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富含多糖和次生物质的芒果子叶总RNA的提取 总被引:20,自引:0,他引:20
为了提取芒果子叶总RNA,去除次生物质和多糖等杂质的严重干扰,采用了正交试验快速优化提取方法。实验证明70%的丙酮能有效地去除大部分杂质,提取过程一天内可完成,RNA含量可达677μgg·FW,A260A280比值为195,RNA的纯度及质量适合后续反应。 相似文献
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富含多糖猕猴桃果实组织中总RNA提取方法的改进 总被引:24,自引:4,他引:24
ImprovementofMethodforExtractingTotalRNAfromKiwifruitTissueWithRichPolysaccharidesChENKun-Song,XUChang-JieZHANGShang-Long(DepartmentofHorticultrue,ZHejiangAgriculturalUniversity)Hangzhou310029)植物生长发育是一系列基因表达的结果,而这些基因的表达可为外界环境信号或内部因子如植物生长调节物质等所启动。分离和提纯植物体内的总RNA,并用之合成cDNA,进行Nolthern杂交和蛋白质体外翻译试验等,是从分子水平揭示植物生长发育规律的重要试验手段之一。有关植物组织RNA的提取方法已有不少报道[1~7]。但… 相似文献
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介绍了一种提取蕨类植物蜈蚣草(Pteris vittata L.)总RNA的有效方法。由于蜈蚣草富含多酚和多糖,用普通的RNA提取方法很难获得高质量的RNA。本方法通过优化提取缓冲液的条件来抑制多酚氧化,并利用RNA与多酚、多糖在不同浓度的2-丁氧乙醇中溶解度不同的特性来去除多酚和多糖。本方法简便、快速,所提取的RNA质量较高,可直接用于cDNA合成、cDNA文库的构建以及RACE等分子生物学操作。 相似文献
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改良尿素-氯化锂方法提取成熟小麦种子总RNA 总被引:22,自引:0,他引:22
为了分离提取成熟小麦种子总RNA,去除多糖等杂质的严重干扰,本实验对尿素氯化锂分离RNA的方法做了三个方面的改进:一、去除成熟种子的胚(含大量麦胚凝集素等糖蛋白),发现裂解物的黏稠度明显下降;二、在裂解粗提物中加入CTAB至终浓度为02%,可去除大部分多糖;三、异丙醇沉淀RNA之后,充分溶解,离心去除残留的不溶性多糖等杂质。结果表明:所提取的成熟小麦种子RNA的纯度和产率都有明显提高 。 相似文献
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淡水育珠蚌外套膜提取总RNA的改良方法 总被引:1,自引:0,他引:1
通过对Trizol法加以改进,提取淡水珍珠蚌外套膜组织中的总RNA。经预处理后,在异丙醇沉淀RNA时加入高浓度的盐溶液,用75%的酒精2次洗涤RNA。用紫外分光光度法和1%琼脂糖凝胶电泳鉴定所提取的RNA。结果表明,改良法获得的总RNA完整、纯度高,改良Trizol法是一种从淡水育珠蚌外套膜组织中提取总RNA的高效、便捷、可靠的方法。 相似文献
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An Improved Method for the Isolation of Total RNA from Malva pusilla Tissues Infected with Colletotrichum gloeosporioides 总被引:1,自引:0,他引:1
A modified RNA extraction method was developed for fungal and plant tissues that has several advantages compared with existing, published methods for materials with high contents of ribonuclease, phenolics and polysaccharides. The method uses guanidinium isothiocyanate in the homogenization buffer, and then hexadecyltrimethylammonium bromide (CTAB). soluble polyvinylpyrrolidone and insoluble polyvinylpolypyrrolidone in the extraction buffer. The procedure consistently produced a high yield of relatively high purity, undegraded RNA from a variety of biological materials and should be useful for other tissues where RNases, phenolics and sticky polysaccharides are a problem. 相似文献
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从石蜡包埋组织中获取高质量基因组DNA的方法改进 总被引:3,自引:0,他引:3
从石蜡包埋组织中制备基因组DNA(gDNA)难度大、获取样本量很少.传统方法为二甲苯脱蜡法.为了简化操作,获得更高质量的gDNA,我们采用水浴法替代二甲苯进行脱蜡,亲和层析纯化石蜡包埋肝细胞癌(HCC)组织标本中基因组DNA,以纯化gDNA为模板PCR扩增看家基因.结果显示改良水浴法提取的gDNA质量、数量均显著高于传统二甲苯脱蜡法,PCR产物量也得到显著提高.与传统方法相比,改良水浴法简单、快捷,可以更有效的回收石蜡包埋组织中的gDNA. 相似文献