显示DNA的改良染色在图象分析系统中的应用

在人体和动物组织中的核酸染色技术应用较为深入，通过图象分析系统对ＤＮＡ含量测定，而提供了可靠的依据。为了能够使ＤＮＡ组化染色技术，更好的适应图象分析系统的定量研究需要，因此我们对显示ＤＮＡ的染色方法进行了实验对照研究。选用在室温下的高浓度盐酸对细胞水解充足作用，而得到较好效果。改进了Ｓｃｈｉｆｆ＇Ｓ染色液配制，减少染色时间和程序，结果证明了染色稳定可靠，色彩对比度较强，适用于图象分析系统的应用。     

微波辐射技术在癌细胞DNA染色中的应用

微波辐射技术在癌细胞ＤＮＡ染色中的应用＠胡海霞＠李春光＠谷化平＠苏红￥中国人民解放军第二五一医院病理科微波辐射技术在癌细胞ＤＮＡ染色中的应用胡海霞李春光谷化平苏红（中国人民解放军第二五一医院病理科,张家口０７５０００）癌细胞ＤＮＡ含量测定和倍体分析是近年肿...     

饲喂黄曲霉毒素B_1大鼠肝中AFB_1-DNA加合物的免疫组织化学研究

应用免疫组织化学ＳＰ法对４例饲喂黄曲霉毒素Ｂ１的Ｗｉｓｔａｒ大鼠肝组织中ＡＦＢ１－ＤＮＡ加合物的染色及常规ＨＥ染色发现,４例肝细胞核均出现异型性,但未见肝细胞坏死、增生灶及肝细胞癌;免疫组化揭示部分肝细胞核出现棕黄色、不均质状的ＡＦＢ１－ＤＮＡ加合物,阳性细胞数占１０～８５％。结果提示免疫组织化学方法可作为一种ＡＦＢ１的定位方法,ＡＦＢ１在动物致癌过程中ＡＦＢ１－ＤＮＡ加合物可能具有启动作用     

显示DNA染色技术对角膜上皮性肿瘤病理诊断中的应用

显示ＤＮＡ染色技术对角膜上皮性肿瘤病理诊断中的应用邢惠清,丁华野,田玉旺,郭山春,李颖（北京军区总医院病理科）应用Ｆｅｕｌｇｅｎ微波仪特染技术,对５１例角结膜上应性肿瘤细胞核内ＤＮＡ显示并应用真彩色图像对ＤＮＡ含量分析。临床病理可作为辅助诊断,并可从...     

介绍一种简便而灵敏的DNA染色法

介绍一种简便而灵敏的ＤＮＡ染色法过去在光学水平对ＤＮＡ进行特异性染色大多用孚尔根（Ｆｅｕｌｇｅｎ）染色法,此法特异性高,染色后颜色鲜艳,但染色程序繁杂,而且难以对微量ＤＮＡ进行精确定位。如线粒体、质体的ＤＮＡ。在此介绍一种近年才发展起来的能精确定位微...     

用做标记的两种酵母菌完整染色体DNA的简化制备法

已知分子量在小的染色体ＤＮＡ分子标记是脉冲电泳研究中用以估算样本染色ＤＮＡ分子大小必不可和的参照物。对用做标记的啤酒酵母和粟酒裂殖酵母完整染色体ＤＮＡ几种制备方法的比较研究以及改进研究表明,液氮冷冻研磨法,凝胶包埋法以及凝胶包埋破壁法效果均很好,都得到大量染色体ＤＮＡ,且彼此此间无明显差异。     

用DNA酶切小分子片段在非洲爪蟾卵中提取物中实现非细胞体系核装配

用质粒ｐＢＲ３２２的ＤＮＡ酶切片段,长度分别为７５０,３７５和１８６ｂｐ作为外源ＤＮＡ在非洲爪蟾卵撮以物中实现了非细胞体系的核装配。将分离纯化得到的ｐＢＲ３２２ＤＮＡ酶切后经低熔点琼脂糖回收ＤＮＡ片段,长度为７５０,３７５和１８６ｂｐ,分别加入到爪蟾卵提取物再生系统中温育,经ＤＡＰＩ染色,孚尔根染色及电子显微镜观察发现能装配量的重建核。     

分子生物学技术在结核诊断和流行病学研究中的应用

结核是当今世界范围内致残和致死的几个主要传染病之一,每年会导致３００多万人死亡。诊断基础为罗琼氏培养基或选择性培养基培养,金胺Ｏ染色,萋纳氏染色,镜检,需２～８周。这就迫切要求分子生物学技术在结核快速诊断中的应用。本文综述了ＤＮＡ杂交、ＤＮＡ指纹图、脉冲场凝胶电泳和ＰＣＲ在结核诊断和流行病学研究中的应用,同时,评述了用分子生物学技术检查结核耐药基因的适用性     

洋葱细胞核仁内ＤＮＡ的结构变化及排布过程

以洋葱（Allium cepa L.)细胞为研究材料,应用ＤＮＡ细胞化学特异染色方法（ＮＡＭＡ－Ｕr)及常规电子显微镜技术,观察了洋葱细胞核仁ＦＣ（纤维中心）内ＤＮＡ的超微结构,发现ＦＣ内ＤＮＡ存在着一个介于集缩到解集缩之间的变化过程,并揭示了ＤＮＡ在核仁内的连续排布过程,邓核仁外ＤＮＡ经过核仁通道进入到ＦＣ后,继续沿ＦＣ的边缘或ＤＦＣ（致密纤维成分）与ＦＣ的交界处环绕ＦＣ而排布,再经ＦＣ之间的核仁通道,延伸到另外的ＦＣ区域。     

用DNA酶切小分子片段在非洲爪蟾卵提取物中实现非细胞体系核装配

用质粒ｐＢＲ３２２的ＤＮＡ酶切片段,长度分别为７５０、３７５和１８６ｂｐ作为外源ＤＮＡ在非洲爪蟾 卵提取物中实现了非细胞体系的核装配（核重建）。将分离纯化得到的 ＰＢＲ３２２ ＤＮＡ酶切后经低熔 点琼脂糖回收ＤＮＡ片段,长度为７５０、３７５和１８６ｂｐ,分别加入到爪蟾卵提取物再生系统中温育, 经ＤＡＰＩ染色、孚尔根染色及电子显微镜观察发现能装配大量的重建核。显微分光光度法研究表 明,ＤＮＡ片段在诱导形成重建核的过程中发生了明显的凝集－会凝集变化。α－３２Ｐ－ｄＣＴＰ掺入重建核 的液闪计数结果表明,ＤＮＡ酶切小分子片段诱导形成的重建核具有较高的ＤＮＡ复制活性,而且复 制活性在一定范围内与加入的ＤＮＡ片段长度呈正相关。实验结果表明,非细胞体系中诱导的核重 建不仅与外源ＤＮＡ的种类无关,与外源ＤＮＡ的长度也没有关系。     

原位核酸杂交检测宫颈癌中金黄色葡萄球菌L型DNA

应用病原微生物培养、改良革兰氏染色、免疫组化染色及原位核酸杂交等方法,对５０例宫颈癌和３３例慢性宫颈炎进行了研究。结果发现宫颈癌病原微生物培养细菌及其Ｌ型阳性感染率为５８％（２９／５０例）,以金黄色葡萄球菌（金葡菌）及其Ｌ型多见（１３／２９例）;宫颈癌和慢性宫颈炎组织切片革兰氏染色,细菌Ｌ型检出率分别为６６％和４５．５％;免疫组化染色（ＡＢＣ法）金葡菌Ｌ型抗原阳性率各为６８％和４８．５％。Ｌ型主要分布于癌间质、癌巢及宫颈上皮下结缔组织内。１２例宫颈癌金葡菌Ｌ型ＤＮＡ探针原位杂交显示,１０／１２例癌细胞核内有金葡菌Ｌ型ＤＮＡ杂交阳性信号,表明金葡菌Ｌ型ＤＮＡ已进入宫颈癌细胞内,可能会在基因水平上影响宫颈上皮恶变,提示宫颈癌发生与金葡菌Ｌ型感染关系密切,值得进一步研究。     

DNA指纹技术

在法医鉴定中 ,ＤＮＡ指纹技术主要包括 3个步骤。从犯罪点收集生物学证据如头发 ,血迹等 ;分析这些线索的ＤＮＡ序列 ;将从犯罪嫌疑人处取来的样本与这些线索进行比较。如果两者相配 ,就可以断定嫌疑人在案发现场。因为在染色体中碱基对很多 ,从细胞提取的ＤＮＡ链要用一定的酶在限制位点酶解成小的片段 ,这也会使双链结构破坏。得到的不同大小ＤＮＡ片段然后用凝胶电泳分离 ,在此过程中 ,给加有ＤＮＡ的凝胶加上外部电场 ,则ＤＮＡ发生移动 ,不同ＤＮＡ片段移动的距离决定于ＤＮＡ片段的大小。凝胶用溴化乙啶染色 ,切下分离各种ＤＮＡ片段…     

分子间三链DNA的应用

自Ｄｅｒｖａｎ等１９８７年首先证实三链ＤＮＡ的形成可介导对靶ＤＮＡ的特异切割以来,有关三链ＤＮＡ的研究进展和奶快。本综述了近几年分子间三链ＤＮＡ在基因表达调控、染色体作图、基因分离及定点诱变等方面的应用,并对三链ＤＮＡ应用中存在的几个问题及相应的解决方法作了简单介绍。     

应用反义技术研究DNA聚合酶ε在HeLa细胞DNA复制中的功能

我们应用以义技术,结合Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ导入和ＧＰＴ筛选方法,研究了ＤＮＡ聚合酶ε在ＨｅＬａ细胞ＤＮＡ复制过程中的功能,针对ＤＮＡ聚合酶ε和α的反义寡核苷酸都能够专一地抑制ＨｅＬａ细胞的ＤＮＡ合成。首镒直接证明了ＤＮＡ聚合酶ε在哺乳动物细胞的ＤＮＡ复制过程中具有重要作用。．     

He—Ne激光照射对成纤维细胞内[Ca^2＋]i浓度影响的流式细胞计测定

目的：Ｈｅ－Ｎｅ激光照射治疗的机理不明,激光照射引起细胞内Ｃａ＾２＋水平变化,为治疗机理提供理论依据。方法：Ｈｅ－Ｎｅ激光照射引起鼠成纤维细胞Ｌ９２９内［Ｃａ＾２＋］ｉ的变化,用ＨＯ３４２对细胞ＤＮＡ活性染色,Ｆｌｕｏ－３ＡＭ对细胞内Ｃａ＾２＋染色,利用ＦＣＭ同时定量分析细胞ＤＮＡ和细胞内Ｃａ＾２＋的变化。结果：激光照射１５ｍｉｎ（光剂量１１．８１Ｊ／ｃｍ＾２后,ＦＣＭ分析可见ＤＮＡ分布直方图右移     

显微图象分析仪DNA定量分析中涂片与印片效果比较

显微图象分析仪ＤＮＡ定量分析中涂片与印片效果比较朱建伟田玉旺＊张庆慧＊＊刘爱茹冉玫（山东省中医药研究所病理科,济南２５００１４＊北京军区总院病理科＊＊山东医科大学病理教研室）用显微图像分析仪进行瘤细胞ＤＮＡ定量分析时,染色效果,背景清晰度,对照细胞的...     

染色体外DNA在酵母细胞衰老中的作用

细胞衰老的影响因素甚多,机制复杂。近年来已发现酵母染色体外ＤＮＡ在细胞衰老中具有重要作用,并认为细胞的衰老受控于一种特定的染色体外ＤＮＡ复制的次数,具有精确的时间控制机制［１、２］。１．染色体外ＤＮＡ与衰老的关系酵母染色体外存在大小不等的ｒＤＮＡ环,称为染色体外ｒＤＮＡ环（ｅｘｔｒａｃｈｒｏｍｏ－ｓｏｍａｌｒＤＮＡｃｉｒｃｌｅ,ＥＲＣ）。已发现衰老的酵母细胞中含有丰富的ＥＲＣ,而年轻酵母细胞中的ＥＲＣ则很少。芽殖酵母中含有人类Ｗｅｒｎｅｒ氏综合征（一种早老症）ＷＲＮ基因的同源序列——ＳＧＳ１基因…     

应用分子原位杂交技术解析小麦-天兰冰草部分双二倍体──远中2号的染色体构成

为分析普通小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ）－天兰冰草（Ａｇｒｏｐｙｒｏｎｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｍ）部分双二倍体──远中２号（２ｎ＝５４）的染色体构成,用生物素（ｂｉｏｔｉｎ－１６－ｄＵＴＰ）标记天兰冰草染色体组ＤＮＡ作为探针,以普通小麦品种中国春染色体组ＤＮＡ为封闭ＤＮＡ（ｂｌｏｃｋｉｎｇＤＮＡ）,与远中２号的有丝分裂中期染色体ＤＮＡ进行了分子原位杂交。证明远中２号除具有普通小麦的２１对染色体外,附加了１对小麦－天兰冰草易位染色体（即天兰冰草染色体片段易位到小麦染色体的两臂端部）、５对天兰冰草染色体。说明小麦－天兰冰草部分双二倍体在形成过程中染色体行为是比较复杂的,不仅可能产生小麦－天兰冰草染色体间易位,而且小麦染色体也可能与天兰冰草染色体的３种染色休组染色体共同参与组建新的染色体组附加到小麦中去。     

应用分子原位杂交技术解析小麦—天兰冰草部分双二倍体——远中2号的…

为分析普通小麦－天兰冰草部分双二倍体－远中２号的染色体构成,用生物素标记天兰冰草染色体组ＤＮＡ俄为探针,,以普通小麦品种中国春染色体组ＤＮＡ为封闭ＤＮＡ,与远中２号的有丝分裂中期染色体ＤＮＡ进行了分子原位杂是明远中２号除具有普通小麦的２１对染色体外,附加了１对小麦－地冰草易位染色体（妈卫兰冰草染色体片段易位到小麦染色体的两臂端部）,５对天兰冰草染色体。说明小麦－天兰冰草部分双二倍体在形成过程中当构     

几种念珠菌DNA总含量的流式细胞分析

应用流式细胞术（ＦＣＭ）对处于稳定生长阶段的念珠菌属的７种８株念珠菌进行了ＤＮＡ总含量的流式细胞（ＦＣＭ）分析。这８株珠菌是：白念珠菌２株，热带念珠菌，克柔念珠菌，近平滑念珠菌，乳酒念珠菌，白念珠菌星形变种，即血清Ｂ型白念珠菌，季也蒙念珠菌各一株。应用ＥＢ一步插入法染色，用鸡红细胞（ＣＲＢＣ）作为内参标准进行ＤＮＡ总含量测定。分析结果表明：稳定生长阶段的组方图上，大多数念珠菌细胞处于ＤＮＡ合成周期