高压静电场对离子溶液中过氧化氢酶的作用研究

研究了 KBr、磷酸缓冲液、Na Cl对高压静电场对过氧化氢酶作用的影响。结果表明 :浓度在 0 .0 2 m mol/L～ 0 .0 5 m mol/L的低浓度的无机离子对高压静电场对过氧化氢酶的作用影响很小。浓度在 0 .1mmol/L～0 .4 0 m mol/L的无机离子对高压静电压对过氧化氢酶的活力影响较大 ,过氧化氢酶在 3× 10 3V /cm的电场作用下活力只会升高。而对照出现先下降后上升的现象。浓度高于 0 .80 m mol/L时 ,无机离子可以保护过氧化氢酶不受高压静电场的影响。无机离子的这种效应可能是无机离子在高压静电场的作用下 ,产生反抗电场降低了高压静电场的强度所致。     

十二烷基硫酸钠对高压静电场对酶作用的影响

研究了十二烷基硫酸钠(SDS)对高压静电场对酶作用的影响。结果表明:在强度为3×103V/cm的电场作用下,十二烷基硫酸钠使过氧化氢酶对高压静电场的作用变得更加敏感。低浓度的十二烷基硫酸钠中,过氧化氢酶在高压静电场的作用下活力升高;0.04mmol/L～0.12mmol/L的十二烷基硫酸钠中,酶活力在高压静电场作用下先升高后下降;高于0.40mmol/L,则酶活力单调下降。十二烷基硫酸钠对高压静电场中的过氧化氢酶具有一定的保护作用。     

多羟基小分子对高压静电场与过氧化氢酶作用影响研究

研究了甘露醇、丙三醇对高压静电场与过氧化氢酶作用的影响 ,结果表明 :在强度为 3× 10 3 v cm的电场作用下 ,甘露醇在低浓度区使得过氧化氢酶的活力下降 ,这可能是甘露醇降低了溶液极性 ,使酶在高压静电场作用下容易变形所致 ;在中浓度区 ,过氧化酶活力上升 ;在高浓度区 ,甘露醇使得高压静电场对过氧化氢酶失去作用 ,这可能是甘露醇使得溶液介电常数增加 ,酶分子实际感受的电场强度减小所致。丙三醇的作用具有一定类似性     

高压静电场对过氧化氢酶的稳定作用及机理研究

用高压静电场直接处理过氧化氢酶溶液 ,结果表明 :不同强度的高压静电场能提高和降低过氧化氢酶的活力。电场强度越大 ,酶活力达到平衡所需时间越短。处理后的过氧化氢酶溶液 ,玻棒 30秒的搅拌作用能使酶活力基本上回到原来的状态。溶液极性降低 ,酶活力达到平衡所需时间减少。处于高压静电场中的过氧化氢酶溶液 ,在 2 0℃时 ,电场强度为 3× 10 3V/cm ,活力能保持 5～ 6天 ,而对照只能保持 2～ 3天。在 30℃时 ,同样电场强度下 ,活力能保持 48小时左右 ,对照能保持 2 4小时左右。经高压静电场处理的酶 ,活力保持时间也比对照长。研究表明 :高压静电场对酶活力的稳定作用很可能是高压静电场使酶及溶液发生极化作用产生的。     

外源NO供体对小麦离体叶片过氧化氢代谢的影响

分析了外源一氧化氮 (nitricoxide ,NO)供体硝普钠 (sodiumnitroprusside ,SNP)对离体小麦 (TriticumaestivumL .)叶片过氧化氢 (H2 O2 )含量及其清除酶活力的调节作用。不同浓度的SNP (1mmol/L和 5mmol/L)处理 3 0min内 ,离体小麦叶片H2 O2 含量均有一个显著上升的过程 ,同时过氧化物酶 (POD)活力受到显著抑制 ,而过氧化氢酶 (CAT)活力则轻微下降 ;处理 3 0min到 2 4 0min时 ,POD活力的抑制状态基本维持不变 ,而CAT活力开始恢复上升 ,H2 O2 含量也相应地开始下降。粗酶液的体外实验也表明 ,SNP对POD和CAT的抑制类型不同 ,前者可能是不可逆抑制 ,后者则可能是可逆抑制。因此NO可通过对POD和CAT的不同抑制作用来调节小麦叶片内源H2 O2 含量     

外源NO供体对小麦离体叶片过氧化氢代谢的影响

分析了外源一氧化氮（nitric oxide ,NO）供体硝普钠（sodium nitroprusside,SNP）对离体小麦（Triticum aestivumL.）叶片过氧化氢（H2O2）含量及其清除酶活力的调节作用。不同浓度的SNP (1 mmol/L和5 mmol/L) 处理30 min内, 离体小麦叶片H2O2含量均有一个显著上升的过程, 同时过氧化物酶（POD） 活力受到显著抑制,而过氧化氢酶（CAT）活力则轻微下降;处理30 min到240 min时,POD活力的抑制状态基本维持不变,而CAT 活力开始恢复上升, H2O2含量也相应地开始下降。粗酶液的体外实验也表明,SNP对POD和CAT的抑制类型不同,前者可能是不可逆抑制,后者则可能是可逆抑制。因此NO可通过对POD和CAT的不同抑制作用来调节小麦叶片内源H2O2含量。     

游离及固定化果糖基转移酶部分酶学性质的比较研究

 从诱变、筛选的米曲霉GX0 0 10菌株所产生的果糖基转移酶 ,经过纯化和固定化操作分别制备游离酶和固定化酶 ,对两者的酶学性质进行了比较研究 .结果表明 ,两者在蔗糖转化为蔗果低聚糖的酶促反应中 ,最适pH为 5 5,在pH5 0～ 7 5之间酶活性相对稳定 .游离酶和固定化酶的适宜温度范围分别是 4 5～ 52℃和 4 0～ 55℃ .在 55℃保温 60min ,酶活性保存率分别是 61 6%和 87 5% .固定化酶的热稳定性提高 .0 1mmol LHg2 +和 1mmol LAg+能完全抑制游离酶的活性 ,但只能部分抑制固定化酶的活性 ,1mmol L的Ti2 +能完全抑制两者的活性 .以蔗糖为底物时 ,游离酶的米氏常数Km=2 15mmol L ,而固定化酶Km =386mmol L .游离酶只能使用一次 ,固定化酶反复使用 54次后 ,剩余活力为 55 2 % .用 55% (W V)蔗糖溶液与固定化酶在pH5 0 ,4 6℃下作用 12h ,可获得61 5% (总低聚糖 总糖 )产物 ,其中蔗果五糖含量达到 7 2 % .     

蔗糖脂肪酸脂对离体和活体大豆蔗糖酶活力和构象的影响

研究了蔗糖脂肪酸脂(SFE)对离体和活体大豆蔗糖酶活力和构象的影响。当SFE的浓度大于1.0mmol/L后,开始激活离体蔗糖酶的活力。在大豆的开花期和结荚期,SFE可以增加蔗糖酶的活力。荧光实验结果表明,在小于2mmol/L时,SFE不改变蔗糖酶的荧光最大发射峰峰位和峰高。施用SFE后,大豆叶片中果糖、葡萄糖和蔗糖酶的含量,分别是对照的170%±10%,190%±10%,和260%±20%;而蔗糖的含量几乎不变。对蔗糖酶 的SDS-凝胶电泳图进行扫描分析的结果表明,经SFE处理后的蔗糖酶含量比对照高两倍左右。这些结果说明SFE可以显著增加活体蔗糖酶的活力,但活力的增加既不是因为蔗糖酶构象的改变,也不是蔗糖(作为底物)诱导所致,而是SFE增加了大豆叶片中蔗糖酶的含量引起的。     

蔗糖酶在尼龙丝上的固定化及酶管性能研究

利用盐酸水解法处理尼龙丝表面,采用戊二醛交联法将蔗糖酶固定在尼龙丝上,制成酶丝,进而制成酶管.该酶管可用于蔗糖的测定,蔗糖通过酶管分解成葡萄糖,再用葡萄糖氧化酶(GOD)电极测糖.酶管的最适 pH 为5—6,最适温度范围:30—40℃.溶液的流速对酶管的转化效率有显著影响.流速为1.3ml/min 时,蔗糖浓度在0—5mmol/L 范围内,酶管的转化效率基本恒定,约为28.5%.用同一浓度的蔗糖溶液重复实验,酶管的重复性很好,CV＜1%。酶管活力至少稳定8d(天)以上.     

脂肪酸影响草鱼肝细胞脂质蓄积状态及诱导其凋亡的离体研究

为探究外源脂肪酸对草鱼肝细胞脂质代谢及健康状况的影响及其机理,体外培养草鱼肝细胞,并采用不同浓度（0-1 mmol/L）油酸（Oleic acid）进行细胞孵育,噻唑兰比色法（Methyl thiazolte trazoliu,MTT）和油红O染色提取法检测肝细胞活力及脂质蓄积状况,BODIBY和DAPI染色法观察肝细胞脂滴及细胞核情况,流式细胞术检测肝细胞凋亡率变化,Real-time qPCR检测脂质合成标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ（Peroxidase proliferation activated receptor,PPARγ）和CCAAT/增强子结合蛋白α（CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα）、凋亡相关基因Caspase家族等的表达情况。结果显示,随着油酸处理浓度的增加,肝细胞活力和细胞内脂质积累呈现先上升后下降的趋势,分别在0.4和0.6 mmol/L时达到最大值（P < 0.05）;肝细胞凋亡率则先下降后上升,在0.4 mmol/L油酸处理时最低,1 mmol/L油酸处理时最高（P < 0.05）;此外,0.4 mmol/L油酸处理抑制了肝细胞Caspase-3b和Caspase-9基因的表达,上调Bcl-2/Bax mRNA比值（P < 0.05）,而0.8 mmol/L油酸处理显著促进Caspase-3b、Caspase-8、Caspase-9及凋亡诱导因子（Apoptosis inducing factor,AIF）基因的表达,下调Bcl-2/Bax的mRNA比值（P < 0.05）。研究表明,一定浓度的脂肪酸可增强草鱼肝细胞活力,促进胞内脂质积累,抑制细胞凋亡,而脂肪酸浓度过高则抑制肝细胞活力并诱导肝细胞凋亡,其作用与脂肪酸影响脂质代谢及凋亡基因的表达有关。     

细胞外Ba^2＋对内向整流钾通道的阻断作用

实验采用双微电极电压箝（ＴＥＶ）法研究Ｂａ＾２＋对非洲爪蟾卵母细胞表达的内向整流钾通道（ＩＲＫ１）的阻断作用。细胞外Ｂａ＾２＋浓度分别为０,１,３,１０和１００μｍｏｌ／Ｌ,Ｋ＾＋浓度分别为１０和９０ｍｍｏｌ／Ｌ,可见快速开通道阻断剂Ｂａ＾２＋对ＩＲＫ１的瞬间电流（施加电压后１ｍｓ）的阻断作用依赖Ｂａ＾２＋、Ｋ＾＋、时间和电压;但对ＩＲＫ１的开关特性几乎无影响,ＩＲＫ１对之不通透。三级指数拟合的结     

NaCl胁迫对唐古特白刺愈伤组织的生理效应

以唐古特白刺(Nitraria tangutorum Bobr.)愈伤组织为材料,研究低(75 mmol/L)、中(150 mmol/L)、高(300 mmol/L)浓度NaCl处理下其膜脂过氧化、抗氧化酶活性及渗透性调节物含量的变化,试图从细胞水平揭示唐古特白刺适应盐环境的生理机制。结果显示:(1)唐古特白刺愈伤组织中MDA含量在低浓度NaCl处理下与对照无显著性差异,而在中高浓度下显著升高。(2)白刺愈伤组织超氧化物歧化酶(SOD)活性在各浓度NaCl胁迫下均比对照显著升高,且此效应无浓度依赖性;其过氧化氢酶(CAT)活性随胁迫浓度的增加呈先升高后降低的变化趋势,在中低浓度下比对照显著增加,高浓度下显著降低为对照的64%;其过氧化物酶(POD)活性在低浓度下无显著性变化,在中高浓度显著下降为对照的55%和29%。(3)随NaCl胁迫浓度的增加,白刺愈伤组织中脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量均呈先升高后降低的变化趋势,且除高浓度下可溶性蛋白含量约降为对照的87%外,其余NaCl胁迫处理的3种渗透调节物含量均高于对照。研究发现,白刺愈伤组织在低浓度的盐胁迫下具有较强的抗氧化酶活性和渗透性调节作用,因而表现出较强的抗氧化作用,但高浓度NaCl胁迫对白刺愈伤组织造成了显著的氧化损害。     

Piezoelectric and related properties of hydrated collagen.

Two piezoelectric constants (polarization per unit stress, d=d'-id', and polarization per unit strain, e=e'-ie'), the elastic constant, and dielectric constant are determined for oriented collagen at different hydration levels at 10 Hz from -150 to 50 degrees C. With no hydration (approximately 0% H2O), d' increases slightly with higher temperatures, while e' decreases slightly. Near 11 wt% H2O, both d' and e' increase then decrease around 0 degrees C, and is probably caused by an increase of the dielectric constant and the ionic conductivity in the nonpiezoelectric phase. Hydration greater than 25 wt%, d' and e' decrease above -50 degrees C which is considered to be due to a greater ionic conductivity surrounding the piezoelectric phase.     

氧化胁迫对Alkalibacterium sp. F26防御酶和辅因子的影响

将一株能够高产过氧化氢酶的低度嗜盐嗜碱茵Alkalibacterium sp.F26作为模式微生物,采用高效液相色谱技术测定胞内代谢物浓度,研究氧化胁迫对其防御酶活性和辅因子的影响.研究结果表明:相比低浓度H2O2(＜1 mmol/L)胁迫,此菌株在高浓度H2O2(＞1 mmol/L)胁迫下的应答表现曼为明显:经3 mmol/L H2O2胁迫后胞内CAT酶活为106.54 U/mg protein,是对照产量的1.76倍;ATP浓度则从对照浓度20.55 μmol/L下降到17.80 μmol/L;NAD 浓度自对照样品的69.89 μmol/L减少至31.77 μmol/L.由于ATP和NAD 浓度的减少,相比未经过H2O2胁迫菌体.细胞能荷值EC从0.77降低至0.68,NADH/NAD 则从0.08增加至0.41.然而,这种应答机制在细胞受到低浓度H2O2的胁迫后并不明显:除发现100 μmol/L H2O2能够导致细胞防御机制的激活而使胞内ATP浓度相比对照有所增加的情况外,经50 μmol/L和500 μmol/L H2O2胁迫后胞内ATP水平从对照的22.69 μmol/L只下降到22.38 μmol/L和13.70 μmol/L;并且此种胁迫条件下NADH浓度变化也不显著.     

Effect of paraquat on cellular defense enzymes and glutathione level of Funalia trogii

The effect of paraquat on the activities of antioxidant defense and detoxifying enzymes of the white-rot fungusFunalia trogii was determined. Paraquat increased the activities of glutathione reductase (GR), glutathione transferase (GT) and superoxide dismutase at 1 mmol/L, while at 0.1 mmol/L it did not affect the activity of GR and GT. It depressed the catalase activity and the amount of glutathione at all concentrations used. Paraquat treatment probably depresses antioxidant defense components such as catalase and glutathione.