PCR技术检测人乳头状瘤病毒DNA

本文用一对适合人乳头状瘤病毒DNA的通用PCR引物对临床阳性和正常组织进行了PCR扩增检测分析,阳性组织均得到一条特异性的DNA扩增片段,正常组织均没有任何扩增片段。阳性组织DNA扩增片段经克隆后进行DNA序列分析,证明该扩增片段确为目标DNA扩增片段。     

用聚合酶链式反应法检测人乳头状瘤病毒DNA

实验研究表明,宫颈癌的发生和发展与人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)的感染有着密切关系。约有80％的宫颈癌组织中含有人乳头状瘤病毒第16型(HPV 16)及18型(HPV 18)的DNA,因此,检测宫颈癌组织中的HPV DNA对研究宫颈癌的发生和发展机制以及宫颈癌的防治都有重要意义。目前检测HPV DNA的手段都采用DNA探针杂交技术,该方法要有高比活的同位素,而且费时。聚合酶链式反应(Polymerase Chain Rea-     

巢－PCR分型检测人乳头状瘤病毒同源序列

采用Ｌ１通用引物ＭＹ１１／９介导聚合酶链反应,（ＰＣＲ）,从人生殖道疣,癌组织中扩增人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）同源序列得３９４－５５２ｂｐＤＮＡ片段,再以内引物ＧＰ５／６介导第二次扩增得１３９－１５４ｂｐ片段,然后根据ＲｓａＩ酶切扩增片段的电泳图谱来分出ＨＰＶ型别,无需特异型别的探针进行分子杂交,３５例宫颈癌和３０例生殖器疣ＨＰＶ同源序列检出率分别为８５．７５％和９６％;１２例卵巢腺癌检出ＨＰＶ同源     

人乳头状瘤病毒分型及病毒载量与宫颈病变的研究进展

宫颈癌作为目前妇女最常见的恶性肿瘤,新发病例在全球范围内仍处于上升趋势。已有实验证明,HPV感染是宫颈癌发生发展的必要条件。然而不同分型及其病毒载量高低仍会影响诊断率,从而影响病情,使之发展为持续性感染,最终演变为癌前病变或宫颈癌。目前,研究者对于高危型HPV病毒载量与宫颈病变之间是否存在依存关系尚存争议。研究表明,高病毒载量可能成为预测宫颈癌前病变进展的指标,然而对于病理诊断明确的宫颈癌患者而言,病毒载量并不能代表病理分期。本文综述了人乳头状瘤病毒,不同基因分型,病毒载量等因素对于宫颈病变及宫颈癌的相关性的近年研究进展,希望有助于指导临床工作。     

人乳头瘤病毒结构蛋白在病毒感染中的作用研究进展

人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)属于乳多空病毒科(Papovaviridae)的乳头瘤病毒属,是一种无包膜的双链DNA病毒,能诱发人的皮肤或粘膜产生疣和乳头状瘤,某些基因型与子宫颈癌密切相关.     

宫颈上皮内瘤变治疗前后人乳头状瘤病毒载量的临床研究

目的:探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)治疗前后人乳头状瘤病毒(HPV)载量与预后的意义.方法:从2006年6月～2009年9月间在新疆维吾尔自治区人民医院妇科门诊和妇科病房就诊的190例CIN患者,经宫颈环形电切术(LEEP)或宫颈冷刀锥切术治疗后进行1年随访,检测治疗前后HPV的载量,对病灶持续存在和复发进行分析.结果:CIN患者经LEEP或宫颈冷刀锥切术治疗后HPV平均载量较治疗前均显著降低(P＜0.01).随着HPV病毒载量持续时间越长,病变的持续存在率、复发率越高.结论:LEEP或宫颈冷刀锥切能显著降低CIN患者HPV载量,病毒载量影响疾病预后,其研究对随访和预后都有指导意义.     

人乳头状瘤病毒(HPV)基因整合与宫颈病变

HPV基因整合是启动宫颈癌发生的一个重要事件,高危性人乳头状瘤病毒(high risk human papillomavirus,hr-HPV)基因组整合率和宫颈病变程度密切相关,可能是宫颈癌发生发展过程中的重要标志.HPV基因整合机制研究、整合位点的发现、相关整合通路的探索,对于宫颈癌的精准治疗和预后的判断有着重大的...     

人乳头状瘤病毒复制机制的研究进展

人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)DNA以游离和整合两种形式存在于感染细胞中。游离形式HPVs的复制依赖于上皮细胞的分化,病毒E1、E2蛋白和复制起始位点(origin,Ori)为复制必需元件,E1和E2蛋白与Ori结合起始病毒DNA的复制。随后,病毒DNA通过E2蛋白与Brd4(bromodomain-containing protein 4)等细胞蛋白的互作而与染色体结合,并随细胞分裂平均分配到子代细胞中。在肿瘤中,高危型HPVs的基因组通常以整合形式存在,并随细胞的增殖而复制。     

人乳头状瘤病毒16型L1蛋白的高效表达及抗原性分析

为了在大肠杆菌中高效表达人乳头状瘤病毒16型L1蛋白,将L1基因的N端截去,选择最适合L1表达的载体,并且对表达条件进行筛选,结果表明重组蛋白的表达量达到33%;经包涵体变性复性和初步纯化,得到初纯的蛋白,ELISA结果分析表明,复性的L1蛋白保留了较好的抗原性。     

人乳头瘤病毒与细胞凋亡

近来研究表明病毒感染与细胞凋亡有着密切的关系。在研究中发现,许多病毒参与细胞凋亡的诱导和抑制,在这些过程中相关病毒的基因的表达起着关键作用,而细胞凋亡相关因子直接或间接参与这一过程,对于这些问题有助于阐明病毒感染后病毒和细胞相互作用的分子机理。本文对人乳头瘤病毒的E6、E7、E2、和E5等基因及表达蛋白与细胞凋亡相关因子p53、pRB等相互作用,以阐述HPV的致癌机理。     

乳腺导管内乳头状瘤、非典型乳头状瘤与导管内乳头状癌诊断与鉴别诊断

目的:探讨乳腺导管内乳头状癌和导管内乳头状瘤、非典型乳头状瘤的病理表现及诊断与鉴别诊断.方法:对20例乳腺导管内乳头状癌及23例导管内乳头状瘤、5例非典型导管内乳头状瘤进行大体及镜下病理学分析及免疫组化分析,并结合文献对其病理表现、病理形态特点及鉴别诊断进行探讨.结果:20例乳腺导管内乳头状癌HE染色表现为导管明显扩张,有真性乳头,乳头之轴心由纤维血管束组成,乳头覆盖细胞有多种形式,但真正的肌上皮是缺如的.免疫组化SMA/p63显示局部或完全的肌上皮细胞消失,CEA85%的乳头状癌阳性.23例导管内乳头状瘤乳头存在肌上皮层,免疫组化结果与导管内乳头状癌相反.5例非典型乳头状瘤局部(＜1/3的区域)显示有不典型上皮增生,局部有肌上皮缺失.结论:乳腺导管内乳头状癌是一种具有乳头状癌样结构基础上的原位恶性上皮增生,但无浸润的癌.预后好于其他型导管原位癌,免疫标记SMA、p63和CEA可以帮助该肿瘤的诊断及与乳腺导管内乳头状瘤、非典型导管内乳头状瘤鉴别诊断.     

应用PCR对尖锐湿疣和外耳道乳头状瘤中HPV DNA的分型检测

从手术切除的24例女性和12例男性尖锐湿疣新鲜标本中,以及42例女性尖锐湿疣、16例男性外耳道乳头状瘤和4例女性假性湿疣的石蜡包埋标本中,提取组织的基因组DNA,用人工合成的人乳头瘤病毒6.11和16型E6区特异性寡聚核苷酸引物,通过PCR进行HPV DNA的分型检测。结果66例女性尖锐湿疣中,感染HPV6型者4例,感染11型者12例,6+11型混合感染者49例;阴性1例,总检出率达98.4％。4例女性假性湿疣中1例为HPV6型感染,阳性率25％。16例男性外耳道乳头状瘤中HPV6+11型感染者5例,6+16型感染者3例,6+11+16型多重感染者8例,阳性率100％。12例男性尖锐湿疣中,HPV11型感染者7例,6+11型4例,阴性1例,总阳性率91.6％。还对细胞学上空泡化和非典型空泡化尖锐湿疣标本的HPV感染做了比较,未发现差异。     

宫颈癌中人乳头状瘤病毒检测方法的研究进展

人乳头状瘤病毒(HPV)是宫颈癌的重要致病因子,与宫颈癌的发生密切相关。HPV的检测是宫颈癌细胞学检测方法的重要补充,为宫颈病变的诊断提供重要依据,尤其是对细胞学检查不能确定的或位于边界、退化或持续发展的病变的诊断、随诊、防治有着重要意义,是一种经济有效的诊断、筛查方法,可获得良好的社会效益。     

人乳头状瘤病毒协同60钴照射促进食管上皮细胞恶性转化

为探明人乳头状瘤病毒(HPV)和促癌剂对食管上皮致癌作用,人胚食管上皮细胞转染HPV协同60钴(60Co)放射观察其恶性转化.用HPV18E6E7AAV转染的人胚食管上皮(SHEE),培养至13代,分为4组,实验组分别用60Co2、4、8Gy照射,每周1次共4周;SHEE未经照射为对照组.细胞形态用相差显微镜观察;细胞DNA合成和定量用3H-TdR掺入和用流式细胞仪分析;染色体众数用常规方法分析;致瘤性用软琼脂培养和裸小鼠接种;HPVDNA用PCR检测.经60Co照射后细胞呈凋亡和坏死(危象期).8周后SHEE 4Gy组细胞增殖,增殖指数(34%)和3H-TdR摄入增高,软琼脂培养和裸鼠接种出现致瘤性.对照组SHEE组细胞增殖指数24%,伴有少数3H-TdR掺入,裸鼠未成瘤.染色体众数:对照组,58～62;4Gy组,63～65;两组HPV18E6E7 PCR呈阳性条带.此结果表明,用HPV18E6E7协同60Coγ射线可以使人胚食管上皮恶性转化,60Co γ射线有加速食管上皮细胞恶性转化作用.     

细菌L型与人乳头状瘤病毒致凹空细胞的比较

应用组织切片革兰染色和免疫组织化学染色等方法,对２４０例有凹空细胞的标本（鳞状细胞乳头状瘤３６例．尖锐湿疣６１例,喉癌８５例,子宫颈鳞癌５８例）进行人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）和细菌Ｌ型检测,比较两者在组织中的检出阳性率、分布及组织病理学表现。结果发现,凹空细胞中ＨＰＶ—Ａｇ检出阳性率（７２．１％）与金葡菌ＣｏｗａｎＩ株Ｌ型－Ａｇ检出阳性率（６５．０％）无显著性差异（Ｐ＞０．０５）;革兰染色有６５．４％的凹空细胞检出Ｌ型菌,ＨＰＶ－Ａｇ与Ｌ型－Ａｇ在组织中的分布和组织病理学表现基本一致。表明细菌Ｌ型与病毒具有相似的病理致病特征。细菌Ｌ型感染是引发上述病变及凹空细胞的重要原因之一。     

人乳头状瘤病毒感染与肺癌关系的研究进展

近年越来越多的研究发现肺癌组织中有人乳头状瘤病毒（human papillomavirus,HPV）DNA和癌蛋白的检出,其检出率具有地域差异性,但不同地方HPV检出亚型具有高度的一致性,主要是高危型HPV-16和HPV-18。HPV可能主要通过血液循环从宫颈癌病灶等原发部位转移到肺,从而可能诱发肺癌的发生。HPV诱发肺癌的机制可能与影响p53的失活及端粒酶的激活等有关。     

人乳头状瘤病毒诱导人胚食管上皮永生化细胞恶性转化

为了证实ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７基因诱导的人胚食管上皮永生化细胞（ＳＨＥＥ）６１代（ＳＨＥＥ６１）部份细胞（ＳＨＥＥ６１Ａ）已经恶性转化,以寻找监控细胞早期恶性转化的方法。对培养的ＳＨＥＥ第１０代（ＳＨＥＥ１０）和６１代（ＳＨＥＥ６１）细胞,用光学是为微镜和电子显微镜观察细胞形态及生长形式;用流工细胞仪分析细胞周期;用染色体Ｇ带核型分析和间期核染色体１、７、８号着丝粒探针荧光原位杂交９ＦＩＳＨ）检测细胞