| RNA干扰抑制人乙型肝炎病毒复制的研究 |
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| 引用本文： | 张正茂 田拥军 孟忠吉 雷延昌 李新宇 王宝菊 杨东亮. RNA干扰抑制人乙型肝炎病毒复制的研究[J]. 中国病毒学, 2006, 21(4): 348-352 |
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| 作者姓名： | 张正茂 田拥军 孟忠吉 雷延昌 李新宇 王宝菊 杨东亮 |
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| 作者单位： | 张正茂（华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,湖北,武汉,430030） 田拥军（华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,湖北,武汉,430030） 孟忠吉（华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,湖北,武汉,430030;郧阳医学院附属太和医院感染科,湖北,十堰,442000） 雷延昌（华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,湖北,武汉,430030） 李新宇（华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,湖北,武汉,430030;郧阳医学院附属太和医院感染科,湖北,十堰,442000） 王宝菊（华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,湖北,武汉,430030） 杨东亮（华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,湖北,武汉,430030） |
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| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研项目;国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 采用表达shRNA的载体构建了表达针对病毒HBsAg mRNA保守区的shRNA的质粒psiHBs,利用细胞模型和高压注射小鼠模型评价RNA干扰对HBV复制和基因表达的抑制作用.通过Western印迹检测细胞内的HBsAg,用ELISA检测细胞培养上清和血清中的HBsAg,采用Southern印迹检测HBV的复制中间体,最后通过免疫组化的方法检测肝组织切片中HBcAg的表达情况.结果显示pHBV1.3和psiHBs共转染HepG2后,与对照组相比病毒HBsAg和HBeAg的表达和病毒复制中间体的水平下降了90%以上,并且shRNA的作用效率存在序列特异性和剂量依赖性.在高压注射小鼠模型中,psiHBs表达的shRNA使小鼠血清中HBsAg的水平下降了80%以上,免疫组化检测显示,小鼠肝组织内HBcAg阳性细胞数减少了75.1%,而且shRNA的抑制作用至少能持续4d.研究显示载体表达的shRNA无论是在细胞或是在小鼠模型中都能对HBV的复制和基因的表达发挥序列特异性的抑制作用.本研究为我们下一步实现由RNAi介导的基因治疗提供了理论和技术支持.
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| 关 键 词： | RNA干扰 shRNA 乙型肝炎病毒 高压注射小鼠模型 |
| 文章编号： | 1003-5125(2006)04-0348-05 |
| 修稿时间： | 2006-02-13 |
Inhibition of Hepatitis B Virus Replication in vitro and in vivo by RNAi |
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| ZHANG Zheng-mao,TIAN Yong-jun,MENG Zhong-ji,LEI Yan-chang,LI Xin-yu,WANG Bao-ju,YANG Dong-liang. Inhibition of Hepatitis B Virus Replication in vitro and in vivo by RNAi[J]. Virologica Sinica, 2006, 21(4): 348-352 |
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| Authors: | ZHANG Zheng-mao TIAN Yong-jun MENG Zhong-ji LEI Yan-chang LI Xin-yu WANG Bao-ju YANG Dong-liang |
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| Affiliation: | 1.1. Division of Clinical Immunology, Tongji Hospital of Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China2.Taihe Hospital of Yunyang Medical Collage, Shiyan 442000, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | shRNA |
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