一种云芝发酵所产胃蛋白酶抑制剂的纯化及部分性质研究

云芝发酵液经超声波细胞破碎,离心和大孔树脂脱色得上清液.上清液再经DEAE-52、Mono Q离子交换层析和UltroGel ACA-54凝胶过滤分离得到一种胃蛋白酶抑制剂.它的成分是蛋白质,经UltroGel ACA-54凝胶过滤和SDS-PAGE鉴定为单亚基,相对分子量为22.31 kDa.该抑制剂热稳定性良好,对胃酶有很强的抑制作用,半抑制浓度IC50值为29.26 μg/mL,抑制类型属于非竞争和反竞争混合型抑制模式,其Ki值为0.996 μmol/L.     

野生苋属植物籽实中新型α淀粉酶抑制剂的分离纯化及其性质研究(英文)

从野生苋属植物 (Amaranthuspaniculatus)籽实中分离纯化出α淀粉酶的一种新型蛋白质类抑制剂 .该抑制剂被命名为WAI 1 .MALDI TOF质谱测得其分子量为 986 5 ,是目前报道的α 淀粉酶的蛋白质类抑制剂中分子量最小的 .初步的组成和结构分析结果表明 ,WAI 1由 9个氨基酸残基组成 ,其N端为焦谷氨酸 .直接用RP HPLC纯化后 ,WAI 1能在弱酸性条件下 ,以非竞争性抑制作用方式有效抑制美洲蜚蠊消化道α淀粉酶的活性 ,最适抑制pH 6 0 ,但对人唾液淀粉酶活性无影响 .WAI 1在 37℃下与酶预温浴约 30min后显示最大抑制活性 .当α淀粉酶用量一定时 ,α淀粉酶活性的抑制率在约 5 0 %的范围内随抑制剂 酶比例的增大而呈线性增加 ,超过 5 0 %后 ,抑制率随抑制剂 酶比例的增大而缓慢上升 ,最终达到最大值 (约 6 5 % ) .     

选择性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布抑制胃癌多药耐药基因表达的实验研究

目的:探讨选择性环氧合酶(COX-2)抑制剂塞来昔布对胃癌细胞株BGC823多药耐药(mdr)1表达的影响.方法:胃癌细胞株BGC823经浓度分别为0、10、100μ mol/L的塞来昔布处理后,酶联免疫吸附试验检测塞来昔布对胃癌细胞前列腺素E2(PGE2)分泌的影响,24、48 h后用RT-PCR检测多药耐药(mdr)1 mRNA表达,48 h后用免疫细胞化学染色法检测P-gp表达.结果:塞来昔布可显著抑制胃癌细胞株BGC823 PGE2分泌.并呈浓度依赖性(P<0.05).不同浓度塞来昔布作用于细胞后,胃癌细胞株BGC823的mdrl/P-gp表达受不同程度抑制,100μ mol/L的塞来昔布对mdrl mRNA表达抑制作用强于10μ mol/L(P<0.01).不同浓度药物与测量时间为交互作用,作用48h与24h相比,塞来昔布对mdrl mRNA表达的抑制作用更强(P<0.01).结论:塞来昔布可抑制BGC823的mdrl/P-gp表达,且呈剂量效应关系.塞来昔布可能通过抑制COX-2活性,抑制COX-2下游产物PGE2表达,从而抑制P-gp表达.选择性COX-2抑制剂可能有助于减轻肿瘤细胞对化疗药物的耐药性.     

酶解大豆蛋白产天冬氨酸蛋白酶抑制剂的研究

本文通过采用可控酶解的方式酶解大豆蛋白获得了一种源自大豆的天冬氨酸蛋白酶抑制剂SAPI( soy aspartic proteinase inhibitor).酶解液经过DEAE-52阴离子交换层析、Superdex Peptide 10/300 GL凝胶层析、SOURCE 15RPC反相层析分离后最终比抑制活力为254.2 IU/mg,纯化倍数为62.SAPI对胃蛋白酶(3000U)半数抑制浓度IC50为25.67 μg/mL,有良好的热稳定性,属于一种非竞争性抑制剂.     

流感病毒神经氨酸酶抑制剂的筛选

以神经氨酸酶为药物靶点筛选神经氨酸酶抑制剂, 是研究和开发抗流感病毒药物的重要途径. 应用虚拟药物筛选方法, 从化合物数据库中选出部分待测化合物, 然后应用已建立的 神经氨酸酶抑制剂的高通量筛选模型, 检测了这些化合物的抑制活性, 从中发现了3个活性较高、结构新颖的化合物, 其IC50在0.1~3 μmol/L之间, 这些活性化合物的结构特点, 对于新型神经氨酸酶抑制剂的设计与开发, 将提供重要的信息指导. 流感病毒神经氨酸酶抑制剂的筛选结果表明, 虚拟筛选技术与高通量筛选技术的合理结合, 将有利于促进药物筛选与药物发现.     

蒌蒿过氧化物酶特性及其抑制条件的研究

对蒌蒿中所含的过氧化物酶的特性及其抑制条件进行研究 ,结果表明 ,蒌蒿中过氧化物酶活性的适宜pH为 5 .0和 6 .6 7,适宜温度为 2 0℃ ,四种抑制剂中 ,Vc抑制作用最显著 ,其次为NaHSO3 和柠檬酸 ,EDTA Na2 抑制作用不明显     

四川大熊猫繁育基地基本建成大熊猫细胞库

德国汉堡大学实验微生物学和免疫学学院目前开发出一种新抑制剂,它通过干扰和破坏人体内一种对艾滋病病毒复制有重要影响的酶,间接抑制病毒在体内扩散。目前用于治疗艾滋病的抑制剂大多数是破坏病毒本身产生的酶,这项研究开发出的新抑制剂可以阻碍人体内自然存在的一种酶发挥作用,而这种酶对艾滋病病毒复制很重要。试验发现,     

蕃茄蛋白酶抑制剂Ⅱa,Ⅱb的分离纯化及性质研究

经硫酸铵分级、ＣＭ－纤维素柱层析和Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－７５柱层析,从野生型秘鲁蕃茄未成熟果实的匀浆液中分离纯化了蛋白酶抑制剂Ⅱａ,Ⅱｂ。纯化的蛋白酶抑制剂经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定呈单一带,分子量均为１７ｋＤ。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ结果表明蛋白酶抑制剂Ⅱａ,Ⅱｂ均与马铃薯蛋白酶抑制Ⅱ有血清学上的交叉反应。抑制蛋白酶活性测定显示两种蛋白酶抑制剂都表现强的抑制胰凝乳蛋白酶的活性,但对胰蛋白酶的     

化学抑制剂Woodward's Reagent K对来源于Erwinia rhapontici NX-5蔗糖异构酶的抑制动力学

从重组大肠杆菌E.coli BL21(p ET22b-palⅠ)中纯化得到来源于Erwinia rhapontici NX-5的蔗糖异构酶(sucrose isomerase,SIase,EC 5.4.99.11),以纯酶为对象考察其酶活力抑制动力学。结果表明:SIase纯比酶活1 512.77 U/mg,动力学常数Km=260 mmol/L,Vmax=39.41μmol/(L·s)。以化学抑制剂Woodward's Reagent K(WRK)对重组蔗糖异构酶进行抑制反应,反应体系中随着WRK浓度的升高,SIase与底物蔗糖的亲和力常数Km增大,最大反应速度Vmax在一定范围内保持稳定。通过对SIase的抑制动力学分析可得到,WRK对SIase的抑制类型为可逆的竞争性抑制,这可能与WRK与蔗糖的结构类似,与可竞争性的结合SIase的活性中心有关。     

几种酶活抑制剂对红曲霉色素合成的影响

红曲色素是天然安全的色素和防腐剂,根据代谢数据库选择了6种代谢途径关键酶的抑制剂,在基本培养基中考察这些抑制剂对红曲霉生长和合成色素的影响。甲羟戊酸合成途径的抑制剂邻氨基苯甲酸和3,4-二羟苯甲酸对红曲霉生长和色素生物合成都没有影响;莽草酸途径关键酶氨基苯甲酸合成酶的抑制剂三甲胺不抑制红曲霉的生长和色素的合成。在不影响红曲霉生长的浓度范围内,聚酮途径中β-酮酯酰-ACP合成酶的专性抑制剂碘乙酰胺(0.5mmol/L)抑制红曲色素合成程度达64.7%,非专性抑制剂咪唑(1mmol/L)抑制幅度达60%,聚酮途径硫酯酶的抑制剂2,4-二硝基氟苯(0.5mmol/L)强烈抑制红曲霉合成色素的活性,抑制程度达91.5%。相关酶活抑制的试验数据显示红曲霉可能经过聚酮途径合成红曲色素。