力竭性运动对大鼠肝脏线粒体氧化磷酸化偶联的影晌

本文以ＳＤ大鼠三级递增负荷力竭性跑台运动为疲劳模型,分别测定了运动后即刻肝脏线粒体：１．呼吸链复合体Ⅰ＋Ⅲ和Ⅱ＋Ⅲ电子传递与质子泵出比值（Ｈ＋／２ｅ）;２．以苹果酸＋谷氨酸（Ｍ＋Ｇ）和琥珀酸（Ｓ）为底物的呼吸控制：态３呼吸速率（Ｒ３）、态４呼吸速率（Ｒ４）、呼吸控制率（ＲＣＲ）和磷／氧比（Ｐ／Ｏ）。结果表明：两种呼吸底物启动的线粒体态４呼吸速率分别升高６４．４６和２３．５４％（Ｐ＜０．００１和Ｐ＜０．０５）;呼吸链复合体Ⅰ＋Ⅲ和Ⅱ＋Ⅲ的总Ｈ＋／２ｅ分别降低１８．６３和１５．８９％（均Ｐ＜０．０１）。两种呼吸底物的ＲＣＲ和Ｐ／Ｏ呈显著降低（均Ｐ＜０．０５）;Ｍ＋Ｇ为呼吸底物的态３呼吸速率也呈显著增加（Ｐ＜０．０１）,Ｓ为呼吸底物的态３呼吸速率略有增高（Ｐ＞０．０５）。提示,线粒体质子漏增加,呼吸链电子传递与质子泵出偶联程度下降,氧化磷酸化脱偶联导致无效氧耗增多,可能是运动性疲劳状态下线粒体氧利用率下降的重要机制。     

丹参酮Ⅱ－A磺酸钠对鼠肝线粒体功能的影响

利用大鼠肝脏线粒体为材料,以琥珀酸为底物,研究了不同浓度的丹参酮Ⅱ－Ａ磺酸钠对线粒体态４、态３呼吸及呼吸控制率,线粒体跨膜电位,线粒体呼吸链复合体（Ⅱ＋Ⅲ）电子传递及质子转移活性的影响。结果证明丹参酮ⅡＡ－磺酸钠是线粒体呼吸链复合体（Ⅱ＋Ⅲ）的有效抑制剂。文中对丹参酮ⅡＡ－磺酸钠在心肌缺血再灌注过程中的保护作用的分子机理进行了讨论。     

丹参酮Ⅱ—A磺酸钠对鼠肝线粒体功能的影响

利用大鼠肝脏线粒体为材料,以琥珀酸为底物,研究了不同浓度的丹参酮Ⅱ－Ａ磺酸钠对线粒体态４、态３呼吸及呼吸控制率,线粒体跨膜电位,线料呼吸链复合体（Ⅱ＋Ⅲ）电子传递及质子转移活性的影响,结果证明丹参酮ⅡＡ－磺酸钠是线粒体呼吸链复合体（Ⅱ＋Ⅲ）的有效抑制剂,文中对丹参酮ⅡＡ－磺酸酸钠在心肌缺血再灌注过程中的保护作用的分子机理进行了讨论。     

线粒体呼吸链复合体Ⅱ＋Ⅲ的电子传递与质子转移的偶联

研究了鼠肝线粒体内膜体呼吸链复合体Ⅱ＋Ⅲ的Ｈ＾＋／２ｅ比与△ψ的相关性及其调节因素,证明：（１）用光谱法测得复合体Ⅱ＋Ⅲ的电子传递与质子转换初速度的Ｈ＾＋／２ｅ比值接近４,与铁氰化钾脉冲法测得的结果相同,Ｈ＾＋／２ｅ随着△μＨ＾＋升高而逐渐下降,荧光透析法测定不同Ｆｅ＾３＋还原速率建立的不同△ψ时,证明Ｈ＾＋回漏对△ψ和Ｈ＾＋泵出速度的依赖性,讨论了呼吸链复合体Ⅱ＋Ⅲ电子传递与质子转移之间的偶联以     

线粒体呼吸链复合体Ⅱ＋Ⅲ的电子传递与质子转移的偶联

研究了鼠肝线粒体内膜体呼吸链复合体Ⅱ＋Ⅲ的Ｈ~＋／２ｅ比与Δψ的相关性及其调节因素。证明：（１）用光谱法测得复合体Ⅱ＋Ⅲ的电子传递与质子转移初速度的Ｈ~＋／２ｅ比值接近４,与铁氰化钾脉冲法测得的结果相同。Ｈ~＋／２ｅ随着ΔμＨ~＋升高而逐渐下降。荧光透析法测定不同Ｆｅ~（３＋）还原速率建立的不同Δψ时,证明Ｈ~＋回漏对Δψ和Ｈ~＋泵出速度的依赖性。讨论了呼吸链复合体Ⅱ＋Ⅲ电子传递与质子转移之间的偶联以及“Ｒｅｄｏｘｓｌｉｐ”和“ｐｒｏｔｏｎｌｅａｋ”的现象。（２）抑制剂实验说明线粒体内膜中Ｃａ~（２＋）、Ｐｉ与Ｈ~＋的协同运输系统对线粒体内膜Ｈ~＋泵出及Ｈ~＋回漏作用有一定的调控作用。     

运动性疲劳状态下大鼠骨骼肌线粒体氧化磷酸化功能的研究

目的和方法 :以SD大鼠递增负荷力竭性跑台运动为运动性疲劳模型 ,分别测定运动后即刻骨路肌线粒体 :①呼吸链复合体Ⅱ Ⅲ电子传递与质子泵出比值 (H /2e) ;②以琥珀酸 (S)为底物的呼吸控制 :态 3呼吸速率(R3 )、态 4呼及速率 (R4 )、呼吸控制比 (RCR)和磷 /氧比 (P/O) ;②H ATPase合成活力 ,探讨疲劳性运动中线粒体氧化磷酸化功能改变的机理。结果 :力竭性运动后以S为底物的线粒体R4升高 2 1.10 % (P <0 .0 5 ) ;呼吸链复合体Ⅱ Ⅲ的总、净H 2e分别降低 8.5 3和 19.5 1% (均P <0 .0 5 )。底物的RCR和P/O呈显著降低 (均P <0 .0 5 ) ,而底物的R3则有所增加 (P >0 .0 5 ) ,H ATPase合成活力降低 16.68% (P <0 .0 5 )。结论 :线粒体质子漏增加 ,呼吸链电子传递与质子泵出偶联程度下降 ,氧化磷酸化脱偶联导致无效氧耗增多 ,可能是运动性疲劳状态下线粒体氧利用率下降的重要机制。     

脱落酸对玉米胚芽和大豆子叶线粒体呼吸的影响

在提取玉米和大豆线粒体后,以ＡＢＡ处理线粒体,发一在不同底物存在下,ＡＢＡ均可增加线粒体的耗氧速度,呼吸速率随ＡＢＡ浓度变化的结构常数值为１．４３μｍｏｌ／Ｌ。ＡＢＡ对４态呼吸的促进作用更为显著,因而导致呼吸控制下降,Ｐ／Ｏ比降低。蛋白合成抑制剂环己酰亚胺不影响ＡＢＡ的效应。     

心肌急性梗塞后心室重构早期心肌线粒体呼吸功能和电子…

结扎大鼠冠状动脉前降支造成急性心肌梗塞（ＡＭＩ）,观察在ＡＭＩ后心室重构早期３、７、１４ｄ心肌线粒体呼吸功能和电子传递组分的改变。结果表明：在心室重构早期,心肌线粒体呼吸ＩＶ态（Ｒ４（明显增高（Ｐ〈０．０２）;呼吸Ⅲ态（Ｒ３）、呼吸控制率（ＲＣＲ）、磷／氧比（Ｐ／Ｏ）、氧化磷酸化速率（ＯＰＲ）明显下降（Ｐ〈０．００１）;呼吸链电子传递组分显著降低（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）。提示：ＡＭＩ后心室重     

线粒体呼吸链膜蛋白复合体的结构

线粒体作为真核细胞的重要“能量工厂”,是细胞进行呼吸作用的场所,呼吸作用包括柠檬酸循环和氧化磷酸化两个过程,其中氧化磷酸化过程的电子传递链（又称线粒体呼吸链）位于线粒体内膜上,由四个相对分子质量很大的跨膜蛋白复合体（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、和Ⅳ）、介于Ⅰ／Ⅱ与Ⅲ之间的泛醌以及介于Ⅲ与Ⅳ之间的细胞色素c共同组成。线粒体呼吸链的功能是进行生物氧化,并与称之为复合物V的ATP合成酶（磷酸化过程）相偶联,共同完成氧化磷酸化过程,并生产能量分子ATP。线粒体呼吸链的结构生物学研究对于彻底了解电子传递和能量转化的机理是至关重要的,本文分别论述线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ的结构,并跟踪线粒体呼吸链超复合体的结构研究进展。     

心肌急性梗塞后心室重构早期心肌线粒体呼吸功能和电子传递组分的改变

结扎大鼠冠状动脉前降支造成急性心肌梗塞（ＡＭＩ）,观察在ＡＭＩ后心室重构早期３、７、１４ｄ心肌线粒体呼吸功能和电子传递组分的改变。结果表明：在心室重构早期,心肌线粒体呼吸Ⅳ态（Ｒ＿４）明显增高（Ｐ＜０．０２）;呼吸Ⅲ态（Ｒ＿３）、呼吸控制率（ＲＣＲ）、磷／氧比（Ｐ／Ｏ）、氧化磷酸化速率（ＯＰＲ）明显下降（Ｐ＜０．００１）;呼吸链电子传递组分显著降低（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。提示：ＡＭＩ后心室重构早期心肌线粒体呼吸和氧化磷酸化功能明显受损,是ＡＭＩ后慢性心力衰竭的重要原因。     

贵州四个山羊品种mtDNA多态性及起源分化

采用１５种限制性内切酶,研究贵州省４个山羊品种共９３只个体的线粒体ＤＮＡ多态性。其中ＢｏｍＨＩ、ＨｉｎｄⅢ和ＳａｌⅠ３种酶的酶切类型存在多态。共检测到１８种限制性态型,归结为３种ｍｔＤＮＡ单倍型。单倍型Ⅰ、Ⅱ在贵州山羊４个品种分布频率较高,分别为７７．４２％和２１．５０％,单倍型Ⅲ分布频率较低（１．０８％）;品种间亲缘关系聚类分析表明白山羊和黑山羊亲缘关系最近,其次为黔林羊,而与小香羊的亲缘关系最     

脱落酸对玉米胚芽和大豆子叶线粒体呼吸的影响

在提取玉米和大豆线粒体后,以ABA处理线粒体,发现在不同底物存在下,ABA均可增加线粒体的耗氧速率,呼吸速率随ABA浓度变化的结合常数（Kd）值为1．43μmol／L。ABA对4态呼吸的促进作用更为显著,因而导致呼吸控制下降,P／O比降低。蛋白质合成抑制剂环己酰亚胺不影响ABA的效应。以ABA预处理大豆子叶,虽然也促进了呼吸作用,但不改变呼吸控制和P／O.     

血管紧张素Ⅱ对大鼠心肌肌浆网Ca~(2+),Mg~(2+)-ATPase基因转录调节的影响

观察血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）对心肌肌浆网Ｃａ２＋,Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ基因（ＳＥＲＣＡ２ａ）转录调节的影响,评价ＤＭＰ８１１对此效应的干预作用．６周龄雄性ＳＤ大鼠随机分为３组,每组６只．组１：生理盐水输注;组２：ＡｎｇⅡ输注＋ＤＭＰ８１１管饲（３ｍｇ·ｄ－１·ｋｇ－１）;组３：ＡｎｇⅡ输注（２００ｎｇ·ｍｉｎ－１·ｋｇ－１．１周后称其体重,取心脏并称重,提取心脏总ＲＮＡ后采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ的方法检测ＳＥＲ－ＣＡ２ａ的转录水平,采用ＲＴ－ＰＣＲ检测ＡｎｇⅡ１型受体（ＡＴ１）ｍＲＮＡ水平．实验后,组３心重（ＣＷ）、心重／体重（Ｃ／Ｂ）、ＡＴ１受体转录水平均高于组１（分别增加４．７±０．４％,４．９±０．９％和２４．７±３．５％;Ｐ＜０．０１）,而ＳＥＲＣＡ２ａ基因转录水平显著低于组１（降低２０．１±３．０％,Ｐ＜０．０１）,并且ＳＥＲＣＡ２ａｍＲＮＡ水平与ＡＴ１受体ｍＲＮＡ水平呈负相关（ｒ＝－０．７４,Ｐ＜０．０１）．ＡｎｇⅡ导致的上述改变能被ＤＭＰ８１１完全阻断．ＡｎｇⅡ通过其Ⅰ型受体的介导,诱导了ＳＥＲＣＡ２ａ的转录下调     

钙过负荷和丹参酮对线粒体脂质过氧化的影响

用ＥＳＲ自旋捕集技术捕捉到Ｆｅ２＋启动的心肌线粒体膜脂质过氧化过程中产生的脂类自由基Ｌ·（ａＮ＝１５．６Ｇ,ａＨ＝２．９７Ｇ）。钙过负荷时,钙离子使线粒体产生的脂类自由基增加,当钙浓度为３０μｍｏｌ／Ｌ·ｍｇＰｒ时,产生的脂类自由基约增加３２％。丹参酮可清除Ｆｅ３＋启动的线粒体膜脂质过氧化过程中产生的脂类自由基。当丹参酮浓度为０．８ｍｇ／ｍｇＰｒ时,清除率达到７０％左右。钙过负荷时丹参酮仍能有效清除脂类自由基。另外,还发展了用自旋探针ＣＴＰＯ测量线粒体氧消耗的方法,检测氧消耗所需样品量比Ｃｌａｒｋ电极少几十倍。用此方法测量小鼠心肌线粒体不同状态的氧消耗和呼吸控制率,证明一定浓度的Ｃａ２＋和Ｆｅ２＋影响线粒体的呼吸功能．     

黑曲霉木聚糖酶的纯化与性质

由凝胶电泳酶谱检测到黑曲霉１４９发酵液中存在两型木聚糖酶,依次为Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ．通过硫酸铵分级沉淀及ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０柱层析分别将Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ纯化到凝胶电泳均一。由ＳＤＳ一凝胶电泳和浓度梯度凝胶电泳测得Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ的分子量分别为３７ｋＤａ,７６ｋＤａ,２４ｋＤａ和２３ｋＤａ,Ｘ－Ⅰ具有亚基。二者的含糖量分别为２７６％和７．３％。Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ最适反应温度分别为５０℃和５５℃,ｐＨ为４６和５．２。在ｐＨ４．６～９．２和ｐＨ４．０～１０．０之间Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ活力稳定。５０℃保温２４ｈ,Ｘ－Ⅰ活力仍为１００％,而Ｘ－Ⅱ的活力已降为２．８％。ＨｇＣｌ２和ＡｇＮＯ３显著抑制Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ的活力。Ｘ－Ⅰ与Ｘ－Ⅱ水解不同来源的木聚糖,其产物有所不同。     

腺苷A_1受体激动剂对兔血一氧化氮水平及急性心肌梗塞范围的影响

为了解腺苷Ａ１受体激动剂ＲＰＩＡ对血一氧化氮（ＮＯ）水平及急性心肌梗塞范围的影响,２０只新西兰兔随机分为四组：Ⅰ,前降支缺血６０ｍｉｎ,再灌注９０ｍｉｎ;Ⅱ,缺血前１５ｍｉｎ给予ＲＰＩＡ（０．３ｍｇ／ｋｇ）ｉｖ,余同Ⅰ组;Ⅲ,两次缺血１０ｍｉｎ,间隔１０ｍｉｎ然后缺血６０ｍｉｎ,再灌注９０ｍｉｎ;Ⅳ,缺血前１５ｍｉｎ给予选择性腺苷Ａ１受体拮抗剂ＤＰＣＰＸ（１．０ｍｇ／ｋｇ）ｉｖ余同Ⅲ组。分别测定缺血再灌注期血ＮＯ水平、心率、平均血压及ｄｐ／ｄｔ,实验结束经ＴＴＣ染色测定心肌梗塞范围。结果显示,ＲＰＩＡｉｖ后血ＮＯ水平迅速上升达基础值二倍,并在整个缺血期持续高于对照组,同时伴有心率（２６．３％）和平均血压（１７．３％）的下降,ｄｐ／ｄｔ测值各组无明显差异。心肌梗塞范围,Ⅰ．２３．１±９．４％,Ⅱ．１２．１±２．２％,Ⅲ．１１．４±３．０％,Ⅳ．２１．４±７．８％。结论：缺血预适应（ＩＰＣ）减少急性心肌梗塞范围,腺苷Ａ１受体激动剂可以达到ＩＰＣ效果,而该受体阻滞可以取消ＩＰＣ效果;血ＮＯ水平的升高有可能是ＲＰＩＡ引起ＩＰＣ效应的原因之一。     

人免疫重建SCID小鼠的研究

４２只不渗漏ＳＣＩＤ小鼠分别腹腔注射经冷冻、复苏的胎肝或胎肝加胎胸腺细胞,每鼠２×１０７活细胞,建立人胎肝细胞ＳＣＩＤ小鼠模型Ⅰ和Ⅱ,研究人免疫系统。用人肝癌细胞（ＨＨＣＣ）免疫,ＳＣＩＤ鼠出现初始免疫答应,血清人ＩｇＧ平均滴度分别达到５１３．０±８４．２ｎｇ／ｍｌ和７１９．７±２０１．６ｎｇ／ｍｌ,ＩｇＧ峰值分别出现在免疫重建后１０～１２和１０～１４周,特异性抗ＨＨＣＣ抗体滴度分别达到１∶７０．４±３５．０５和１∶２９４．４±１６８．５２,免疫重建后７～８周龄,ＡＢＣ法免疫组化染色,免疫鼠模型肝、脾中可检出标记人的ＣＤ３＋、ＣＤ２０＋Ｔ和Ｂ淋巴细胞克隆和细胞岛。流式细胞仪检测了抗原免疫组和模型组外周血、脾脏、肝脏的人ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ１９＋、ＣＤ２０＋标记的淋巴细胞数,其中标记ＣＤ２０＋淋巴细胞平均值外周血３．１２±３．０３％、脾脏１．４±０．２０％、肝脏２．３２±１．４９％。而无抗原免疫的模型组在肝脏仅有微量或检测不到人标记淋巴细胞。     

皖南尖吻蝮蛇出血毒素生物学活性与圆二色性关系的研究

用远紫外ＣＤ谱研究了皖南尖吻蝮蛇蛇毒３个出血毒素ＡａＨⅠ、ＡａＨⅢ和ＡａＨⅣ的溶液构象,ＡａＨⅠ的α螺旋、β折叠、β转角和无规卷曲的含量分别为２５．８％、１２．７％、２６．８％和３４．７％;ＡａＨⅢ的二级结构含量分别为２３．９％、２０．６％、２３．７％和３１．８％;而ＡａＨⅣ分别为１８．２％、３１．０％、１７．２％和３３．６％。当ｐＨ小于４．０或ｐＨ大于１１．０时,３种出血毒素α螺旋减少而β折叠增多,同时３种出血毒素的酪蛋白水解活性显著下降。ＥＤＴＡ抑制酪蛋白水解活性,表明３种出血毒素均是金属蛋白酶。ＥＤＴＡ、Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋、Ｃａ２＋和Ｍｇ２＋能改变３种出血毒素的二级结构,并影响酪蛋白水解活性。     

川芎嗪联用L-精氨酸对缺血/再灌注损伤兔心肌线粒体功能的影响

探讨川芎嗪联用L-精氨酸对心肌缺血／再灌注损伤（MI／RI）时心肌细胞线粒体功能的影响。方法：选用日本大耳白兔50只,随机分为正常对照组（A组）、心肌缺血／再灌注组（B组）、心肌缺血／再灌注＋川芎嗪治疗组（C组）、心肌缺血／再灌注＋L-精氨酸治疗组（D组）和心肌缺血／再灌注＋川芎嗪＋L-精氨酸治疗组（E组）。观察心肌线粒体呼吸功能、Ca^2＋浓度（[Ca^2＋]m）、丙二醛浓度（MDA）、超氧化物歧化酶活性（SOD）和心肌组织三磷酸腺苷（ATP）、能荷（EC）的变化。结果：C、D、E组与B组比较,线粒体呼吸控制率（RCR）、Ⅲ态呼吸速率（ST3）、SOD明显升高,Ⅳ态呼吸速率（ST4）、[Ca^2＋]m、MDA显著降低,心肌组织ATP、EC均明显增高;且与A组比较,E组上述指标均无明显差异。结论：川芎嗪联用L-精氨酸可通过降低氧自由基水平和减轻钙超载,而改善缺血／再灌注损伤心肌的线粒体功能。     

新疆呼图壁种牛场地区13种优势植物水溶性盐分的含量特点及数量分析

通过对新疆呼图壁种牛场地区１３种耐盐植物水溶性盐分含量的分析,结果阐述了盐分分布和积累的特点：１）大部分植物在盐分含量水平上是：Ｎａ＾＋〉Ｋ＾＋〉Ｍｇ＾２＋〉Ｃａ＾２＋,Ｃｌ＾－〉ＳＯ４＾２－〉ＨＣＯ３＾－〉ＣＯ３＾２－,Ｎａ＾＋超过２００００μｇ／ｇ,Ｃａ＾２＋不足８００μｇ／ｇ;Ｃｌ＾－达４．１６％,ＣＯ３＾２－仅为０．１１％。全盐量平均为２５．８１％;２）ＣＯ３＾２－、ＨＣＯ３＾－和Ｃａ＾２