阳离子聚丙烯酰胺的合成及其表征

合成了阳离子功能单体甲基丙烯酰氧乙基二甲基丁基溴化铵(DMB),并将DMB与丙烯酰胺(AM)共聚制备了阳离子聚丙烯酰胺,并用IR,NMR对其结构进行了表征。     

碳量子点的合成、表征及应用

对碳量子点的常用合成方法、表征手段及应用情况进行介绍。碳量子点是一种以碳元素为主体的新型荧光纳米材料,具有光学性能优良、细胞毒性低、生物相容性好、易于功能化和成本低廉等优点,在生物和医药领域具有广阔的开发前景。     

聚乙二醇支载有机小分子合成的研究进展

本研究综述了聚乙二醇（PEG）支载的有机小分子合成研究的进展,从PEG所支我的直链化合物包括胺化产物、酰胺化合物、硫脲及取代硫脲化合物、其他化合物,从PEG所支载的杂环化合物包括单杂原子杂环、多杂原子杂环等两大方面分类讨论了所支载的有机小分子的合成方法,在此基础上对聚乙二醇作为载体的研究前景进行了展望。     

维生素E琥珀酸酯的合成及表征

目的:合成维生素E琥珀酸酯并对其进行表征.方法:以d,1-α-生育酚和丁二酸酐为原料,吡啶为溶媒,合成了维生素E琥珀酸酯.采用紫外光谱法、红外光谱法、核磁共振氢谱和差示扫描量热分析对产物进行表征.结果:经验证,成功合成了维生素E琥珀酸酯.结论:成功合成了维生素E琥珀酸酯.     

亲淋巴磁共振造影剂的合成、表征和性能研究

目的:探讨合成亲淋巴造影剂的方法并对其体内外性能进行研究.方法:采用二氨基乙基乙二醇醚(EOEA)-二乙三胺五乙酸(DTPA)线性共聚合物(poly-DTPA-EOEA)为配体,与钆(Gd)的三价盐配位构建T1类线性大分子造影剂,检测二氨基乙基乙二醇-DTPA酰胺共聚物钆配合物(Gd-poly-DTPA-EOEA)的表征和性能.结果:Gd-poly-DTPA-EOEA分子量为20kDa,其中钆的含量为14%(w/w).T1值为6.45L mM-1s-1.Gd-poly-DTPA-EOEA在血液中的存留时间明显长于小分子造影剂Gd-DTPA,并可进入淋巴结巨噬细胞内.结论:Gd-poly-DTPA-EOEA是一种具有高驰豫率、循环时间长和亲淋巴特性的T1类大分子造影剂.     

固定化脂肪酶催化聚乙二醇脂肪酸酯的合成

固定化假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｓｐ．）－１６１９脂肪酶催化脂肪酸和不同聚合度的乙二醇形成酯。其中以聚乙二醇４００（ＰＥＧ４００）的酯化率较高,Ｃ_１０－Ｃ_１８的饱和脂肪酸与ＰＥＧ４００反应的酯化率相仿。反应体系中,月桂酸与ＰＥＧ４００的摩尔比大于２∶１时有利于酯化反应,作用的最适温度为４０℃,最适Ｐｈ为６.０。在比较的３０种添加有机溶剂中,饱和烷烃,芳香烃能促进反应,使酯化率提高２０％左右。反应开始添加５μｌ水有利于酶的作用,外加水量超过适量时,随外加水量的增加酯化率下降。在由２.５ｍｍｏｌ月桂酸,１.２５ｍｍｏｌＰＥＧ４００,１０ｍｇ固定化脂肪酶（１００ｕ）,５ｍｌ己烷,５μｌ水组成的反应体系中,４０℃振荡反应２２ｈ,酯化率达４９.８％。经薄层色谱,气相色谱鉴定,产物为聚乙二醇４００月桂酸酯。     

2-芳基-1,3-二氧环戊烷的合成与表征

以3-硝基-4-甲基苯甲酸为主要原料,依次通过乙硼烷还原、氯代反应将其中羧基转化为氯甲基,又经过缩争、氧化、醛基保护将甲基转化为缩醛等步骤合成了2-[2-硝基-(4-氯甲基)]苯基-1,3-二氧环戊烷.目标产物及某些重要中间体的结构已通过红外光谱、质谱、核磁共振氢谱的方法进行了表征.     

聚乙二醇和金属离子诱导脂质体与细胞的融合

用荧光菜振能量转移技术检测ＰＥＧ和金属离子诱导脂质体和细胞的融合,发现有ＴＥＧ参与诱导时,虽然Ｃａ＾２＋对膜融合的促进作用仍专一地依赖于ＰＳ的存在,但其对ＰＳ的依赖性降低;Ｍｎ＾２＋促进含ＰＳ和ＰＥ的脂质体与细胞的融合,而Ｍｇ＾２＋无作用。以ＰＣ：ＣＬ：Ｃｈｏｌ为０．５：０．５：１的脂质体包埋天花粉蛋白,经ＰＥＧ诱导与骨髓瘤细胞ＳＰ２０融合,提高了天花粉蛋白对骨髓瘤细胞的杀伤力。     

聚乙二醇对蛋白质类药物的修饰

随着基因工程技术的发展,蛋白质类药物的应用越来越受到人们的青睐。但蛋白质类药物具有血浆半衰期较短、有一定的免疫原性等不足之处,在一定程度上限制了其临床应用。由于聚乙二醇(PEG)具有与蛋白质相容的特性,用其对蛋白质类药物进行化学修饰已经成为医学和生物工程领域的热门课题。本文重点介绍了PEG的特性以及应用其修饰蛋白质类药物的原理和存在的一些问题。     

蛋白质药物的聚乙二醇修饰

聚乙二醇被广泛应用于蛋白质药物的化学修饰,修饰后的蛋白质药物的性质发生多方面变化,如:增加了此类药物的溶解度和稳定性,耐酶水解的能力增强,减弱或消除免疫原性,增加药物在体内的半衰期等。近年来,聚乙二醇修饰剂的种类和修饰方法发展较快,蛋白质分子上的氨基、巯基、羧基均成为化学修饰的研究对象。本文综述了聚乙二醇修饰的原理与方法,修饰方法的比较与优化,修饰后产品的鉴定与检测。     

Polyethylene Glycol Induced Fusion of Selected Pairs of Single Protoplasts

A new method for polyethylene glycol (PEG) -induced fusion between single pairs of selected protoplasts was developed. The protoplasts were prepared from tobacco leaves. Under an inverted microscope two defined protoplasts were selected with a hand-made micropipette and transferred into a droplet of fusion solution containing 25 % PEG (M. W. 6000), 0. 1 mol/L mannitol and 0. 01 mol/L CaCl2 · 2H2O (pH 5.6). Slightly moving the pipette caused the protoplasts to contact and adhere to each other, the fusion pairs were then transferred to a solution containing 10% PEG, 0.35 mol/L sucrose and 0. 01 mol/L CaCl2 · 2H2O (pH 5.6) for approximately 10 min, followed by subsequent washing with a solution containing 0.45 mol/L sucrose and 0.04 mol/L CaC12 · 2H20 (pH 7—9). Compared with conventional fusion methods adopted to protoplast population, the present method can avoid either blind fusion of protoplasts belonging to one partner and fusion among multiple protoplasts, or the presence of unfused protoplasts, thus ensure the fusion to be precisely at the level of a selected pair of single protoplasts. Moreover, it is simple and convenient enough to show its potentiality for wide application in somatic hybridization and particularly in the case of small quantity of parental protoplasts such as in vitro intergametic fusion studies.     

Protection of ROC-1 Hybrid Glial Cells by Polyethylene Glycol Following ATP Depletion

Abstract: Oligodendroglia-glioma hybrid cells (ROC-1) subjected to inhibition of glycolytic and oxidative ATP synthesis undergo a sequence of changes, including ATP depletion, parallel processes of cell swelling and blebbing, and finally plasma membrane disruption and cell death. The morphological and biochemical changes that follow ATP depletion were studied in the presence and absence of polyethylene glycol (M, 8,000), a nonpermeant oncotic agent. Polyethylene glycol prevented cell swelling and membrane blebbing. It significantly delayed, but did not prevent, the release of lactate dehydrogenase into the medium; it did not affect the fall in [ATP]. These results suggest that osmotic cell swelling may be a contributing factor in the loss of cell viability when ROC-1 cells are depleted of ATP.     

Studies Upon the Toxicity of Polyethylene Glycol Coated Lipid Vesicles: Acute Hemodynamic Effects,Pyrogenicity and Complement Activation

Abstract

The toxicity of PEG-coated liposomes has been examined by testing the ability of such vesicles to (a) initiate a fever response, (b) activate complement and (c) alter various hemodynamic parameters in rabbits. The results indicate that DSPC/Chol/DMPG/Vit.E/ PE-PEG (45.5:40:9:1:4.5) vesicles injected I.V. in rabbits at a lipid dose of ～4 μmole/kg do not elicit a fever response either due to the presence of bacterial contamination, or by activating the release of endogenous pyrogens and, in addition, cause no statistically significant (Mann-Whitney p >0.05) changes in various hemodynamic parameters compared to injection of saline. An in-vitro hemolytic assay indicated that these same vesicles cause no activation of complement over the lipid concentration range 0.06–64 mM. These results are discussed in terms of the potential use of PEG-coated vesicles as blood pool imaging agents in nuclear medicine.     

Modification of Lipase by Polyethylene Glycol

Lipase was modified using polyethylene glycol activated by p-nitrochloroformate. The hydrolytic activity of the polyethylene glycol-derivatised lipase (PEG-lipase) was relatively low compared with that of the unmodified enzyme in aqueous system. The esterification activity, however, was enhanced following the modification. The rate of esterification of butyric acid was higher than that of oleic acid. Benzene was the best solvent for the esterification reaction.     

一种用聚乙二醇制备微粒体的方法

介绍一种用聚乙二醇(PEG)制备微粒体的方法.大鼠肝匀浆经聚乙二醇-6000凝聚,及两次高速离心即可得到微粒体组分,与超速离心方法比较,可省去超速离心步骤,又缩短了分离制备的时间,是一种比较简单易行的方法．     

聚乙二醇二缩水甘油醚交联氨基载体LX-1000EA固定化脂肪酶 *

聚乙二醇二缩水甘油醚(PEGDGE)作为双功能环氧试剂,在实验中被用于交联氨基载体LX-1000EA共价固定化海洋脂肪酶,经过处理后的载体共价固定化脂肪酶具有良好的效果。实验经过单因素初筛和正交试验,得到最佳的交联及固定化条件为0.75%交联剂浓度、交联温度35℃、交联时间3h、载体量1.25g、pH9.0、固定化温度55℃、固定化时间1h。对LX-1000EA-PEGDGE固定化酶与游离酶、戊二醛(GA)交联LX-1000HA-GA的固定化酶进行酶学性质的比较,发现LX-1000EA- PEGDGE固定化酶较游离酶最适反应温度未改变,与LX-1000HA-GA相同的是最适反应pH都由7.0提高为8.0。在最适条件中所测LX-1000EA-PEGDGE酶活达到78.84U/g,固定化改变了游离酶的酸碱耐受性,热稳定性和操作稳定性较游离酶和LX-1000HA-GA固定化酶均有提高。LX-1000EA-PEGDGE的热稳定表现优异,在60℃孵育3h后保留90%酶活;使用5次后仍能残余50%酶活;保存30天酶活仍保留60%。首次使用新型双环氧交联剂PEGDGE交联有机氨基载体共价结合固定化脂肪酶,为更有效的固定化方法提供了技术支持,同时也发现交联剂对固定化酶的性质存在较大影响。     

聚乙二醇单修饰重组人粒细胞集落刺激因子的研究

制备单修饰的PEG蛋白偶联物,对获得重复性好的修饰产品,减少后续分离步骤具有重要的意义。用N-羟基琥珀酰亚胺活化法对单甲氧基聚乙二醇 (mPEG,分子量20000) 进行活化,红外光谱分析, 并考察了其水解动力学性质。对重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)进行化学修饰,通过正交试验结合SDS-PAGE电泳检测建立了单条PEG链修饰rhG-CSF的条件,单修饰PEG-rhG-CSF的收率为90%。离子交换层析对修饰产物进行分离纯化,高效凝胶过滤色谱(SEC-HPLC)检测纯度达到97%。     

聚乙二醇对菠萝蛋白酶的化学修饰

方法:用琥珀酸酐法活化的聚乙二醇对菠萝蛋白酶进行化学修饰,得到菠萝蛋白酶的修饰酶,对比研究三种菠萝蛋白酶:修饰酶、混合酶、天然酶的热稳定性及酸碱稳定性,考察金属离子对三种菠萝蛋白酶的影响。结果:当在55℃水浴保温100min后天然酶活力只保留20%,混合酶活力保留37%,修饰酶活力保留58%;在pH3.0-4.5及pH6.0-7.0的条件下,修饰酶活力高于天然酶活力。当Ca2 的浓度达到0.05mg/mL时,修饰酶的活力高达257.66%;当Mg2 的浓度达到0.035mg/mL时,修饰酶的活力高达147.25%。一价离子Na 对三种菠萝蛋白酶无明显影响。结论:修饰的菠萝蛋白酶对温度和pH值的稳定性均比天然酶有很大程度的提高。混合酶的活力介于天然酶和修饰酶之间说明聚乙二醇对菠萝蛋白酶有一定的保护作用。二价离子Ca2 、Mg2 对三种菠萝蛋白酶活力均有不同程度的激活作用。     

用聚乙二醇分离富集microRNA的方法探讨

目的探讨用聚乙二醇（polyethylene glycol,PEG）溶液分离富集miRNA的操作方法和分离富集效果,并与Ambion公司的miRNA分离试剂盒分离效果进行比较。方法用PEG溶液和Ambion公司的miRNA分离试剂盒从肝脏组织总RNA中分离富集miRNA,用变性琼脂糖和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定分离效果,并在富集的miRNA中用RT—PCR扩增miR-122以鉴定是否有效地回收了miRNA。结果PEG和Ambion公司的miRNA分离试剂盒都能有效地富集miRNA,PEG富集的RNA片段比Ambion公司的试剂盒的大。结论PEG溶液能有效地分离富集miRNA,和Ambion公司的miRNA分离试剂盒分离效果相当,并具有操作简便、快捷及成本低廉的优点。     

乳果糖口服液联合聚乙二醇电解质散剂在便秘患者行结肠镜检查前肠道准备中的应用研究

目的:探讨便秘患者行结肠镜检查前联合应用乳果糖口服液联合聚乙二醇电解质散剂的临床效果。方法:将90例接受结肠镜检查的便秘患者分为实验组和对照组,每组各45例,实验组肠镜检查前1天口服乳果糖口服液及聚乙二醇电解质散剂,对照组检查前1天口服聚乙二醇电解质散剂,比较两组患者的首次大便时间(开始服药至初次大便时间)、排便次数、大便清澈时间(初次大便至大便清澈时间)、肠道准备清洁度和不良反应情况。结果:实验组首次大便时间、大便清澈时间均短于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。实验组完成肠道准备的排便次数较对照组次数增多,差异有统计学意义(P0.05)。实验组肠道准备清洁度优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。两组不良反应发生率无明显差异(P0.05)。结论:便秘患者结肠镜检查前肠道准备中联合应用乳果糖口服液联合聚乙二醇电解质散剂可提高肠道清洁度,增加排便次数,缩短大便清澈时间,达到理想的清肠效果,有助于发现微小病变,降低肠镜检查的漏诊率。