牛卵核移植技术的应用

用去核的牛卵母细胞进行核移植,形成重构胚,胚胎移植后,可产生克隆牛。将克隆牛的肉和奶制成肉粉和奶粉饲喂大鼠,大鼠的生理功能不受影响。牛卵核移植技术为珍稀动物的保护提供了一条重要途径,对于细胞治疗的研究也具有重要意义。通过牛卵核移植技术,可构建异种克隆胚胎,用以研究核质相互作用。将牛卵核移植技术和体细胞基因修饰技术相结合,可生产转基因克隆牛。     

绵羊受精卵移植试验简报

1976年我盟家畜受精卵移植(以下简称卵移)试验,在各级党委的重视和支持下,顶住了“四人帮”的破坏,贫下中农(牧)和技术人员积极努力,卵移试验应用于生产的扩大实验搞得生气勃勃。共给土种绵羊或低代杂种羊760只移入了单、双枚纯种三北羊、细毛羊的卵子,与1975年的移植数相比、增加了近10倍。尤其是鄂托克旗新召公社红旗大队卵移点,在大队党支部书记亲自参加和领导下,广大贫下中农(牧)和各族社员破除迷信,解放思想,在本大队开展了绵羊卵移应用     

牛胚胎移植成功

我国牛胚胎移植研究工作已经开展。由中国科学院遗传研究所203组与上海市牛奶公司第七牧场协作进行的奶牛胚胎移植试验,在我国首获成功,于1978年8月获得了胚胎移植后生下的公、母牛犊各一头。母犊初生重42公斤,公犊初生重40公斤。小久前,在上海召开的全国牛胚胎移植经验交流会上,遗传所与上海市牛奶公司报告了他们合作取得的这项成果。与会代表兴致勃勃地参观了这两头生下几个月的胚移小牛和试验母牛,对牛胚胎移植试验的成功感到鼓舞,一致认为,这次会议开得及时、开得成功,对我国牛胚胎移植研究工作的进一步开展有积极的推动作用。参加会议的有北京、上海、广东、广西、内蒙古、黑龙江、贵州、安徽等十四个省(市、自治区)科研、教学及     

激素诱发绵羊超数排卵及移植试验

胚胎移植,亦称受精卵移植,简单涵义就是:从一头优良母畜(简称供体)的输卵管内取出受精卵或早期胚胎,移植到另一头生产性能较差的同种或同品种母畜(简称受体)的相应部位,“借腹怀胎”,繁育后代。这项技术结合超数排卵,在畜牧业生产上应用后,可以充分发挥优良母畜的繁殖潜力,在短期内达到迅速扩大良种畜群的目的。随着受精卵保存技术的不断提高,如     

美登木在通海移植成功

美登木(Maytenus hookeri)是卫矛科植物,由美洲引进我国的西双版纳.美登木是一种有效的抗癌药用植物,临床上具有消炎;止痛、增进食欲等效果,无副作用. 1982年,我校生物小组的辅导员参加全国优秀青少年科技辅导员冬令营到西双版纳进行考察。我们决定采一些幼苗或种子进行试验驯化.西双版纳海拔570米,年均温21—22℃,常年无霜。我县绝大部分地区海拔1800米,年均温15℃左右,每年11月中旬至第二年2月     

体细胞核移植生产绵羊转hALR基因囊胚

扩增人肝细胞再生增强因子(human augmenter of liver regeneration,ALR)基因,利用质粒pIRES2-EGFP 构建新霉素(Neo)、增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)双标记基因且EGFP和ALR基因为双顺反子的真核表达载体.LipofectAMINETM介导其转染体外培养的绵羊胎儿成纤维细胞(sheep fetal fibroblast cells,sFFCs);经G418筛选转基因细胞;激光共聚焦显微镜挑选绿色荧光单克隆细胞.PCR、RT-PCR和免疫组织化学方法进一步检测ALR基因及其表达;稳定表达外源基因的sFFCs作供体,移入去核的绵羊卵母细胞中,进行体细胞核移植.通过激光共聚焦显微镜和ALR抗体检测EGFP、ALR基因在胚胎水平上的表达,其结果表明:由IRES连接的EGFP和ALR基因可在绵羊胎儿成纤维细胞内同时表达,由此细胞核移植产生的转基因胚胎在发育的各阶段均可见绿色荧光;囊胚中所有细胞表达EGFP基因;发绿色荧光的胚胎中ALR基因同时存在.因此,由IRES连接标记基因和目的基因,以标记基因指示目的基因的表达,可简化检测目的基因的繁琐手段;用筛选的转基因早期胚胎进行移植,可提高制备转基因动物的效率.     

绵羊体细胞核移植去核前程序的优化

目前绵羊体细胞克隆效率仍然很低,本研究拟对去核前的操作环节进行优化。主要为卵巢保存时间(3 h和3–5 h)、卵母细胞体外成熟时间(18 h和24 h)、供核细胞贴壁率(10%和30%)和盲吸法去核时间(16 hpm和18 hpm)等4个方面优化。以成熟率、融合率和重构胚胎发育能力作为评价参数。结果表明:在卵巢保存方面,卵巢保存3 h组卵母细胞成熟率显著高于3–5 h组卵母细胞成熟率(60.18%vs 52.50%)(P0.05),重构胚胎发育力差异不显著(P0.05);在体外成熟时间方面,体外成熟18 h组和24 h组卵母细胞成熟率差异极显著(53.81%vs 89.06%)(P0.01),胚胎发育力差异不显著(P0.05);在融合率方面,贴壁率30%组极显著高于贴壁率10%组(80.85%vs 57.69%)(P0.01),在克隆胚胎发育率方面没有显著差异(P0.05),具有贴比率差异性的细胞在细胞生长平台期表现出差异性;在去核时间方面,16 hpm组和18 hpm组胚胎卵裂率差异显著,囊胚发育力差异不显著(P0.05),16 hpm组获得一只克隆羊,重复16 hpm获得4只妊娠克隆羊。组织微卫星序列经SDS-PAGE分析,DNA指纹与供体细胞相同。结论:去核前程序的优化保证了材料的质量,为提高克隆胚胎数量和质量奠定基础,可以获得体细胞克隆羊。     

用直接移植法移植猪冷冻受精卵成功并产仔

全国农业协同组合联合会(JA全农)饲料畜产中央研究所95年7月5日宣布使用直接移植法将猪冷冻受精卵移植给受卵猪生产仔猪获得成功。使用直接法生产仔猪是世界首例。作为与茨城大学生物生产学科助教授高坂哲也的合作以及农林水产省的家畜受精卵移植技术组合的课题提出了该项研究。该研究组合的课题在95年度完成。因这次使用直接法达到了50％的产率。所以该研究所开始了面向实用化的试验。 JA全农打算将猪冷冻受精卵移植技术用于JA全农进行系统构建的SPF猪“°SP”的生产、系     

中国对虾受精过程中精卵核的细胞学变化

中国对虾精子以其棘部顶端随机附着在卵上,精子在凝胶膜形成后,第一极体排出前入卵,精子入卵后,絮状的精核经过重建形成雄原核,中国对虾卵子排放时处于第一次成熟分裂的中期,卵子入海水时,纺锤体的长轴与质膜平行,卵子激活后,纺锤体的长轴开始旋转,旋转至纺鲑体长轴与质膜垂直时,由纺锤丝牵引着染色体向两极移动,外侧的染色体由质膜包裹形成第一极体,受膜举起后,由次级卵母细胞排放出第二极体,此后,单倍雌核重建形成雌原核,雄原核形成早于雌原核,雌雄原核于卵子中央联会形成联合核,受精后的50分钟纺锤丝牵关染色体称向两极,质膜内缢断裂形成两个细胞的胚胎。     

道产子马的冷冻受精卵移植成功

5月12日和21日,位于北海道日高的北海道大学的实验农场里,借英国纯种马系的杂种马之腹连生了2头道产子(北海道产的马),道产子的冷冻受精卵移植初次取得成功。看来冷冻受精卵有可能保存道产子的基因资源。在北海道,目前虽然约有1000头的道产子,但在产业上并无价值,可以预料头数将逐渐减少。     

可降解组织工程血管支架成功用于犬股动脉移植

目的采用可降解的聚己内酯接枝肝素材料,负荷b-FGF(碱性成纤维细胞生长因子),体外构建的小口径组织工程血管,完成犬的股动脉移植动物实验。方法利用可降解的聚己内酯接枝肝素材料,电纺丝技术制备组织工程血管支架,并对支架负荷b-FGF生长因子,并进行材料的内皮细胞粘附实验。将体外构建的小口径组织工程血管,完成犬的股动脉移植动物实验,观察通畅率和移植术后组织工程血管的改变。结果可降解聚己内酯接枝肝素材料支架,负荷细胞生长因子(b-FGF),利于内皮细胞粘附。构建的组织工程血管进行体外动物实验构建,3个月移植物通畅率好,移植后取材,有新生内膜迁移和胶原纤维浸入。结论利用可降解聚己内酯接枝肝素材料构建小口径支架,初步符合构建组织工程血管支架的要求。     

联合用药成功治疗造血干细胞移植后真菌感染1例

1资料与方法患者男,36岁,因“确诊骨髓增生异常综合征(MDS)8年,拟行同胞全相合造血干细胞移植术”于2005年12月入院。入院后骨髓穿刺检查显示MDS已转化为急性髓性白血病,原始细胞占66%,复杂染色体异常:47,xy, 8,der(11)t(1;11)(q11;q25)[7]/46xy[2]。供者为患者胞兄,HLA-A、B、DR位点与受者完全相合,血型均为O型。预处理方案为改良的BuCy方案:阿糖胞苷2g/m2静脉滴注(-9d),马利兰(Bu)1mg/kg口服,每6h1次(-8~-6d)共12mg/kg,CY1.8g/m2静脉滴注(-5~-4d),甲环亚硝脲(Me-CCNU)250mg/m2口服(-3d);采用环孢菌素A(CSA) 霉酚酸酯(MMF) 短…     

鼠脑移植恢复受损脑神经元联系的尝试成功

最近,N.Sunde等用X射线损伤新生鼠双侧海马区域,随后将另一新生鼠的正常齿状回组织移植入受损伤鼠单侧海马区域(另一侧作为对照)。发现:在非胆碱能、非单胺能神经系统,与胆碱能、单胺能系统一样,移植物和宿主神经元能够建立相互联系,并且移植物可恢复宿主已被破坏的神经联系。80%以上的齿状回颗粒细胞在出生以后形成。出生后,X射线照射几乎能选择性地使颗粒细胞数减少到正常的15%,残存的颗粒细胞传入纤维形成散乱的扁平状突起伸向CA3区维体细胞。同时苔藓纤维突起明显减少。这种X射线照射模型在许多方面与自然发生的神经细胞恶性改变及早期退行性疾病相同。将     

绵羊生殖道抗菌肽

以屠宰场收集的新鲜、健康、雌性绵羊生殖器官为原材料．采用乙酸浸提、透析、Sephadex G-50凝胶过滤层析和反相高效液相色谱(RP-HPLC)等方法分离纯化绵羊生殖道抗菌肽．以G+、G-和真菌为抗菌活性检测指示菌株,利用薄层琼脂糖孔穴扩散法、微量肉汤稀释法进行抗菌活性检测．对分离纯化所得纯品进行分子质量质谱测定、纯度鉴定、N端测序,并对其性质进行研究．结果表明：分离纯化所得两个绵羊生殖道抗菌肽分子质量分别为4820.47 u和4012.5 u,N端部分氨基 酸序列分别为AYVLDEPKP和YDSGA．对G+细菌(S. aureus ATCC2592、Streptococcu ATCC55121)、G-细菌(E． coli ATCC25922)、真菌(C． albicans ATCC2002)均具有良好的抑菌活性．对家兔红细胞无溶血活性,对人血液凝固无影响．目前未见有从绵羊生殖道分离纯化得到抗菌肽的报道,并且这一研究结果进一步证实抗菌肽在多种动物生殖道天然免疫防御方面起着重要作用．     

绵羊基因组研究进展

过去几年中,家畜基因组计划取得了巨大进展。已经构建了猪、鸡、牛、绵羊、马、鹿的遗传图谱,其遗传标记间距在5～20cM。这些图谱对于家畜中与重要经济性状相关的基因或遗传标记的鉴定非常重要。该文从绵羊的基因图谱、比较图谱、重要经济性状基因及QTL定位方面对绵羊基因组的研究进展作了简要阐述。 Abstract:During the last few years,advances in livestock genome projects have been remarkable.Species-specific genetic maps exist for pig,chicken,cattle,sheep,horse,and deer with marker intervals of 5 to 20 cM.These maps have been essential for the identification of genes and genetic markers associated with importantly economic traits in livestock.In this paper,advances of gene map,comparative map,the genes for importantly economic traits and quantitative trait loci (QTL) mapping were briefly introduced in sheep.     

绵羊抗菌肽研究进展

抗菌肽是动植物先天性免疫系统的组成部分。概述了绵羊抗菌肽Defensin、Cathelicidins、SAAPs的研究进展和应用前景,并分析了在绵羊抗菌肽研究中存在的问题。     

韩国和美国科学家成功克隆出猴子胚胎但移植胚胎实验失败

汉城国立大学教授黄禹锡的研究小组与美国研究小组合作，成功克隆出了猴子胚胎，但把克隆胚胎移植到25只代理母猴子宫克隆猴子的实验没有成功。     

蒙古绵羊和哈萨克绵羊MHC-DRB3基因外显子2的多态性

采用PCR RFLP方法对蒙古绵羊和哈萨克绵羊MHC DRB3 基因第 2外显子 2 85bp的扩增产物进行多态性分析 ,共检测到 17种基因型 ,由A、B、C、D、E、F和H共 7个复等位基因控制。通过酶切图谱分析表明 ,蒙古绵羊和哈萨克绵羊的MHC DRB3 基因第 2外显子的第 15 4、16 8和 2 2 0位的碱基表现出多态性。统计分析表明 ,MHC DRB3 基因的部分基因型频率和等位基因频率在两个群体之间差异显著或极显著 (P <0 10、P <0 0 5或P <0 0 1)。χ2 适合性检验结果表明 ,蒙古绵羊和哈萨克绵羊的MHC DRB3 基因第 2外显子的HaeⅢ酶切位点均未达到Hardy Weinberg平衡状态 (P <0 0 1)。     

绵羊进行性肺炎分子生物学研究进展

绵羊进行性肺炎分子生物学研究进展丁恩雨（复旦大学生命科学院病毒学研究室,上海２００４３３）关键词绵羊进行性肺炎,慢病毒,分子生物学ＡｄｖａｎｃｅｓｏｆＲｅｓｅａｒｃｈｏｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙｏｆＯｖｉｎｅＰｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅＰｎｅｕｍｏ...