PEG／LiAc转化酵母细胞方法的改进

ＰＥＧ／ＬｉＡｃ法转化酵母适用于酵母双杂交系统的大量筛选,并能获得１０＾６转化子／μｇ质粒以上的转化率,但如果没有进口的ＰＥＧ３３５０而采用分子量接近的国产ＰＥＧ４０００进行转化的话,转化率仅为１０＾４,远低于文献报道的水平。我们报道了一个改进的ＰＥＧ／ＬｉＡｃ方法,采用国产ＰＥＧ６０００,转化率也能达到１０＾６,且能将的热激时间从２０ｍｉｎ缩短为２ｍｉｎ。     

酵母细胞固定化技术

本文主要介绍了ＰＶＡ固定化酵母细胞的技术和制作过程,详细说明了聚乙烯醇（ＰＶＡ的适宜浓度、ＰＨ对其溶解的影响以及最重要的吸附支撑物的选择。并对制作技术方法的机理进行了初步的探索和分析。所得固定化酵母在应用中性能优越。     

研究细胞凋亡的新模式生物——酵母

细胞凋亡是受到严格调控的细胞自杀过程,凋亡机制从酵母到动物细胞高度保守.酵母细胞的凋亡过程虽发现较晚,但研究进展迅速.多个证据表明,酵母确实能发生细胞凋亡且细胞凋亡机制具有较高的保守性.酵母已成功用于发现新的细胞凋亡因子.近来,酵母还用作亨丁顿舞蹈症、帕金森氏病等凋亡相关疾病的细胞模型,为治愈这些疾病提供思路和指导·综述了酵母作为凋亡研究模式生物的可行性和独特的优势,其应用前景、存在的瓶颈问题及可能的解决方案.利用酵母为模式生物研究细胞凋亡和疾病发生,将大大加快发现新凋亡因子的过程,同时酵母作为凋亡相关疾病模式生物具有广阔的发展空间.     

高效的酵母完整细胞转化法

以穿梭质粒PYES2转化酿酒酵母H158,用二硫苏糖醇（DTT）和处理酵母细胞,变性单链鱼精DNA（ssDNA）为质粒DNA的携带体;转化率比普通酵母完整细胞转化法提高200倍,可达8．3×104个转化子/μg质粒DNA。     

酵母细胞“生物电路”研制成功

瑞典和西班牙科学家使用转基因酵母细胞制造出了能够互相交流的“生物电路”,未来,科学家有望使用人体细胞构建出更复杂的系统,用以检测人体健康状况。作为欧盟“分子计算机”项目的一部分,瑞典哥德堡大学和西班牙巴塞罗那庞培法布拉大学的科学家在哥德堡大学施特芬·霍曼教授的领导下,进行了该项研究。该研究团队使用酵母细胞制造出了合成电路,细胞之间可通过基因调控进行连接。     

啤酒废酵母生物营养素的研究进展

啤酒废酵母生物营养素的研究进展林宇野（福建师范大学微生物工程所，福州）杨虹，史美榕（福州大学轻工业系，福州）据统计，１９９３年我国已成为世界生产啤酒的第二大国，年产啤酒超过１３００万吨，约占世界总产量２％左右。啤酒工业的飞速发展，也带来了大量副产物─...     

酵母:一种模式生物

1996年 4月 ,在国际互联网的公共数据库中公布了酿酒酵母 (以下简称酵母 )的完整基因组顺序 ,它被称为遗传学上的里程碑。因为首先 ,这是人们第一次获得真核生物基因组的完整核苷酸序列 ;其次 ,这是人们第一次获得一种易于操作的实验生物系统的完整基因组。酵母是一种较好的模式生物 ,通过对其基因组的深入研究将有助于人们了解高等真核生物基因组的结构和功能。酿酒酵母作为一种模式生物在实验系统研究方面具有许多内在的优势。首先 ,酵母是一种单细胞生物 ,能够在基本培养基上生长 ,使得实验者能够通过改变物理或化学环境完全控制其生长。…     

海藻酸钠固定酵母细胞如何获得成功

主要针对<生物技术实践>中"酵母细胞的固定化"这一课题,探讨了实验原理和实验操作过程中的几个注意点:控制好配制海藻酸钠溶液的火候、浓度,调节海藻酸钠与酵母细胞混合液浓度,从而不出现蝌蚪状凝胶珠,如何不出现漂浮在CaCl2溶液上的凝胶珠等,并针对该实验结果的评价进行了讨论.     

一种简便的适用于酵母双杂交系统的酵母质粒提取方法

目的:建立一种适用于酵母双杂交系统的简便快捷的酵母质粒提取方法。方法:以酿酒酵母为供试材料,用玻璃珠振荡法破除酵母细胞壁,提取酵母总DNA,最后通过电转化大肠杆菌DH10B获得目的质粒。结果:粗提得到的质粒可直接转化DH10B,作为模板用于PCR分析及酵母双杂交后续的序列分析等,大大降低了工作量。结论:该方法简便快捷,经济实用,降低了成本,提高了效率,可以作为一种实验室酵母质粒提取方法。     

固定化酵母细胞工业性生产糖蜜酒精的研究

使用一种耐腐蚀的蓬松型化纤质新型载体,结合低浓度海藻酸钙凝胶的包埋作用,进行酵母活细胞的联合固定化。建立起6.5m~3×4规模的发酵系统,载体的投入量为8％(V/V),并使之均匀地相对固定于发酵罐内。流加单浓度稀糖蜜,在工业生产环境下连续运作生产酒精,其中,发酵产酒99天,正常条件下的发酵周期为12h,单位发酵体积的乙醇生产能力平均为6.21g/L·h。成熟醪液乙醇含量平均为9.44％(V/V),转化率为93.7％。     

蝗虫的冷冻法保存

解剖用蝗虫 ,一般采用 5 %福尔马林浸泡保存。此法保存的蝗虫在解剖时 ,刺鼻的福尔马林气味不仅影响学生的观察 ,也有害他们的身体健康。另外 ,蝗虫的体色不新鲜 ,附肢易断。采用冰箱冷冻法保存蝗虫 ,效果较好。现将保存方法介绍如下 :1　准备工作将捕捉到的蝗虫 ,放在水桶里淹死 ,选足、触角、翅膀完整的个体备用。另取若干 1 5 cm× 1 5 cm普通白纸 ,分别卷成直径约 3 cm的筒 ,筒的一端向内折 2 cm作底 ,备用。2　冷冻保存1 )将选好的蝗虫 ,头向上分别放进卷好的纸筒里 ,然后 ,将纸筒底向下 ,口向上 ,竖直排放在高度在 5 cm左右的纸盒内 ,…     

壳聚糖球固定化酵母细胞的研究

以戊二醛为交联剂,将壳聚糖球交联引入醛基,然后将交联的壳聚糖球浸泡在酵母细胞悬浮液中,制备了固定化酵母细胞壳聚糖球。以苯乙酮酸为底物,催化合成了D-扁桃酸。最优固定化条件是戊二醛的质量分数w(GA)=1%,酵母细胞与交联壳聚糖球的质量比m(Y):m(CB)0=0.5,交联时间为6h,固定化时间为18h,底物浓度为10mmol/L,在此条件下反应最大转化率和产物光学纯度分别高达67.86%和98.05?。固定化酵母壳聚糖球具有良好的重复使用性和贮存稳定性。     

固定化酵母细胞生产1,6—二磷酸果糖研究

本文研究了固定化酵母细胞制备果糖１,６二磷酸的方法及其生产。用卡拉胶包埋方法固定化酿酒酵母,对含葡萄糖１．０Ｍ,磷酸盐０．８Ｍ的糖磷液,ＰＨ６．５在３７℃下进行磷酸化反应。反复分批转化２０天以上,可达到平均产ＦＤＰＨ４ ２７．５８ｍｇ／ｍｌ。最高为５９．９４ｍｇ／ｍｌ。     

两种冷冻保护剂对小鼠2-细胞胚冷冻效果的比较

乙二醇（ETG）和1,2-丙二醇（PROH）具有高细胞渗透性和低毒性特点,常被用于人及多种哺乳动物早期胚胎冷冻保存。为了比较ETG和PROH对小鼠2-细胞胚的冷冻保护效果,本试验分别采用这两种冷冻保护剂,对小鼠2-细胞胚进行冷冻保存,并采用冻后体外培养和囊胚移植进行冷冻效果检测。结果表明,PROH组胚胎解冻后胚胎存活率与ETG组无显著差异,但PROH组4-细胞胚发育率和囊胚发育率显著高于ETG组（82．7％vs．64．6％,61．2％vs．29．1％,P〈0．01）。囊胚移植结果表明,2-细胞胚胎冻存后能够发育为正常的后代,PROH组和ETG组的囊胚移植后妊娠产仔率无统计学差异（P〉0．05）,但均显著低于对照组（P〈0．05）。为了分析两组胚胎冻存后损伤情况,埘解冻后的胚胎细胞微丝进行检测,结果显示ETG组微丝受损的胚胎数高于PROH组。本研究结果证明采用PROH作为冷冻保护剂冷冻保存小鼠2-细胞胚的冻存效果优于ETG[动物学报54（6）：1098—1105,2008]。     

酵母细胞的电击高频转化

用Ｂｉｏ－Ｒａｄ生产的基因脉冲仪进行酿酒酵母电击转化实验,得到的最适条件为：５ｋｖ／ｃｍ２５μＦ和２００Ω。电击后涂布前的培养时间为２小时。电击后细胞存活率为４６％时,每微克质粒ＤＮＡ得到１０６以上的转化子。用相同的质粒和受体菌进行原生质体法和醋酸锂法比较实验,转化率分别为２×１０４和３．５×１０２个转化子／μｇＤＮＡ。电击转化是最方便易行和高效率的方法。     

高铁酵母的研究初报

铁是人体必需的微量元素之一。铁离子是红细胞中血红蛋白的组成成分,缺铁会引致缺铁性贫血。据世界卫生组织(WHO)报导,缺铁性贫血是遍及全球的营养缺乏症,特别是发展中国家更为严重。我国儿童缺铁性贫血患病率约占50％以上。如果用硫酸亚铁和乳酸亚铁等制剂作