L-精氨酸和氨基胍对大鼠内毒素性肺损伤治疗作用的实验研究

目的：观察L-精氨酸（L-arginine）和一氧化氮合酶抑制剂氨基胍（AG）对内毒素性肺损伤的治疗作用。方法：采用静脉注射脂多糖（LPS）制备内毒素性肺损伤大鼠模型。将48只SD大鼠随机分为6组：空白对照组、LPS模型组、AG治疗组（50mg／kg）、L-精氨酸（500mg／kg）、（250mg／kg）和L-精氨酸（250mg／kg）＋AG（50mg／kg）治疗组。经腹腔给药,实验过程中监测大鼠平均动脉压（MAP）,定时取静脉血测定血浆中NO含量,于规定时间处死大鼠,迅速取出肺脏,观察LPS引起大鼠急性肺损伤后肺系数、肺水肿情况和肺组织中丙二醛（MDA）含量、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化,以及L-精氨酸和氨基胍分别单独给药和二者联合给药对内毒素性肺损伤的治疗作用。结果：氨基胍可明显升高MAP,降低肺系数和肺含水量,减少血浆中NO含量,可显著降低肺组织中NOS活性,减少MDA含量,增强SOD活性,改善肺损伤;L-精氨酸可明显降低肺系数和肺含水量,减少MDA含量,增强SOD活性;L-精氨酸与氨基胍联合应用亦得到上述类似结果。结论：L-精氨酸和氨基胍分别单独给药以及二者联合给药对内毒索性肺损伤均具有治疗作用。     

内毒素致大鼠肺损伤时肺组织β受体的变化与膜磷脂代谢的…

采用放射性配基结构分析法,观察内毒素致大鼠急性肺损伤时肺β－肾上腺素能受体（β－ＡＲ）的变化。分别用荧光偏振法和高效液相色谱测定肺组织膜脂流动性和磷脂含量。结果显示：（１）静脉注射内毒素后４ｈ,大鼠肺β－ＡＲ的最大结合容量明显降低,较对照组减少４７％;（２）内毒素组肺膜脂流动性和磷脂含量均明显降低,同时伴有肺组织磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）活性升高。提示：（１）β－ＡＲ下调导致其介导的功能减弱,在内毒素     

抗炎多肽AF-2对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的保护

目的研究抗炎多肽AF-2（antiflammin-2）对内毒素（LPS）诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用。方法Balb/c雄性小鼠37只,随机分为3组,对照组（n=10）、急性肺损伤（ALI）模型组（n=14）和AF-2治疗组（n=13）,模型组和治疗组腹腔注射大肠杆菌内毒素复制小鼠肺损伤模型,治疗组同时注射抗炎多肽AF-2,对照组和模型组注射等量的生理盐水。在0h、6h和12h记录动物的呼吸频率,12h处死动物,肺组织切片观察肺病理变化,ELISA法检测血清细胞因子。结果6h和12hAF-2治疗组动物呼吸频率均低于模型组。肺组织病理显示AF-2对LPS诱导的小鼠ALI肺组织的渗出、炎细胞浸润有一定的抑制作用。AF-2治疗组与ALI模型组比较血清IL-6水平明显下降。结论AF-2对内毒素诱导的小鼠急性肺损伤有一定的保护作用。     

一氧化氮和前列腺素在内毒素引起降钙素基因相关肽释放中的作用

本实验在离体灌流大鼠肠系膜动脉床研究内毒素引起降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）释放的机制。内毒素（５０μｇ／ｍｌ）使ＣＧＲＰ释放增加１６倍,一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）底物Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）能促进内毒素引起的ＣＧＲＰ释放（４１％）。ＮＯＳ抑制剂Ｎ￣Ｇ－硝基－Ｌ－精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）及鸟苷酸环化酶抑制剂甲基蓝（ＭＢ）能使内毒素的上述作用分别降低３５％与３６％,Ｌ－精氨酸（ｔ－Ａｒｇ）能逆转Ｌ－ＮＮＡ的作用。提示内毒素的作用机制中部分是通过一氧化氮引起细胞内ｃＧＭＰ升高而介导的。用化学方法破坏血管内皮细胞,Ｌ－ＮＮＡ与Ｌ－Ａｒｇ的上述作用依然存在。提示内毒素主要是激活血管周围感觉神经末梢的神经源ＮＯＳ,而非内皮源ＮＯＳ。环氧化酶抑制剂消炎痛（Ｉｎｄｏ）与布洛芬（Ｉｂｕ）也能使内毒素引起ＣＧＲＰ释放的作用分别降低３４％与３９％,但与Ｌ－ＮＮＡ的作用不能迭加。提示内毒素可能通过激活神经源ＮＯＳ进而引起环氧化酶活化而起作用。     

内毒素致大鼠肺损伤时肺组织β受体的变化与膜磷脂代谢的关系

采用放射性配基结合分析法,现察内毒大致大鼠急性肺损伤时肺β－肾上腺素能受体（β－ＡＲ）的变化。分别用荧光偏振法和高效液相色谱测定肺组织细胞膜脂流动性和磷脂含量。结果显示：（１）静脉注射内毒素后４ｈ,大鼠肺β－ＡＲ的最大结合容量明显降低,较对照组减少４７％;（２）内毒素组肺膜脂流动性和磷脂含量均明显降低,同时伴有肺组织磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）活性升高。提示：（１）β－ＡＲ下调导致其介导的功能减弱,在内毒素诱导的大鼠急性肺损伤发病机理中起一定作用;（２）ＰＬＡ２激活是膜磷脂减少的重要原因,后者可导致膜脂流动性降低,结果引起β－ＡＲ的侧向扩散和旋转运劝减弱,从而减少β－ＡＲ与配基结合的机率,出现β－ＡＫ下调。     

糖尿病大鼠肠系膜动脉降钙素基因相关肽释放减少以及一氧化氮的作用

我们以前的工作已表明,内毒素可引起降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）从大鼠肠系膜动脉床释放,此作用部分是通过一氧化氮介导的。我们在离体肠系膜动脉床研究了内毒素引起糖尿病大鼠ＣＣＲＰ释放的改变以及一氧化氮所起的作用。采用ＣＣＲＰ放射免疫分析法测定灌流液中ＣＣＲＰ含量,ＲＴ－ＰＣＲ法测定背根神经节ＣＧＲＰｍＲＮＡ水平。结果显示：内毒素累积灌流引起ＣＧＲＰ浓度依赖性地释放增多,此作用在糖尿病大鼠系膜动脉术明显     

内毒素直接损伤血管内皮细胞的细胞生物力学机理

应用微管吸吮系统和激光共聚焦显微镜、标准固体粘弹性模型, 研究内毒素直接作用对于皮细胞弹性模量Ｋ１ 、Ｋ２ 和粘性系数μ的影响。实验结果表明： 随着内毒素浓度的增加（ ０ ．３１２５μｇ／ｍｌ～１０μｇ／ ｍｌ） , 弹性模量Ｋ１ 、Ｋ２ 均下降（ 其中Ｋ１ 比Ｋ２ 更为显著） , 粘性系数μ随着内毒素浓度的增加而增加; Ｋ１ 、Ｋ２ 、μ随着内毒素（０．６２５μｇ／ ｍｌ） 作用时间的延长而降低;内毒素直接损伤血管内皮细胞后的共聚焦图像表明： 内皮细胞的微丝、微管发生重排; 细胞核位移、脱核, 内毒素与细胞膜呈全面浸润状态。研究结果从细胞生物力学的角度, 给出内毒素直接损伤血管内皮细胞的证据。     

一氧化氮合酶的作用机制

一氧化氮合酶的作用机制赵慧卿（安徽医科大学化学教研室,合肥２３００３２）关键词一氧化氮一氧化氮合酶８０年代以来,人们发现一氧化氮在许多生理过程中起着十分重要的作用［１］。在血管内皮细胞中,一氧化氮可激活可溶性鸟苷酸环化酶（ｓＧＣ）,通过升高环鸟苷酸水...     

内毒素休克防治的研究进展

本文讨论了防治内毒素休克的新途径：抗内毒素疗法的抗核心多糖和类脂Ａ的多克隆抗体及单克隆抗体的应用;抗细胞因子疗法对内毒素休克病人防御功能的调控作用;适当剂量粒细胞集刺激因子可增加循环的粒细胞数,加速粒细胞血管外迁移,促进内毒素消除;一氧化氮对败血症休克的利弊均存,只有针对诱导型合成酶或特定血管的一氧化氮合成酶抑制剂才对内毒素休克治疗更具重要意义。     

L-精氨酸对实验性大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 探讨一氧化氮(NO)前体物质L-精氨酸(L-Arg)在内毒素(LPS)致大鼠急性肺损伤中的作用.方法 SD大鼠24只随机分为空白对照组、LPS组和L-Arg(500 mg/kg)组.腹腔注射LPS(100 μg/kg)复制急性肺损伤动物模型.在LPS注射2 h后,取大鼠肺称其湿重与干重,计算肺湿干比,测定肺灌洗液蛋白含量和白细胞数量,并进行肺组织病理学检查.结果 与对照组相比,LPS组肺湿干比、肺灌洗液蛋白含量和白细胞计数显著增高(P<0.01,n=8),病理学切片见急性肺损伤性变化;与LPS组相比,L-Arg组肺湿干比、肺灌洗液蛋白含量和白细胞计数显著降低(P<0.01,n=8),肺组织急性损伤显著减轻.结论 L-Arg具有抗LPS致急性肺损伤的作用.     

急性大肠杆菌性腹膜炎时肺的变化及腑安冲剂的影响

用Ｏ（１１１）Ｂ４大肠杆菌（９×１０８个／ｍｌ）与１０％硫酸钡佐剂给ＳＤ大鼠腹腔注射诱发急性腹膜炎为模型。随机分为三组：（１）模型组（２）正常对照组（３）模型＋中药治疗组,观察急性实验性腹膜炎时的肺损伤及腑安冲剂的保护作用。结果显示：（１）中药组内毒素、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、肺匀浆的脂质过氧化产物均明显低于模型组,接近正常组;（２）中药组的还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）明显高于模型组（Ｐ＜０．０１）。（３）中药组肺系数,肺灌洗液蛋白及白细胞计数与模型组比均有显著差异（Ｐ＜０．０１）。提示腑安冲剂可能通过降低外周血内毒素、ＴＮＦ,抑制脂质过氧化物的产生与加强自由基的清除,从而显著减轻急性腹膜炎引起的肺水肿,保护肺功能。     

L-精氨酸对脂多糖诱导大鼠肺损伤的保护作用及其机制的研究

目的：观察一氧化氮供体L-精氨酸（L-Arg）对脂多糖诱导大鼠肺损伤炎症反应和核因子-κB（NF-κB）信号通路的影响,探讨L-Arg对肺损伤的保护作用及其机制。方法：健康雄性SD大鼠采用舌下静脉注射脂多糖（LPS）复制肺损伤模型,分别于给予LPS3h和6h后给予生理盐水（对照组及LPS组,ip）和L-Arg（500mg/kgip）（L-Arg治疗组）,治疗3h。每组8只动物。免疫组化染色分析肺组织中NF-κB的核移位;逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）检测肺组织细胞间粘附分子-1（ICAM-1）基因表达;放射免疫法分别测定肺组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白介素6（IL-6）的含量;光镜观察肺组织病理变化。结果：与对照组比较,大鼠肺损伤后NF-κB活化,明显从细胞浆移位于细胞核,表达量也显著增加;ICAM-1基因表达上调;肺组织中TNF-α、IL-6含量明显升高。肺损伤3h用L-Arg治疗3h后,NF-κB从细胞浆向细胞核的移位被明显限制,NF-κB的表达量、肺组织中TNF-α、IL-6含量明显低于相应的LPS组,肺组织病理改变减轻;肺损伤6h用L-Arg治疗3h对LPS引起的以上变化没有明显影响。结论：LPS3h后给予L-Arg可减轻内毒素性肺损伤,抑制核因子的活化,在一定程度上阻断NF-κB相关信号通路的传导,减轻炎症反应是其机制之一。     

雾化吸入PS在正常和内毒素性肺损伤兔肺内吸入量及分布

目的：超声雾化吸入肺表面活性物质（ＰＳ）治疗兔急性肺损伤时,观察ＰＳ肺内吸入量信分布。方法：大肠杆菌内毒素致兔急性肺损伤后,采用＾９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ和ＰＳ混合进行雾化吸入治疗,测定ＳＰ吸入肺内百分比及各种肺野所占比例。结果：流急性肺损伤经超声雾化吸入治疗吸入肺内量（以磷脂汁）正常组、气管插管雾化组、口罩 经组分别为５．３４、７．０１、５．６１ｍｇ／ｋｇ体重,上、中、下肺野极差分别为６．６、１、９     

缺血预处理对肢体缺血/再灌注时肺损伤的保护作用

目的：观察肢体缺血/再灌注（LI/R）时肺损伤的变化并探讨缺血预处理（IPC）对其保护作用。方法：复制家兔LI/R损伤模型,观察肢体缺血4 h再灌注4 h肺损伤的变化以及采用肢体IPC干预后对肺损伤的影响。从右颈外静脉和左颈总动脉采血,分别代表入肺血和出肺血,检测入、出肺血及肺组织超氧化物歧化酶（SOD）的活性、脂质过氧化物的代谢产物丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）的含量;同时测定肺组织总一氧化氮合酶（tNOS）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的活性以及肢体IPC对上述指标的影响。结果：与对照组和缺血前比较,LI/R组松夹再灌注4 h入、出肺血及肺组织SOD活性明显降低,MDA和NO含量增高（P〈0.05,P〈0.01）;肺组织tNOS和iNOS活性亦升高,与对照组比较,有统计学意义（P〈0.01）。在缺血前给予IPC组,SOD活性升高,而MDA、NO含量降低,tNOS、iNOS活性也降低（P〈0.01）。相关分析显示MDA与SOD间存在明显负相关（P〈0.01）,而MDA与NO及iNOS呈显著正相关（P〈0.01）。结论：LI/R时并发的急性肺损伤与组织氧化代谢紊乱有关,IPC通过改善LI/R时肺组织氧化与抗氧化之间的平衡,进而增强肺组织的抗氧化能力,对LI/R肺损伤具有保护作用。     

过氧亚硝基阴离子介导内毒素致肺血管损伤及胆囊收缩素的保护作用

本文探讨过氧亚硝基阴离子（ONOO^-）在内毒素致肺血管损伤中的介导作用和八肽胆囊收缩素（CCK）的保护作用及其机制。结果发现,内毒素主要成分脂多糖（LPS）可诱导大鼠肺组织生成ONOO^-1,ONOO^-能导致肺微血管壁通透性明显增加和肺脏严重病理变化;ONOO^-可引起离体肺动脉反应性异常改变,LPS也可产生类似变化;ONOO^-有较弱的舒血管作用并受到内皮细胞的抑制性调节;LPS诱导培养的牛肺动脉内皮细胞（BPAEC）产生增多的ONOO^-参与介导内皮细胞本身的损伤;CCK能拮抗LPS对BPAEC的损伤效应,此作用由CCK受体介导,并与抑制ONOO^-生成有关。结果提示,清除ONOO^-或减少ONOO^-生成可为防治内毒素引起的急性肺损伤等病理过程提供新对策;CCK是一种有应用前景的细胞保护因子。     

急性肺损伤大鼠肺组织高迁移率族蛋白1的表达及其意义

目的动态观察高迁移率族蛋白1（HGMB1）在失血性休克复合内毒素注射致急性肺损伤（ALl）大鼠肺组织的表达情况,初步探讨HMGB1在ALI发病机制中的作用。方法采取失血性休克复合内毒素注射手段建立ALl大鼠动物模型,采用RT-PCR方法,检测肺组织HMGB1mRNA的表达情况。结果正常大鼠肺组织有少量HMGBlmRNA表达,遭受失血性休克复合内毒素注射打击后,HMGB1mRNA表达迅速升高,至ALI24h达最高峰,随后有所下降,ALl各组大鼠表达水平与正常对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常大鼠肺组织有一定水平HMGBlmRNA的表达,遭受失血性休克及内毒素注射打击后,HMGBlmRNA表达异常增高,可引起过度炎症反应,从而促进ALI的发生与发展。     

肿瘤坏死因子介导病理性氧供应依赖性的实验研究

本研究采用抗肿瘤坏死因子单克隆抗体预先保护实验动物,用ＥＬＩＳＡ法测定血浆中肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）浓度,藉以考察ＴＮＦ在内毒素诱导病理性氧供应依赖性（ＰＯＳＤ）模型中是否起介导作用。结果表明,（１）ＴＮＦ浓度内毒素组显著高于对照组,抗体保护组显著低于无关抗体组（Ｐ＜０．０１）。（２）在Ｖｏ＿２－Ｄｏ＿２关系中,抗体保护组可清楚地分为依赖段和非依赖段两部分,其临界氧运输量和合并氧提取率分别为１０．８０±３２１ｍｌ·ｍｉｎ￣（－１）·ｋｇ￣（－１）和０．６９０,而无关抗体组则只有依赖段,合并氧提取率为０．４０８,显著低于抗体保护组。从而证明,ＴＮＦ在内毒素所致的ＰＯＳＤ现象中起介导作用。     

大鼠肢体缺血/再灌注后肺损伤及一氧化氮合酶的变化与意义

目的：研究大鼠肢体缺血／再灌注后急性肺损伤时,内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和诱导型一氧化氮合酶（i-NOS）的表达及其在急性肺损伤发生中的作用。方法：雄性Wistar大鼠于后肢根部阻断血流后松解（4h／4h）,分别给予L-Arg和氨基胍（AG）预先干预,分为control、IR、L-Arg和AG组,免疫组织化学方法检测肺组织中iNOS和eNOS的表达,同时检测肺组织中MDA、MPO、W／D和NO2^-／NO3^-值,肺组织形态学观察以评价肺损伤的程度。结果：与control组比较,I／R组eNOS表达降低,iNOS表达增强,MDA、MPO、W／D和NO2^-／NO3^-值增加。肺组织充血、炎细胞浸润,肺泡腔渗液;与I／R组比较,L-Arg组eNOS、iNOS表达无明显变化,NO2^-／NO3^-增加。MDA、MPO、W／D降低,肺组织损伤有减轻趋势,AG组eNOS表达无明显变化,iNOS活性降低,NO2^-／NO3^-减少,MDA、MPO、W／D增加,肺组织损伤有加重趋势。结论：肢体缺血／再灌注急性肺损伤过程中,iNOS表达增加,NO生成增多,在肺损伤发生中有一定的保护作用。     

脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的机制研究

目的:观察NF-κB及CyPA在内毒素诱导急性肺损伤大鼠肺组织的活性变化,探索NF-κB及CyPA在内毒素诱导急性肺损伤的发病机理中的作用.方法:36只雄性SD大鼠随机分为2组:A组:正常对照组(n=18)尾静脉注射等量生理盐水;B组:内毒素组(LPS)(n_18):经尾静脉注射LPS 5 mg/kg;分别于造模后6、24、72小时,处死动物收取标本,每个时间点6只(LPS的24小时组因1只死亡固只处死5只).分别测定肺湿重/干重、肺组织TNF-α、IL-1β、NF-κB及CyPA.结果:湿重/干重:B组各个时间点均明显高于A组(P＜0.05);同一时间点的比较:B组较A组显著性升高,P＜0.05;NF-κB的核内表达量及肺组织CyPA的表达各个时间点之间B组均显著高于A组,P＜0.001;结论:NF-κB及CyPA在内毒素诱导大鼠急性肺损伤的发病机理中起了重要的作用.     

热休克蛋白HSP70在LPS诱导急性肺损伤中的表达

目的检测内毒素诱导急性肺损伤中热休克蛋白70的表达状况,探讨HSP70在急性肺损伤中的作用机制。方法在LPS致Wistar大鼠急性肺损伤动物模型上,采用免疫组织化学(SABC法)和蛋白印迹实验研究各组动物肺组织中HSP70的表达情况。结果LPS处理后1h,大鼠的支气管粘膜上皮及肺泡上皮细胞HSP70的表达与正常对照组相比明显增多,2h的表达达到高峰,6h后与对照组水平一致。Western blot结果显示,LPS处理2h、4h时,HSP70的表达较对照组明显增强。结论LPS诱导的急性肺损伤中可引起支气管、细支气管和肺泡上皮细胞HSP70应激性表达,提示HSP70对肺损伤起保护作用。