杂交瘤生长孔率为97.5%和60%,阳性率各为2.5%和22%,克隆化培养阳性率达到100%。通过筛选得2株杂交瘤细胞、一株为2B_7、另一株为1H_8。其腹水单克隆抗体(McAb)滴度均达1∶16×10~4—32×10~4。1H_8的血凝抑制滴度达1∶5120。经染色体核型分析,杂交细胞染色体2B_7为80—97条,1H_8为85—105条,每个细胞均含一条中着丝点标记染色体。McAb的Ig类别和IgG亚类检测结果2B_7为IgM,1H_8为IgG_(2b)。两者对19株不同来源的EHFV具有不同的反应,1H_8McAb与19株都具有不同程度的免疫荧光反应,滴度都较高,且对5株不同来源的EHFV-HAN具有血凝抑制活性,滴度在1∶1280—5120,故1H_8为血凝抑制抗体;2B_7只对12株EHFV起反应,对7株不起反应,且没有血凝抑制活性。这说明1H_8与2B_7具有不同的特性。 相似文献
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PPD试验和结核抗体检测在儿童结核感染中的应用价值 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨PPD试验和结核抗体检测在儿童结核感染中的诊断价值。方法选取73例诊断明确的住院儿童结核病患儿,38例非结核患儿的PPD试验和结核抗体结果进行回顾性分析。结果PPD试验阳性率84.9%,结核抗体阳性率27.4%,联合检测的阳性率95.9%。结论PPD试验、结核抗体在诊断儿童结核方面有自己的特异性,联合检测具有较高的临床诊断价值。 相似文献