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1.
不同性别表型黄瓜基因组中雌性系特异的ACC合酶基因 总被引:10,自引:0,他引:10
利用一对引物(引物1和引物2)分别从雌性系黄瓜(Cucumis sativus L.)品种“CORONA”、“DALEVE”和强雌性黄瓜品种“中农五号”、“欧洲八号”的基因组DNA中扩增到一长约1025bp的ACC合酶基因片段。序列分析表明:该基因片段与Trebitsh等1997年发表的ACC合酶基因片段的同源性大于99%,认为这两个基因片段应该是同一个基因,不同品种来源的该基因的相同性说明了其高 相似文献
2.
黄瓜花发育的早期均有雌蕊和雄蕊原基的分化,但在发育过程中,由于雌蕊或雄蕊的发育受到阻滞,导致雄花和雌花的形成。近年来在拟南芥和金鱼草等植物中遗传学的研究表明,花器官的特征是由同源异形基因决定的。在拟南芥中,由于AG在决定雄蕊和雌蕊特征方面起重要作用,本研究利用 RT-PCR技术,从黄瓜的雌、雄蕊中分离出 AG的同源基因,并对其在花发育过程中的表达和可能作用进行了分析。首先,根据AG同源基因的保守区域设计5’简并引物5’-GA(A/G)AT(T/C/A)AA(T/C/A)AA(G/A)(A/C)G(G/T/C)ATCGA(C/A)AAC-3’,然后进行3’,RA CE PCR,扩增出约1kb大小的片段,序列分析表明该片段含有非常保守的MADS box。进而,利用5’ RACE PCR得到全长度的cDNA。该cDNA的核苷酸序列与CUM1(黄瓜 MADS box gene1)同源性高达97%。 CUM1在接牵牛中过量表达可引起花萼变为心皮状和花瓣变为雄蕊,说明CUM1为AG的同源基因。基于该基因与CUM1序列上的高度同源,我们认为其为黄瓜的AG同源基因。该基因命名为CMB1,基因银行登记号为AF286649。Souther 相似文献
3.
雪花莲外源凝集素基因转化番茄 总被引:20,自引:0,他引:20
将含有雪花莲外源凝集素基因(GNA)的质粒pRSSGNA1通过冻融法转化到根癌土壤杆菌9Agrobacterium tumefaciens(Smith et Townsend)Conn)菌株LBA4404中。采用叶盘法转化番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)栽培品种“C8”、“A39”和“A53”,获得了含GNA基因的43株转化植物株。通过卡那霉素抗性鉴定、NPTⅡ基 相似文献
4.
竹节花黄斑驳病毒启动了在棉花维管组织中是一个强启动子 总被引:1,自引:0,他引:1
用竹节花黄斑驳病毒(Commelina Yellow Mottle Virus,CoYMV)启动子-gus嵌合基因和CaMV35S-gus嵌合基因通过根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens(Smith et Townsend)Conn)LBA4404介导分别转入棉花(Gossypium hirsutum L.cv.Jingmian7,J7G),诱导再生了棉花转基因植株。G 相似文献
5.
大肠杆菌精氨酰—tRNA合成酶的Lys306为酶活力所必需 总被引:2,自引:2,他引:0
将大肠杆菌精氨酰tRNA合成酶(ArgRS)上Lys306用基因点突变的方法分别变为Ala和Arg的密码子,得到变种基因args306KA和args306KR。变种基因重组在pUC18上,转化到大肠杆菌TG1中,转化子中ArgRS及其变种ArgRS306KA和ArgRS306KR所表达的蛋白量生活为TG1表达ArgRS蛋白量的100倍。细胞粗抽提液中ArgRS的比活TG1,转化子pUC18-arg 相似文献
6.
根据已克隆的马克斯克鲁维酵母(K.marxiaus),乳酸克鲁维酵母(K.lactis)与酿酒酵母(S.cereviseiae)甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAP)基因的核苷酸序列同源性分析设计GAP探针,以该探针与脆壁克鲁维酵母(K.fragilis)CBS397基因文库进行原位杂交,得到一阳性克隆pG1并通过Southern印迹杂交实验得以证实。该克隆所携带的GAP1基因的部分序列也已被测定。利用 相似文献
7.
吲哚3甘油磷酸合酶(IGS,indole3glycerolphosphatesynthase,EC4.1.1.48)在色氨酸与吲哚乙酸的生物合成途径中,催化生成吲哚3甘油磷酸。研究该基因的表达调控,对于阐明高等植物是如何调控色氨酸及生长素合成是十分重要的。利用已克隆的IGScDNA,构建了谷胱甘肽转移酶(GST,glutathioneStransferase,EC2.5.1.18)与吲哚3甘油磷酸合酶融合蛋白的表达质粒,并将其导入到在异丙基βD硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下能高效表达的IGS基因缺陷菌株trpC9800λKC大肠杆菌中。高表达的融合蛋白通过谷胱甘肽琼脂糖(glutathioneagarose)亲和层析和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化后,用以免疫兔子制备抗血清。免疫印迹法分析表明拟南芥(Arabidopsisthaliana(L.)Heynh.)四种常用生态型只合成一种分子量约为40kD的吲哚3甘油磷酸合酶蛋白。在Ag+、紫外线等逆境条件下,IGS含量都有较大幅度的增加,这说明IGS可能与植物的防御反应紧密相关。 相似文献
8.
日本血吸虫26kD抗原基因在BCG中的表达 总被引:5,自引:0,他引:5
研究了外源基因日本血吸虫26kD抗原(Sj26GST)在卡介苗(bacilusCalmete-Guerin,BCG)、耻垢分枝杆菌(M.smegmatis)和大肠杆菌(E.coli)中的表达.运用重组DNA和聚合酶链反应(PCR)等分子生物学技术,以表达Sj26GST的E.colipGEX衍生质粒为模板,经PCR得到编码Sj26GST的全长cDNA片段.将其按正确的阅读框顺序,克隆到人结核杆菌热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)70的启动子下游,再将HSP70启动子和Sj26GST基因一起亚克隆到E.coli-分枝杆菌穿梭质粒pBCG-2000中,得到E.coli-分枝杆菌穿梭表达质粒pBCG-Sj26.pBCG-Sj26电转化入BCG和M.smegmatismc2155中表达Sj26GST抗原,所表达的天然重组Sj26GST(rSj26GST)为可溶性蛋白,在SDS-PAGE上分子量为26kD处可见明显的表达蛋白带.其表达量分别占BCG和M.smegmatis菌体总蛋白的15%和10%.可见,Sj26GST基因能在BCG中高效表达. 相似文献
9.
利用人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)基因组基因作为目的片段,将其受控于2.6kb的小鼠乳清酸蛋白(WAP)基因的调控区下,通过显微注射法获得了两只整合有人G-CSF转基因小鼠,通过繁殖建立了稳定的转基因系.一些表型参数测定表明转基因鼠与正常鼠无明显差别.通过RT-PCR及Southernblot检测,在乳腺表达出人G-CSF,为乳腺表达外源蛋白质及今后大动物研究奠定了基础. 相似文献
10.
对379例良、恶性肝组织进行的免疫组织化学研究显示,33%的慢性迁延性肝炎(6/18)、76%的慢性活动性肝炎(26/34)、92%的肝硬变(57/62)和97%的肝细胞性肝癌(HCC)(58/60)中有HBxAg表达,阳性率高于HBsAg或HBcAg。癌周肝中的HBxAg阳性率显著高于非癌周肝。与其它2种HBV抗原不同,HBxAg表达在细胞类型上有较明显的选择性,在肝小多角细胞(SPLC)、小细胞性不典型增生(SCD)及HCC中较强。与IGFⅡ、c-erbB-2、c-myc和EGF-R表达进行的对照研究表明HBxAg与IGFⅡ和c-erbB-2这2种HCC发生相关基因的表达关系密切。PCNA染色结果显示HBxAg阳性组织的细胞增殖活性显著高于HBxAg阴性组织。我们的结果还表明HBxAg表达与肝细胞不典型增生的发生和进展有关、提出HBVX基因可能通过其表达产物(HBxAg)首先激活IGFⅡ、c-erbB-2基因,继而引起显著的SPLC增生和SCD而参与HCC发生的. 相似文献
11.
血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)在我国蒙古族人群中分布的多态性 总被引:1,自引:1,他引:0
血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)在凝血过程中起重要作用。已有报道GPIb在人群中呈多态性分布,表现为分子量稍有差异。本文旨在研究GPIb在我国蒙古族人群中分布的多态性,以期探索不同民族之间是否存在差异。血小板分离自102名蒙古族健康青少年。血小板膜蛋白经SDS┐聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS┐PAGE)后,再转移至硝酸纤维素膜上(WesternBloting),用生物素化的麦胚凝集素(WGA/Bio)偶联生物素卵白素结合的辣根过氧化酶(ABCKit)染色,以4┐氯┐1┐萘酚显色,结果显示出硝酸纤维素膜上的GPIbα链,分子量分别为141,136,132,128KD,即A、B、C、D四型,其出现频率分别为0.078,0.461,0.392及0.069。这一结果与我国汉族人群中GPIb分布的多态性极为相似,均出现有四型。各型出现的基因频率在两个民族之间无显著性差异;其所构成的表型在两个民族之间似有不同,但经统计学分析(卡方检验)也无显著性差异 相似文献
12.
将大肠杆菌精氨酰tRNA合成酶(ArgRS)上Lys306用基因点突变的方法分别变为Ala和Arg的密码子;得到变种基因args306KA和args306KR。变种基因重组在pUC18上,转化到大肠杆菌TG1中,转化子中ArgRS及其变种ArgRS306KA和ArgRS306KR所表达的蛋白量至少为TG1表达ArgRS蛋白量的100倍。细胞粗抽提液中ArgRS的比活TG1、转化子pUC18-args、pUC18-args306KA和pUC18-args306KR分别为1.65、210、1.8和38单位/毫克。结果表明ArsRS的Lys306为Ala取代使活力完全丧失;若被Arg取代,则活力丧失80%以上。Lys306为ArgRS活力所必需。 相似文献
13.
大鼠鼻粘膜肽能神经末梢分布的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用免疫组化技术(ABC法)系统研究了大鼠鼻粘膜9种肽能神经末梢分布的特征,这9种神经肽分别是P物质(substanceP,SP),神经激肽A(neurokininA,NKA),神经激肽B(neurokininB,NKB),降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide,CGRP),血管活性肠多肽(vasoactiveintestinalpolypeptide,VIP),神经肽Y(neuropeptideY,NPY),甘丙肽(galanin,GAL),生长抑素(somatostatin,SOM)及神经降压素(neurotensin,NT),同时选择与鼻粘膜神经肽(NP)作用密切相关的三叉神经节(TG)细胞进行上述NP的定位。用重组PSP65质粒(400SOMcDNA)制备SOMmRNA单链探针,以地高辛精标记,在鼻粘膜及TG细胞进行SOMmRNA的原位杂交组化研究。结果提示大鼠鼻粘膜有丰富的肽能神经末梢;TG细胞含有多种NP并且可以合成SOM。该研究结果对重新认识鼻粘膜神经分布规律有一定意义。 相似文献
14.
人食管鳞状上皮癌糖复合物表达的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
凝集素可与其相对应的糖复合物特异性结合。在癌症形成过程中细胞表面经历着显著的变化,本文用十种生物素化凝集素即UEA-I、RCA-I、DBA、PSA、PNA、BSL、LCA、WGA、ConA和SBA作为探针,对正常食管上皮和食管鳞状上皮癌进行研究,以确定正常食管上皮和食管鳞状上皮癌中糖复合物的改变,结果发现,PNA和PSA在正常食管和食管鳞状上皮癌中均无反应,RCA-I、DBA、BSL、LCA、ConA和SBA受体在正常和癌组织中有着特征性变化,BSL和DBA在食管中无反应,LCA、SBA和RCA-1正常食管和食管鳞状上皮癌中反应方式不同,ConA和WGA则在同一癌组织的不同部位都显示出不同的反应。尽管UEA-I在正常食管和食管鳞状上皮癌均呈阳性反应,但似乎未表现出有意义的变化。上述结果提示食管癌的发生与含α-D-GalNAc(DBA和SBA)、β-D-Gal/β-N-acetyl-D-Galactosamine(RCA-I)、α-D-Glc/α-D-Man(LCA和ConA)、[β-(1-4)-D-GlcNAc]2/NeuNAc(WGA)和α-D-Gal(BSL)等的糖复合物的改变有较为密切的关系。 相似文献
15.
野生大豆与栽培大豆rDNA ITS1区的研究 总被引:9,自引:0,他引:9
采用PCR 技术从野生大豆(Glycine soja)、半野生大豆(G.gracillis)、多年生野生大豆(G.tomentella、G.tabacina)和栽培大豆(G.m ax)的两个品种UNION、文丰7 中扩增和克隆了rDNA第一转录间隔区(ITS1)。其在G.m ax 基因组中的拷贝数约为2×103。序列分析表明G.soja、G.gracillis、G.m ax 中的G/C含量为61.40% ,而G.tabacina和G.tom entella的G/C含量分别为58.11% 和59.01% ,与绿豆G/C含量(59.81% )相近。G.tabacina的G/C含量是已知的植物中ITS1 最低的。最大同源性分析表明,大豆属植物ITS1 的同源程度很高,同其近缘属绿豆的同源性明显高于其它作物。同时分析了栽培、多年生和一年生野生大豆间的亲缘关系。另外还发现在已知的植物ITS1 序列中均含有GACCCGCGAA 及GCGCCAAGGAA 两个区段 相似文献
16.
本文采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从鼠抗乙肝病毒表面抗原(HBsAg)单克隆细胞中克隆到了该抗体重、轻链可变区(Ⅴ区)基因,并分别将其与人的恒定区基因Cγ3,Ck相拼接,构建人-鼠嵌合抗体基因。SDS-PAGE和Western-Blot分析结果证实嵌合抗体重链基因在E.coli中得到了表达。间接ELISA法免疫测定的结果表明该表达产物具有与乙肝表面抗原结合的能力。 相似文献
17.
大鼠内侧隔核、斜角带中NOS与ChAT、NGF-R、AChE的共存神经元 总被引:4,自引:1,他引:4
用酶组织化学和免疫组织化学双标技术,观察了正常SD大鼠基底前脑内侧隔核(MS)、斜角带垂直支(VDB)和水平支(HDB)中NOS阳性神经元的形态和分布及NOS与胆碱能神经元标志物ChAT、NGF受体(NGF-R)和AChE之间的共存关系。结果发现,MS、VDB和HDB的头端NOS阳性神经元较多、胞体较大、突起多,尾端NOS阳性神经元数目较少、胞体较小、突起少而短。NOS+ChAT双标神经元占NOS阳性神经元总数的90%,占ChAT阳性神经元总数的39%;NOS+NGF-R双标神经元占NOS阳性神经元总数的83%,占NGF-R阳性神经元总数的40%;NOS+AChE双标神经元占NOS阳性神经元总数的96%,占AChE阳性神经元总数的39%。这些结果为研究Alzheimer'sdisease病理过程中基底前脑隔区胆碱能神经元退变与NO的关系提供了形态学依据。 相似文献
18.
黄瓜细胞中水杨酸的信号传递研究 总被引:14,自引:0,他引:14
应用放射性标记、薄层层析和阴离子交换柱层析技术,证明黄瓜(CucumissativaL.)细胞中存在肌醇脂质信使系统,并且水杨酸(SA)能够促进肌醇磷脂代谢,激活磷脂酶C(PLC),促进磷脂酰肌醇降解,导致第二信使肌醇1,4,5三磷酸(IP3)和双酰甘油(DAG)含量增加,表明SA信号传递有可能通过肌醇脂质信使系统的介导来完成。SA的生理功能尤其在诱导植物抗病性中的作用很可能是通过肌醇脂质信使系统介导的。 相似文献
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钙对水稻幼苗抗冷性的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
CaCl2浸种提高水稻幼苗叶片中结合态钙、内源抗氧化剂(GSH、AsA)含量和膜保护酶(CAT、SOD和POD)活性,也增加可溶性蛋白质中煮沸稳定蛋白质(boiling-stableprotein)的含量。冷胁迫期间,CaCl2并能减少因冷胁迫引起的GSH、AsA含量,CAT、SOD和POD活性以及煮沸稳定蛋白质下降的程度。在恢复期间,经CaCl2处理的幼苗其GSH、ASA、CAT、SOD和POD以及煮沸稳定蛋白质水平均有回升。 相似文献
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降钙素与降钙素基因相关肽(CT/CGRP)基因编码一组多肽,即降钙素(CT)、降钙素的N端肽和C端肽、降钙素基因相关肽(CGRP)及淀粉不溶素(Amylin)。CT/CGRP基因转录而成的mRNA前体,在不同组分中通过选择性加工形成CT mRNA或CGRPmRNA,再通过翻译及蛋白质加工,最后形成成熟的降钙素或降钙素基因相关肽。本简单介绍一下降钙素的基因结构及表达调控方面的研究进展。 相似文献