胃蛋白酶C基因在大鼠胃底腺发育过程中上皮细胞内的表达(英文)

胃蛋白酶原是胃蛋白酶的前体 ,是脊椎动物中普遍存在的非特异性蛋白消化酶 ,胃蛋白酶的生物学特性及分子特性已得到了充分研究。虽然有许多关于胃蛋白酶产生细胞的研究报告 ,但胃蛋白酶原基因在这些细胞的表达却知之甚少。本研究采用地高辛标记的RNA探针 ,用原位杂交的方法研究了大鼠胃底腺中胃蛋白酶产生细胞的个体发育。研究发现 ,大鼠胃腺在胚胎 1 8.5天开始出现 ,但没有形态分化 ;胃蛋白酶的mRNA在出生后 3.5天首次被原位杂交法检出。胃蛋白酶产生细胞在出生后 8周发育成熟 ,胃蛋白酶的mRNA表达在主细胞和颈粘液细胞内 ,其发育可分为 4个阶段 :( 1 )胚胎 1 8.5天至出生后 0 .5天 ;( 2 )出生后 3.5天至 2周 ;( 3)出生后 3周至 4周 ;( 4 )出生后 8周。在胃底腺发育过程中 ,胃蛋白酶mRNA的表达只局限于某种特定的细胞 ,这些细胞的分布具有明确的阶段特异性。因此 ,我们认为胃蛋白酶C可作为胃上皮细胞分化的分子标志。     

N-乙酰氨基葡萄糖残基在发育鼠胃底腺颈粘液细胞中的表达

目的 通过大鼠在不同发育阶段中胃底腺细胞表达α-N-乙酰氨基葡萄糖（GluNAc)残基的情况,来研究大鼠胃底腺颈粘液细胞的发生。方法 利用单克隆抗体HIK1083能特异性识别α-GluNA残基的特点,进行免疫组化研究。结果 HIK1083阳性细胞从第19.5天胚胎鼠的胃底腺中开始辨认出来,一直存在至成鼠,这些细胞最初出现在胃底腺的底部,然后向上方移动,最后位于腺体的颈部。结论 胚胎晚期开始表达α-GluNAc残基的细胞可能是原始的颈粘液细胞,随着鼠胃底腺的发育。这些细胞逐渐向上方移动,最终成为颈粘液细胞。     

大鼠生后发育过程中胃肠胰生长抑素基因的表达

本实验采用地高辛精标记ｃＲＮＡ探针原位杂交技术和ＡＢＣ免疫组织化学方法,研究了大鼠生后发育过程中胃肠胰组织生长抑素（ＳＳ）基因的表达。结果显示,大鼠生后发育过程中,胃腺ＳＳ杂交阳性细胞及ＳＳ－ＩＲ细胞的密度（细胞数／ｍｍ粘膜肌长）均随天龄增长而增大,至第１５天前后达高峰,随后开始下降,至成年时,与出生时水平接近;十二指肠则在生后初期细胞密度较高,５天以后开始降低,第２０天后降至成年水平。胰腺的ＳＳ杂交阳性细胞及ＳＳ－ＩＲ细胞密度（细胞数／ｍｍ２）变化规律与胃腺相似,随天龄增大,至第１０天前后达高峰,第２０天左右降至成年水平,与出生水平接近。研究结果表明,胃肠胰组织ＳＳ基因表达与胃肠胰的生长发育具有一定的相关性。     

人正常腺上皮组织中MUC6基因的表达

应用免疫组织化学和原位杂交方法检测人正常腺上皮中MUC6基因的表达。揭示MUC6基因在正常人腺上皮组织中的分布异质性及其特点,结果显示：MUC6基因编码的核心蛋白及其mRNA主要分布于正常胃粘膜胃腺的基底部,上皮细胞无MUC6基因表达。呈细颗粒状,位于细胞核周,胃底,胃窦的表达无区别;十二指肠绒毛上皮内的表达呈弥漫性,均质状,杯状和柱状细胞的表达类似,杯状细胞的粘液滴内未测得MUC6基因产物;空肠,结肠组织中无MUC6基因的表达;胆囊上皮组织内有强阳性MUC6核心蛋白的表达。而宫颈上皮中表达较弱,实验提示;MUC6基因的表达存在异质性及器官特异性。     

人胃癌细胞一种高表达基因的克隆及序列测定

采用DDRT-PCR法,以人胃上皮细胞GES-1为对照,从人胃癌细胞SGC-7901中克隆高表达基因,并对所克隆的基因进行斑点杂交分析, 序列测定,序列相似性分析及开放读框分析.斑点杂交分析结果表明所获克隆YA61为人胃癌细胞SGC-7901中高表达基因.序列相似性分析结果表明该基因序列为一新基因序列.GenBank收录号为AF220415.开放读框分析结果表明该基因序列有一完全开放读框.     

植物发育过程中特异性基因的表达

从基因的细胞、组织、器官特异性表达和特写发育阶段的时间表达等几个方面介绍植物发育过程中特异基因表达的研究进展。     

烟草花发育基因Nfbp6在花粉和胚珠形成过程中的特异表达

Nfbp6是从烟草中克隆的一种调节花发育的基因 ,与已知的C类基因有很高的同源性 .应用RNA原位杂交技术 ,对其在烟草花发育的各个阶段的表达进行了研究 .结果表明Nfbp6在花器官原基的早期分化、形成过程中有一定表达 .在后期花芽发育过程中 ,Nfbp6的转录加强 ,尤其在花粉和胚珠发育过程中表达强烈 .同时 ,Nfbp6在花柱引导组织和花药裂缝细胞、早期环式细胞簇中也有一定表达     

MYB基因在玉米雌穗发育中差异表达的研究

目的:研究MYB基因在玉米雌穗不同发育阶段的表达情况,为探讨其生物学功能提供相关线索。方法:用芯片杂交的方法检测玉米雌穗早期发育过程中差异表达的MYB基因,定量PCR验证差异基因的表达情况,原位杂交分析差异基因的组织器官表达。结果:一个MYB基因在雌穗发育到小花分化期时上调表达(芯片分析其表达差异倍数为1.8)。其表达的差异性得到了定量PCR的验证(定量PCR分析其差异表达倍数为4.3)。原位杂交分析发现该基因主要表达于小穗的生长锥顶部和小花雌雄蕊原基部位。结论:MYB基因对玉米雌穗早期发育起到一定作用。     

nov基因的表达与脑的种系发育分化平行相关

用地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学方法研究了鲢、鸡、牛、犬和猫脑肾母细胞瘤过度表达是基因阳性神经元的比较发育。结果显示,低等脊椎动物鲢脑仅有少量nov mRNA阳性神经元,分布于延髓的迷走神经背核、三叉神经背核、丘脑前核、丘脑后核、下丘脑背侧核、下丘脑外侧核。鸡脑阳性神经元除广泛分布于脑干外,小脑、丘脑的多数核闭、下丘脑的背侧核、腹侧核和后核以及大脑纹状体等多数脑区也有一定分布。哺乳动物牛、犬和猛脑中nov mRNA阳性神经元广泛分布,在脑干、小脑、间脑和大脑都检测到强烈阳性信号。以上结果表明,在众低等脊椎动物到高等脊椎动物的进化过程中nov基因的表达也从低级中枢向高级中枢扩展,提示该基因的表达与脑的种系发育、脑功能的分化平行相关。     

神经肽受体Y5亚型在大鼠胃的表达

应用RT—PCR、Western印迹和免疫组化技术研究神经肽受体亚型Y5在正常大鼠和胃轻瘫大鼠胃的表达,并进行组织学定位。发现Y5受体在大鼠胃存在着表达,主要表达定位在胃窦的黏膜层,可能与胃动力的调控有关。半定量分析显示胃轻瘫大鼠较正常大鼠表达水平下调。     

心脏形成关键基因-TBX5在大鼠胚胎心脏中的克隆及表达研究

为了研究心脏形成关键基因-TBX5的表达情况,选择Wistar大鼠作为从分子水平研究心脏发育的实验动物并从胎鼠心脏中克隆了TBX5cDNA全长（GenBank登录号：AY859491）,其cDNA及氨基酸序列不同于GenBank预测序列;随后应用RT-PCR及Northem blot分析TBX5基因在大鼠各组织中的表达情况,发现TBX5为单一转录本,在大鼠各组织均有表达,心脏中表达最强;构建荧光表达载体,转染大鼠肝癌细胞,观察TBX5亚细胞定位,结果证实TBX5基因在细胞核中表达;最后构建原核表达载体,IPTG诱导表达获得了GST-TBX5融合蛋白。以上工作为进一步鉴定心脏发育中TBX5相关转录因子及研究相互间的调控机制奠定了基础。     

半乳糖配体介导大鼠白介素10基因在大鼠肝脏内的靶向表达

目的 探讨大鼠白介素10（rIL-10）基因是否可通过半乳糖配体介导的脂质体转染法在大鼠肝脏内靶向表达。方法将已构建好的rIL-10基因真核表达质粒与半乳糖配体转染试剂按jetPEI．Gal／DNA（N／P=10）比例混合,通过尾静脉注射转移至大鼠体内。RT—PCR法和ELISA法检测rIL-10基因转移至体内0h、24h、7d和16d后大鼠肝、肾、脾和肺组织及血清中rIL-10的表达情况。结果rIL-10基因转移前大鼠肝、肾、脾和肺组织末扩增出明显rIL-10mRNA表达,转移7d后rIL-10表达主要分布在肝组织。肝组织中rIL-10mRNA表达在基因转移24h和7d时显著升高。血清中的rIL-10浓度在转移后24h和7d浓度分别为（107．92±12．26）pg／ml和（33．2±13．15）pg／ml。结论rIL-10基因通过半乳糖配体介导的脂质体转染法可有效的转移至大鼠体内,并可在肝脏靶向表达一周左右时间。     

C-fos基因在大鼠缺血视网膜内的表达

实验用FOS免疫组化方法（ABC法）研究了缺血诱导的大鼠视网膜内c-fos原癌基因的表达情况。实验动物用升高眼压的方法做成视网膜缺血模型,依缺血后存活时间不同分15′、30′、1h、2h、4h、6h、12h七个组,每只大鼠右眼为缺血眼,左眼做自身对照眼,另设正常对照组。动物腹腔麻醉,4％多聚甲醛灌注固定,取双眼冰冻切片,片厚15μm。实验结果显示缺血后15′组大鼠视网膜内核层最先出现少量卵圆型浅棕色的FOS阳性神经元胞核,30分钟至1h FOS表达逐渐增强,节细胞层也出现FOS阳性胞核。缺血后2h FOS表达达最高峰,缺血后4h FOS阳性胞核逐渐减少,12h达正常组水平、自身对照眼及正常对照眼网膜节细胞层偶见FOS阳性胞核。     

在丝瓜和黄瓜发育过程中肌动蛋白基因的表达

对肌动蛋白基因在丝瓜（Ｌｕｆｆａ ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａ Ｌ．）和黄瓜（Ｃｕｃｕｍ ｉｓ ｓａｔｉｖｕｍ Ｌ．）各器官的表达进行了研究．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ和Ｄｏｔｂｌｏｔ结果表明,肌动蛋白基因在丝瓜和黄瓜中表现出器官特异性表达． 首先,肌动蛋白基因在丝瓜幼苗发育过程中表现明显的发育阶段特异性． ３０ ｄ 苗茎的ｍ ＲＮＡ 水平为８ ｄ 苗的根、子叶和１５ ｄ 苗的根、下胚轴的４～６ 倍, 同时为开花植株茎和叶片的ｍ ＲＮＡ 水平的１０～１２ 倍． 其次,肌动蛋白基因在黄瓜中表现器官特异性表达,它们倾向于在黄瓜幼嫩果实中（开花后１５ ｄ）特异表达     

动物发育过程中热休克基因的表达

本文综述了动物发育过程中热休克基因的表达及热休克蛋白质的合成与生物耐热性的相互关系。动物发育过程中热休克基因的表达具有阶段依赖性。热休克蛋白质的合成与生物耐热性的获得呈正相关。     

FMR－1同源基因在大鼠脑发育过程中持续表达

以克隆的人FMR-1 cDNA片段为探针,进行RNA印迹杂交,检测发育过程中大鼠脑组织FMR-1同源基因的表达.结果显示从胚胎早期至出生后一个月该基因有持续表达,其中在胚胎发育晚期表达量较高,提示FMR-1基因可能参与胎脑发育的调节.     

小鼠早期胚胎发育过程中TGF-α和EGF-R mRNA的表达

This study was conducted to examine the activity of TGF α and EGF R mRNA using the RT PCR technique in the early embryonic development of the mouse. Expression of TGF α mRNA was initially observed in the 8 cell stage embryo of the mouse. The level of expression gradually increased in the morula and blastula. Expression of EGF R mRNA was initially observed in the 4 cell stage embryo of the mouse and 8 cell stage embryo;morula and blastula all expressed EGF R mRNA and the levels of expression had not changed. These results confirm that epidermal growth factors play a key role in early embryonic development of the mouse, especially TGF α which can stimulate and regulate embryonic development via the autocrine system.     

鸡发育过程肌组织核提抽物结合活性与AChRγ亚基基因持续表达的关系

烟碱样乙酰胆碱受体 ( n ACh R)是由 4种亚基组成的五聚体 .哺乳类动物出生后γ亚基由ε亚基取代 ,迄今为止鸡 n ACh Rγ基因是否存在上述置换规律尚无定论 .为探索发育过程鸡骨骼肌n ACh R基因表达是否存在γ/ε亚基的置换及其机制 ,采用 RT- PCR技术和凝胶阻滞试验检测了鸡胚发育 9d至出生后 6周小鸡 γ基因表达的动力学及骨骼肌核抽提物的 DNA结合活性 .RT-PCR检测结果显示 ,在鸡胚发育 9d至出生后 6周的雏鸡骨骼肌组织均检出有 γ亚基 m RNA转录 .提示与哺乳类不同 ,出生前后鸡骨骼肌组织 ACh Rγ亚基基因持续表达 ,不存在 γ/ε亚基的置换表达规律 .以 γ基因 - 2 60 /- 2 4 0 (含 E盒与 M- CAT盒重叠序列 )和 - 2 39/- 50 (含 M- CAT盒及 GC富含区 )片段为探针 ,分别与鸡胚发育 9d至出生后 2周小鸡骨骼肌的核抽提物进行凝胶阻滞试验 .在发育各阶段的骨骼肌核抽提物中均有识别 - 2 39/- 50片段的结合活性存在 ,但在出生后 2周小鸡骨骼肌的核抽提物中未检出 - 2 60 /- 2 4 0结合活性 .结果提示 ,在出生后第 1 4d的肌核抽提物中存在的、识别并结合 - 2 39/- 50片段的活性物质与鸡 ACh Rγ基因在出生后持续表达有关 .