二株高活力纤维素分解菌EA3-867和N2-78的获得及其特性的比较

拟康氏木霉(Trichoderma pseudokoningii Rifai)野生型菌株AS 3．3002和木3,分别经多种物理化学因素(高能电子、60钴、紫外线、亚硝基胍、硫酸二乙酯等)诱变处理后,得到二株变异菌株EA3,-867和N2-78。它仉的固体曲、液体曲和酶制剂的各项纤维紊酶活力测定结果,均比野生型菌株明显提高。N2-78菌株经摇瓶培养60小时,其CMC糖化力为255毫克葡萄糖／毫升酶液,滤纸糖化力为8．2毫克葡萄糖／毫升酶液,棉花糖化力为13．4毫克葡萄糖／毫升酶液,分别比野生型菌株提高H．6倍、5．3倍和7倍。由EA3-867和N2-78的固体曲制取的纤维素酶粗制剂,其各项纤维紊酶话力测定结果,均较Onozuka R-10纤维索酶制剂为高。上述野生型菌株及变异菌株均具有果胶酶、半纤维紊酶、淀粉酶和少置蛋白酶的活力。变异菌株中果胶酶的活力较野生型菌株为高,淀粉酶和蛋白酶活力则较低。同时,变异菌株的形态也与原始菌株有明显差异。上述四株菌的孢子致死温度相同,CMC糖化、滤纸崩溃和滤纸糖化的最适pH相近,最适温度相同,分别为pH 4.4、60℃,pH4.8、60℃和pH4.8、60℃。     

崇明八二酒曲中根霉的鉴定及其特性

从酿造崇明老白酒的八二酒曲中分离纯化得到2株根霉,结合形态学和分子生物学方法对2株根霉菌进行鉴定,并对其制成的纯种根霉曲的糖化效果、总酸和酒精产量等进行了比较。从形态及其发酵特性,可确定气生菌丝为灰黑色的R1和气生菌丝为白色的R2均为米根霉种(Rhizopus oryzae)日本根霉个种(Rhizopus japonicus Vuill.),r DNA ITS鉴定这2株菌株均为米根霉(Rhizopus oryzae)。糖化前2天,R2曲的糖化速率极显著高于R1曲,但糖化3 d~4 d时两者还原糖产量无明显差异,为28.9 g/100 m L~30.6 g/100 m L,在0.1%~0.5%的添加范围内,曲的添加量对还原糖产率和产量无显著影响。糖化2天内总酸上升迅速,且随糖化时间的延长而持续上升。R1、R2曲糖化液的总酸产量分别为3.6 g/L~5.6 g/L、8.9 g/L~10.8 g/L,其中R2曲的总酸产量超出崇明老白酒地方标准DB 31/384-2007中总酸2.5 g/L~7.5 g/L的要求范围。从总酸产量和口感方面考虑,R1曲更适合用于酿造崇明老白酒。     

液体曲制酒精研究的回顾

本文回顾了我国液体曲制酒精研究的历程。上世纪五十年代,上海和其他地区相继组织了研究团队开展液体曲生产酒精的研究,上海研究团队进行了大量的研究,作者曾亲历并参与其中。研究内容包括糖化酶活力测试、菌种筛选、培养基和培养条件的优化以及中试放大试验。几经努力,终于成功开发出液体曲,淘汰了落后陈旧的麸曲工艺,最终实现了液体曲在酒精生产上的应用。由于在液体曲研发阶段引入了抗生素生产的深层培养技术,使酒精发酵实现了机械化和自动化,这为随后的氨基酸以及其他产品的发酵生产打下了良好的基础。     

糖化酶菌种AS3·4309的自然选育

黑曲酶有较强的糖化力,我国目前大多用黑曲酶AS3.4309作为糖化酶生产菌种,但酶活力相差很大,直接影响经济效益。我们采用自然选育的方法获得优良菌种,酶活力达10000u/ml—12000u/ml,现将研究结果报告如下:     

基于气相色谱法分析T2DM患者粪便中SCFAs水平与HbA1c的相关性

目的研究2型糖尿病患者粪便中6种短链脂肪酸水平与糖化血红蛋白的相关性。方法采用气相色谱法检测粪便中短链脂肪酸的含量,并对方法学进行考察。选取2018年在本院查体的2型糖尿病患者57例,根据糖化血红蛋白水平将其分为高糖化组(糖化血红蛋白7.0,28例)与低糖化组(糖化血红蛋白≤7.0,29例)。应用气相色谱法检测两组患者粪便中6种短链脂肪酸水平,并分析6种短链脂肪酸水平与糖化血红蛋白的相关性。结果低糖化组患者粪便中乙酸、丙酸、丁酸、戊酸水平显著高于高糖化组(均P0.05),异丁酸与异戊酸水平差异无统计学意义(均P0.05)。Pearson相关性分析结果表明:在2型糖尿病患者中,糖化血红蛋白与粪便中乙酸呈负相关(r=-0.540 1,P0.000 1),与丙酸呈负相关(r=-0.358 1,P=0.006 2),与丁酸呈负相关(r=-0.421 7,P=0.001 1),与戊酸呈负相关(r=-0.326 8,P=0.042 3),与异丁酸、异戊酸无相关性。结论 2型糖尿病患者粪便中短链脂肪酸水平与糖化血红蛋白存在一定的相关性,短链脂肪酸水平的下降可能是影响血糖控制不佳的主要原因。     

抗乳腺癌药来曲唑的合成工艺改进

来曲唑是治疗晚期乳腺癌的临床一线药物。以对氰基氯苄、1,2,4-三氮唑为起始原料,合成中间体4-((1H-1,2,4-三-1-唑)甲基)苯腈(I),再将其与对氟苯腈反应合成来曲唑,工艺总产率达76.5%。为了有效地去除中间体中1,3,4-三唑基异构体(II),采用分步降温结晶的方法,降温至20℃,先析出其异构体杂质盐酸盐,过滤后再继续降温析晶,得到高纯度的中间体,从而为下一步高纯度来曲唑的获得提供了可能性。终产品来曲唑经核磁(1H-NMR)、质谱(MS)确证结构。该工艺操作简单且产率高,适合应用于工业化生产。     

用纯根霉,酵母制作甜米酒

甜米酒亦即醪糟儿,它是用米饭和甜酒曲混合,保温一定时间制成的。其中起主要作用的是甜酒曲中的根霉和酵母两种微生物。根霉是藻菌纲、毛霉目、毛霉科的一属,它能产生糖化酶,将淀粉水解为葡萄糖。根霉在糖化过程中还能产生少量的有机酸（如乳酸）。甜酒曲中少量的酵母菌,则利用根霉糖化淀粉所产生的糖酵解为酒精。所以．甜米酒既甜又微酸还醇香,口感舒适、营养丰富,深受人们喜爱。人们通常采用市售酒曲制作甜米酒。由于市售酒曲质量不够稳定,以致使甜米酒的风味变化较大,有时甚至制作失效,造成浪费、鉴于这种情况,我们在指导学生…     

一株根霉菌特性初探

根霉菌R_(2-12)系由土壤中分离,其菌丝从初始到老龄皆为白色、孢子囊黑色;对亚硝酸钠有抑制作用;最适产酶和生长温度为30℃,产酶高峰期在48—60h,酶活力1200单位/g·干曲;其曲汁液糖化可溶性淀粉经纸层析检出,酶解2h以前,主要为葡萄糖斑点外,也还有麦芽糖斑点;酶解4h前,葡萄糖斑点加强,麦芽糖斑点减弱,酶解17h后,层析斑点仅为葡萄糖。     

发酵液中曲酸的提取方法比较

190 7年斋滕在蒸米发酵物中发现曲酸(Ｋｏｊｉｃａｃｉｄ)。 1 92 4年 ,薮田测定了曲酸的结构[1,2 ] ,化学名称为 5 -羟基——— 2 -羟甲基- 1 ,4吡喃酮 ,相对分子质量 1 42 .1。曲酸具有抑菌能力、抗氧化性、与金属离子螯合作用等性质 ,因此在食品中可作为防腐剂、保鲜剂、护色剂 ;曲酸具有抑制黑色素生成酶———酪氨酸酶活性的功能 ,有显著的增白作用 ,现已在美白化妆品、浴剂及牙膏等日化工业中应用[2 ,3] ;它还可作为香料合成的中间体 ,故此国内外近来对曲酸开展了广泛的研究。目前 ,采用发酵法生产曲酸的方法较多 ,对发酵液中曲酸的提…     

应用液体曲制白酒成绩显著

我们厂是一个只有几十人的小厂,在无产阶级文化大革命和批林批孔运动的推动下,全厂革命职工以大庆为榜样,奋发图强,自力更生,大搞技术革新和技术革命,使白酒产量不断增加,产品质量不断提高。为了改善劳动条件,节约工业用粮,去年又试验成功液体曲生产白酒的新工艺。在天津工业微生物研究所的大力支持下,采用黑曲霉3912-12新菌种,以5％玉米粉、1.5％豆饼粉、1％米糠为培养基,在31±1℃、通气1:0.08(v/v/分)、搅拌160—170转/分条件下培养88小时,终止发酵,滤除菌体,以此培养液代替固体曲生产白酒,取得了显著成绩。     

发酵液中曲酸的提取方法比较

1907年斋滕在蒸米发酵物中发现曲酸(Kojic acid).1 92 4年,薮田测定了曲酸的结构[1,2],化学名称为5-羟基--2-羟甲基-1,4吡喃酮,相对分子质量142.1.曲酸具有抑菌能力、抗氧化性、与金属离子螯合作用等性质, 因此在食品中可作为防腐剂、保鲜剂、护色剂;曲酸具有抑制黑色素生成酶--酪氨酸酶活性的功能,有显著的增白作用,现已在美白化妆品、浴剂及牙膏等日化工业中应用[2, 3];它还可作为香料合成的中间体,故此国内外近来对曲酸开展了广泛的研究.目前, 采用发酵法生产曲酸的方法较多,对发酵液中曲酸的提取方法有萃取法、沉淀法、吸附法、浓缩结晶法等[1,2]. 本文采用萃取法、直接浓缩结晶法、沉淀法提取方法,分别研究了这几种方法对曲酸发酵液中曲酸的提取率、提取产品纯度等几方面的影响,结果表明直接浓缩结晶法是一种较好的曲酸提取方法.     

应用黑曲霉UV-11菌株提高乌衣红曲酒质量的试验

乌衣红曲是我国酿造黄酒的曲种之一,据分离研究主要有红曲霉、黑曲霉和酵母菌等有益微生物。产地分布于福建建瓯一带和浙江温州地区。六十年代以来,一些用红曲生产黄酒的地区由于糯米缺少,改用釉米原料后,都推广了乌衣曲酿造黄酒。因为该曲有较强的糖化     

原生质体电融合构建酵母多倍体的研究

为考察将STA基因导入酿酒酵母的可能性和研究糖化酵母在不同核倍性下STA基因的表达效应,从酿酒酵母HU-TY-1A及糖化酵母5101-7C、5206-1B、5301-14D出发,通过原生质体电融合技术,构建了11株核倍性分别为2n、4n、5n及8n的酵母多倍体.所用电融合参数为:交变电场强度200v/cm,频率1MHz;电脉冲强度9kv/cm,宽度40μsec,脉冲数2个,间隔10sec,波形为方波.在糖化酵母单一亲株融合组合中,融合株检出采用菌落形态作为初检指标取得一定效果.其它融合组合则采用遗传标记检出更为可靠.所得融合率约为5×10~(-5)—1×10~(-3).所有融合株经15代以上传代培养,遗传稳定.     

长梗木霉纤维素酶的产生及提取

对长梗木霉(Trichoderma Longibrachiatum)ANU_3-958纤维素酶的产生及提取进行了研究。结果表明,固体曲培养144小时,固体曲与浸提液比例为1:7(W/V),采用硫酸铵分级沉淀法时所得纤维素酶活力最高。所得冻干纤维素酶粉经测定:羧甲基纤维素(CMC)酶活最高为2788.89IU/g,滤纸糖酶活(FPA)最高为79.44IU/g。相对固体曲得率平均为13.28%。     

曲酸霜剂对103例色素斑病人的疗效观察

曲酸(5-羟基-2-羟甲基-4吡喃酮),是一种由微生物利用淀粉发酵的产物经提取而得的生化制品。国外报导了曲酸能抑制人体皮肤黑色素的生成。我院从1993年8月至1994年3月利用上海师大生化实业公司生产的曲酸对不同形式的色素斑病人进行了疗效观察。 资料和方法 一、曲酸霜剂配方 以高级醇、植物油、直链烃、乳化剂、水、     

KLF4在来曲唑耐药性乳腺癌病理组织中的表达与作用

目的:探讨转录因子KLF4在来曲唑(Letrozole)耐药性乳腺癌(breast cancer, BCa)病理组织和细胞中的表达特点及其在来曲唑耐药性病理发生过程中的作用特点及机制。方法:采用实时定量PCR、Western blotting和免疫组织化学法检测KLF4在来曲唑耐药性BCa病理组织和细胞中的表达特点;MTT和细胞凋亡ELISA法检测过表达外源性KLF4对BCa细胞来曲唑药物的影响;荧光素酶报告基因活性检测分析KLF4对编码雌激素受体α(ER-α)的ESR1的转录激活作用。结果:KLF4在来曲唑耐药性乳腺癌病理组织及细胞中呈异常高表达(P0.05);采用10-5 M的来曲唑处理MCF7细胞可显著抑制细胞活力,并促进细胞发生凋亡,而在细胞中过表达外源性KLF4后,这一来曲唑毒性作用可被有效逆转(P0.05),细胞活力甚至恢复到来曲唑未处理前状态;荧光素酶报告基因活性检测显示在外源性雌激素E2刺激下,GLucONTM-ESR1报告载体的荧光素酶活性显著升高,这一升高趋势可被10-5 M的来曲唑处理有效抑制;当转染外源性KLF4后,来曲唑对GLucONTM-ESR1报告载体的荧光素酶活性的抑制效应被进一步加强(P0.01)。结论:KLF4可能通过转录调控作用直接抑制ER-α表达及活性,进而参与对来曲唑耐药性病理发生过程的关键调节作用。     

响应面法优化枯草芽孢杆菌产γ-PGA的条件

对枯草芽孢杆菌液体发酵产γ-聚谷氨酸[γ-poly（glutamic acid）,γ-PGA]条件进行了优化。首先采用单因子实验筛选出最适碳源为玉米糖化液,氮源为蛋白胨和谷氨酸钠,无机盐为KH2PO4,MgCl,MnCl2和NaCl。在此基础上,利用Plackett-Burman设计对影响产量的12个因素进行评价,筛选出具有显著效应的因素蛋白胨、谷氨酸钠和NaCl。用最陡爬坡路径逼近最大产γ-PGA区域后,利用响应面中心组合设计对显著因素进行优化,得出蛋白胨、谷氨酸钠和NaCl的最佳质量分数分别为0.54%,8.13%和0.96%。优化后液体发酵液γ-PGA产量提高到29.00 g/L,比初始γ-PGA产量14.10 g/L提高了2倍。     

稻曲球脂溶性成分及其抗细菌和抗氧化活性

采用水蒸气蒸馏法从稻曲球甲醇提取物的石油醚萃取部分制备出油状物,得率为稻曲球干重的0.36%。用GC-MS鉴定出14个成分,主要成分为10,13-十八碳二烯酸甲酯(37.31%)、14-甲基十五烷酸甲酯(30.09%)、(Z,Z)-9,12-十八碳二烯酸(15.63%)、棕榈酸(10.52%)和十八烷酸甲酯(5.54%)。从石油醚萃取部分还分离到3个化合物,经理化和波谱分析鉴定为油酸(1)、正四十烷(2)和麦角甾-5,7,22-三烯-3-醇(3)。化合物3对黄瓜角斑病菌等4种供试细菌表现出较强的抑制活性,化合物1和2以及油状物表现出一定的抗氧化活性。这是首次对稻曲球中脂溶性成分及其抗细菌和抗氧化活性的报道。     

三氯化铁比色法测定曲酸含量方法的改进

曲酸(Ｋｏｊｉｃａｃｉｄ)又名5-羟基-2-羟甲基-4-吡喃酮,1907年斋滕在蒸米发酵物中发现曲酸,1924年,薮田测定了曲酸的结构[1]。曲酸在食品中可作为防腐剂、保鲜剂、护色剂,由于其特殊的性质和结构能抑制熏肉中亚硝酸钠转化为致癌的亚硝胺;曲酸具有抑制黑色素生成酶-酪氨酸酶活性的功能,有显著的增白作用,现已在美白化妆品、浴剂及牙膏等日化工业中应用[2];它还可作为香料合成的中间体,故此国内外近来对曲酸开展了广泛研究。目前,发酵法生产曲酸的方法有:表面静态培养法、通风发酵法、半连续微孔薄膜表面液态培养技术、固定化细胞技术等[3]…     

三种酒曲酿造的崇明老白酒的挥发性风味物质分析及比较

分别采用八二酒曲、纯种米根霉曲及酿酒酵母曲、纯种米根霉曲和粘红酵母曲按崇明老白酒工艺酿造老白酒,应用顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用法对样品进行挥发性物质的检测,并对其进行醇酯比、香气活力值(OAVs)的计算及主成分分析,筛选出较佳的酒曲,得出崇明老白酒的主体香气.辛酸乙酯、1-辛烯-3-醇、3-甲基丁酸乙酯、己酸乙酯和乙酸异戊酯的OAVs大于10,是崇明老白酒的主要呈香物质.由八二酒曲酿造的酒液挥发性物质总量最高,醇酯比为5.89∶1,呈香物质以具蘑菇香的1-辛烯-3-醇为主.米根霉和酿酒酵母曲酿造的酒液酯类、芳香族化合物种类最多,醇酯比3.24∶1,香气以丁酸乙酯的甜香、苯乙醛、苯乙醇和乙酸苯乙酯的玫瑰花香为主要特征.米根霉和粘红酵母曲酿造的酒液挥发性化合物总量最低,醇酯比为2.86,主要香气特征为辛酸乙酯的甜香和己酸乙酯的水果香.纯种曲酿造的酒液的香气类型、风味种类比例、呈香物质的丰富程度均优于八二酒曲酿造的酒液.