日本培育出早熟草莓

茨城县园艺试验场小组利用草莓的愈伤组织培养培育出早熟变异系统.将进行扩大规模的栽培试验,确定其有用性. 园艺试验场资源开发部小组从草莓的代表品种“女峰”的4～6毫米大小的花蕾中取出花药,进行培养,经愈伤组织到不定胚最后形成植株.将获得的花药愈伤组织的草莓27株移植到田间,从各系统采集10株子代,以无病毒化的“女峰”为对照进行促成栽培试验.这项     

用药诱导愈伤选拨育成的早熟草莓

茨城县园艺试验场宣布领先全国的园艺试验场用从花药中诱导的愈伤培养物成功地培育出早熟草莓,3月底申请品种登录。顺利的话,估计1993年5～6月品种登记。据茨城县园艺试验场研究员江面浩说,有几个园艺试验场都在用从花药中诱导的愈伤培养进行育种。但是,达到申请品种登记的该试验场是首家。登记申请品种名称是“安贝尔”,法语意义是“药”。其名称的统称为从枥木县的推奖品种“女峰”     

新登录的草莓品种

日本秋田县于90年9月申请登录了茎尖培养草莓变异株“M16-AR2”的品种.这是秋田县立农业短期大学农学部教授高井隆次等培育的.在寒冷地带栽培的草莓的代表性栽培品种“盛冈16号”属茎尖培养变异株的亲本.“盛冈16号”的重要病害是草莓黑斑病,但新品种能抗此病,而果实、栽培特性都与“盛冈16号”相同,很可能取代盛冈16号.品种名称打算效仿在全国博得好评而在提高秋田县农产品形象上作出贡献的稻米品种“秋田小町”,命名为“秋田浆果”.     

光因子对石刁柏愈伤组织生长过程中蛋白质含量及酶活性变化的影响

在不同的光因子条件下,石刁柏愈伤组织的生长曲线均呈“Ｓ”型。愈伤组织的可溶性蛋白质含量以黄光最高,其次为蓝光、黑暗、白光、绿光、红光。在蓝光、黄光、红光条件上,愈伤组织的非特异性酯酶活性均出现３个峰、而绿光、白光、黑暗条件下则出现２个峰,以第２７天的峰植相比,其峰植的大小顺序为：黄光、蓝光、白光、红光、绿光、黑暗。除红光为２个过氧化物酶活性峰外,其他均为１个活性峰,其峰值的大小顺序是：黄光、蓝光、     

中国木薯栽培种通过器官发生再生植株研究

本文研究了中国木薯栽培种四种外植体通过器官发生再生植株的条件。结果表明:在MS附加0.05mg/L TIBA,1mg/L BA的培养基上“NZ 188”初步的萌发胚状体“切头”后切口处可直接产生丛芽,出芽率为43%。“SC201”胚状体子叶块在MS附加0.5 mg/L NAA,0.5mg/L BA的培养基上可直接出芽,出芽率为42%,在MS附加0.5mg/L IBA,1.5mg/L BA培养基上·出芽率为31%,AgNO_3和ABA单独使用或配合使用均不利于芽的再生。“NZ188”胚状体下胚轴在MS附加0.5mg/LNAA,0.5mg/L BA的培养基上形成的愈伤组织转入MS附加1mg/L NAA,2mg/L BA的培养基上,3周后大多数愈伤组织有绿点出现、仅4.4%外植体分化出芽。“HZ188”无菌苗茎段接种在MS附加0.05mg/L TIBA,2mg/LBA的固体培养基上,2周后形成大量愈伤组织,4周后仅见一块愈伤组织分化出芽。     

草莓愈伤组织的超弱发光及活性氧代谢变化的研究

草莓外植体在不同激素组合的培养基上诱导产生3类愈伤组织。Ⅰ型愈伤组织的生长速率约是Ⅱ型和Ⅲ型的2倍,UBE强度是Ⅱ型和Ⅲ型的1．5倍和1．8倍,但Ⅱ型和Ⅲ型愈伤组织的活性氧代谢水平较强,Ⅲ型中H2O2和O2^--的水平分别是Ⅰ型的9倍和4倍。Ⅲ型愈伤组织的分化培养过程中,UBE强度不断增加,HQ的含量呈现出由弱到强再到弱的变化曲线,O2^--则表现出一直下降的趋势;而可溶性蛋白质含量、SOD及POD也呈现出一定的变化趋势。结果表明：愈伤组织中UBE与活性氧代谢之间无明确相关性,而都与愈伤组织形态建成过程密切相关。     

芝麻愈伤组织诱导与植株再生体系的建立

以芝麻栽培种(Sesamum indicum, 2n=26)、野生种(S. radiatum, 2n=64; S. schinzianum, 2n=64)及其远源杂交后代(S. schinzianum × S. indicum)为材料, 研究了不同基因型、外植体类型、激素种类及其浓度对芝麻愈伤组织诱导及植株再生的影响, 建立了芝麻愈伤组织诱导及高频植株再生的技术体系。结果表明, 6-BA/NAA激素组合有利于绿色紧密型愈伤组织的形成及分化; 最佳愈伤组织诱导及分化培养基为MS+ 0.1 mg·L^–1NAA + 2.0 mg·L^–16-BA+ 30 g·L^–1蔗糖。在该培养条件下, 野生种下胚轴愈伤组织的诱导率最高为97.50%, 分化率为94.02%; 栽培种下胚轴愈伤组织的诱导率最高为40.60%, 分化率为8.16%; 远缘杂交后代幼胚外植体愈伤组织的诱导率最高为46.67%, 分化率为89.29%。该研究结果为芝麻转基因技术体系的建立及新种质创制奠定了基础。     

三七.人参和西洋参细胞悬浮培养的比较研究

用薄层层析对三七、人参和西洋参愈伤组织进行的初步鉴定表明,三种愈伤组织都含有皂甙和主要皂甙成分Rb_1、Rg_1,三七愈伤组织还含有一种抗癌皂甙Rh_1。对愈伤组织的生长,三七低于人参高于西洋参;对愈伤组织中总皂甙含量,三七均高于人参和西洋参。三种植物细胞悬浮培养结果类似于他们的愈伤组织培养,但生长又进一步提高。三七细胞悬浮培养中皂甙产生的时间进程几乎与生长平行,合适的收获期为培养30天。寡糖素不仅增强三七培养细胞的皂甙形成而且促进细胞生长,较合适的浓度为1.25 ppm。通过以上研究,使三七悬浮培养细胞的生长(干重增加178毫克)为最初培养愈伤组织的4倍以上,总皂甙产率高达20.6毫克,为最初培养愈伤组织的8.5倍。     

佛手瓜简化培养基诱导小麦花粉植株的研究

我们研究了佛手瓜简化培养基(表1)诱导小麦花粉植株;以马铃薯简化培养基(简称“薯“)作为诱导愈伤组织的对照培养基和MS 吲哚乙酸0.5毫克/升 激动素2毫克/升(简称MS)作为愈伤组织分化的对照培养基。 愈伤组织的诱导结果是“薯”和“瓜 激素”两种培养基的诱导频率因不同材料而异(表2,表3)。多数的材料是“薯”的诱导频率较高,但这两种培养基诱导的愈伤组织转移至MS分化培养基时,前者分化白苗率较高,后者分化绿苗率较高。值得注意的是“瓜”培养基诱导的愈伤组组频率高于“瓜 激素”(表3)。 愈伤组织的分化是“瓜(分)”对愈伤组织的分化频率仅为MS的二分之一;同时前者比后者分化绿苗率也较低(表4)。然而,“瓜(分) Fe”与MS对愈伤组织的分化频率几乎相等,绿苗分化率前者高于后者(表5)。     

耐盐药蒲公英(Taraxacum officinale Weber)愈伤组织筛选及生理生化特性分析

为获得耐1.5% NaCl的药蒲公英(Taraxacum officinale Weber)愈伤组织, 以药蒲公英叶片外植体为材料诱导愈伤组织。以NaCl为选择因子, 从愈伤组织直接筛选。在选择培养基上, 大部分愈伤组织褐化死亡, 个别褐化死亡的愈伤组织周围有少量新的细胞团长出, 将其转接到新鲜的选择培养基上, 每3周继代一次, 经3个月继代筛选获得了耐1.5% NaCl的药蒲公英细胞团。以普通愈伤组织为对照, 发现随着NaCl浓度升高, 耐盐愈伤组织的相对生长率下降但显著高于对照; 且随着盐胁迫处理时间延长持续升高, 而普通愈伤组织对照几乎停止生长, 说明耐盐愈伤组织具有相对稳定的耐盐性。在蛋白水平上, 耐盐愈伤组织与对照愈伤组织差异明显, SDS-PAGE分析显示: 耐盐愈伤组织比对照多出一条34 kD大小的蛋白带, 且30 kD、18 kD左右的蛋白带明显上调。相同处理条件下耐盐愈伤组织脯氨酸的增加幅度高于对照。盐胁迫条件下, 耐盐愈伤组织的超氧化物歧化酶(Super oxidase dimutase, SOD)、过氧化物酶(Peroxidase, POD)和过氧化氢酶(Catalase, CAT)活性明显高于对照,且随着处理时间的延长和盐浓度的增加呈现升高的趋势, 而对照则呈现先升高后下降的趋势。结果说明耐盐愈伤组织一方面通过小分子有机溶质如脯氨酸的方式调节其渗透平衡, 另一方面还可通过提高抗氧化能力降低盐分造成的次级伤害。积累蛋白也可能是耐盐愈伤组织调节渗透平衡的一种方式。通过生理生化分析确定我们获得的耐盐愈伤组织为耐盐变异体。     

培养条件对三七愈伤组织生长和皂苷积累的影响

以MS为基础培养基,改变激素配比、氮源和光照等因素,以分光光度法和HPLC法分析三七愈伤组织培养过程中皂苷含量的变化。结果表明:培养条件对三七愈伤组织中皂苷积累有一定影响,激素配比对愈伤组织中皂苷含量的影响最大,在0.5 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA组合下,培养物中总皂苷含量最多,达到4.72%±0.29%;在总氮量为60 mmol·L-1条件下,45 mmol·L-1KNO3+7.5 mmol·L-1NH4NO3(NO3-/NH4+=7∶1)时,愈伤组织皂苷含量最多,达到4.71%±0.17%;分别在1 000 lx和500 lx光强下每天光照12 h的愈伤组织,皂苷含量均低于黑暗培养的愈伤组织,三者皂苷含量分别为1.94%±0.31%、2.38%±0.12%和3.57%±0.27%,光照引起愈伤组织表面变绿及细胞分化,可能是抑制愈伤组织中皂苷合成与积累的主要原因;HPLC检测发现,三七愈伤组织和根中均含有Rg1、Re、Rb1及Rd四种皂苷,但栽培三七根含有R1皂苷,而三七愈伤组织中未检测到R1,其原因需要进一步研究。该研究结果为未来愈伤组织培养成为部分代替人工栽培生产三七天然产物的潜在途径提供了研究基础。     

苜蓿盐适应愈伤组织中蛋白质性质和组分的变化

通过一步筛选获得1.0％NaCl适应愈伤组织。在盐适应愈伤组织中水溶性蛋白和稀碱提取蛋白含量增加,而脂溶性蛋白含量没有明显变化。盐适应愈伤组织水溶性蛋白热稳定性下降;总蛋白抗脱水能力增强。盐适应愈伤组织水溶性蛋白在K~ 存在时,262nm吸收峰增高。盐适应愈伤组织蛋白氨基酸组成发生变化,其中最为明显的是Tyr摩尔百分数增加。Lys摩尔百分数减少。 盐适应愈伤组织中24kD蛋白含量明显增加。应用IEF-,NEPHGE-和native-PAGE-SDS-PAGE三种双向电泳方法同时证明在盐适应愈伤组织蛋白组分与非适应愈伤组织有明显差别。     

甘蔗原生质体的植株再生

从甘蔗（Ｓａｃｃｈａｒｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｒｕｍ Ｌ．）嫩叶外植体诱导愈伤组织,经继代培养后,挑选胚性愈伤组织,转入ＭＳ３ 液体培养基,进行悬浮培养。当培养物分离出小粒状的细胞团,细胞变得小而圆时,用于分离原生质体。原生质体以琼脂糖固化的培养方式培养于ＭＲＰ１ 培养基中。由原生质体再生的愈伤组织有两种类型。挑选粒状、坚实的再生愈伤组织转移到Ｎ６ 分化培养基上,“新台糖１ 号”再生的愈伤组织,在含有ＫＴ ０．５ ｍ ｇ／Ｌ的培养基中,分化出绿芽并长成完整的植株。而“粤糖５７－４２３”和“ＵＳ６６－５６－９”再生的愈伤组织,在加有０．１％ 的活性炭的培养基中,前者分化出白化苗,后者分化出根     

体外培养和遗传育种

将lcm长的蒺藜草Cenchrus ciliariscv.75花序切段培养在补加有2,4-D(lmg / 1), 3-IAA(Smg / 1)和激动素(o.5mg / 1)的MS培养基上.然后置于25℃,- 16小时光周期下培养.4-6天后开始发生愈伤组织,21天后获得了良好增殖的愈伤组织.通常每隔一周在同样培养基上进行一次继代培养.经12-- 14周生长     

红颜草莓叶盘再生及遗传转化体系的优化

草莓离体组织再生和遗传转化体系的研究对草莓分子育种至关重要。为了优化农杆菌介导草莓品种红颜(Fragaria×ananassa Duch.Benihoppe)的遗传转化体系,本研究以红颜草莓组培苗的离体叶盘作为试验材料,首先确定了其离体再生的最佳条件,对影响转化效率的因素进行优化,获得了稳定高效的再生及转化体系。结果表明,红颜草莓离体叶盘最佳暗培养时间为9 d,最佳愈伤诱导培养基为MS+TDZ(2. 0 mg/L)+IBA(0. 1 mg/L)+2,4-D(0. 1 mg/L),最佳愈伤分化培养基为MS+6-BA(0. 5 mg/L)+NAA(0. 1 mg/L),转化体系的最佳组合为预培养2 d、添加300μmol/L的AS、以OD600nm=0. 6的EHA105型的农杆菌浸染5 min、共培养5 d。经优化后的红颜草莓叶盘再生及遗传转化体系对该品种的进一步优化和选育有重要意义。     

新奇水果“菠萝莓”

据媒体报道,一种外形似草莓,味道尝起来却和菠萝相似的新品种水果即将开始在英国销售。 这个新品种的水果被称为“菠萝莓”。它的外形与草莓十分相似,只不过果肉是奶白色的,表面分布着均匀的小红粒,与一般的草莓颜色恰好相反。     

枸杞耐盐变异体的筛选及植株再生

枸杞(Lycium barbarum)种子消毒后接种于无激素的 MS 培养基上,二周后取无菌苗下胚轴于诱导培养基(MS 2,4-D0.25mg/L LH500mg/L)产生愈伤组织。挑取黄绿色具颗粒状结构的愈伤组织继代,从而获得均一的胚性愈伤组织。经0.34%的 EMS(半致死剂量)处理后的胚性愈伤组织恢复增殖二周后,将存活的组织转接到含有1.5%NaCl 的诱导培养基中培养4周,再将少数存活下来的组织转接到含1.0%Nacl 的同样培养基中继续培养,每3周转移一次,共继代4次。经不断选择,选出了耐1.0%NaCl 的愈伤组织变异体。后者经多次继     

三井和三好两公司生产罐培养的百合

以罐培养的苗和球根生产为先导,追求“工业化农业”的三井石油化学公司与生产组织培养苗的三好这个大公司合作开始无病毒的百合球根产业化.首先三井石油化学公司用罐培养技术繁殖由三好公司独自开发的胚,培养新品种粉色铁炮百合“??”,由三好公司向农家销售.另外,三井石油化学公司计划与德岛县坂野郡的高志农协共同进行百合新品种的栽培试验.除了球根的生产,该公司还瞄准了(委托栽培试验)插花的事业化.已将罐培养的铁炮百合委托给高志农协生产,1989年底作为插花材料运往市场.     

Ti质粒对甘薯叶片和愈伤组织的转化

以甘薯(Ipomea batatas)叶片和愈伤组织为材料,分别与根癌农杆菌(Agrobateriuum famefaciens)T_(37)和B_6S_3菌株共培养。然后在MS_0培养基上(含唑啉头孢菌素钠250 mg/L,羧苄青霉素150 mg/L,氨苄青霉素150 mg/L)进行培养,实验结果如下:1.经根癌农杆菌感染后的甘薯叶片和愈伤组织,2～3周后长出新的愈伤组织(表1),而未经处理的则逐渐死亡。两株根癌农杆菌对愈伤组织的转化率明显高于叶片。2.感染后在MS_0培养基上形成的愈伤组     

水稻愈伤组织形态发生中的MADS盒基因的差异表达

采用MADS(MCM1-Agamous-Deficiens-SRF)盒基因家族功能区保守序列PCR引物,将水稻(Oryzasativa L.ssp indica)“珍汕97B”悬浮细胞、愈伤组织、分化愈伤组织和再生试管苗等不同形态发生的组织的mRNA反转录后选择性放大,经测序胶分离鉴定出一组差异表达的cDNA。对命名为RM1 cDNA的5＇端序列测定表明,RM1与典型的MADS基因——拟南芥agamous蛋白保守区一级结构同源性达63％,模拟二级结构相似性显著,初步确认RM1属于MADS基因家族成员。分子杂交证实,RM1在悬浮培养细胞中不表达,而在愈伤组织、分化愈伤组织和再生试管苗中活跃表达。