| 高原鼠兔脑红蛋白基因的克隆与组织表达 |
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| 引用本文： | 白振忠,韩淑芬,杨应忠,曹越,马兰,刘寿,格日力. 高原鼠兔脑红蛋白基因的克隆与组织表达[J]. 兽类学报, 2010, 30(1): 74 |
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| 作者姓名： | 白振忠 韩淑芬 杨应忠 曹越 马兰 刘寿 格日力 |
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| 作者单位： | 青海大学医学院高原医学研究中心,西宁 810001 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973计划)，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 克隆高原鼠兔脑红蛋白(Neuroglobin,NGB)基因编码区并检测其在成年高原鼠兔脑组织和其他组织中的表达,同时探讨高原鼠兔低氧适应的分子生物学机制。从高原鼠兔脑组织中提取总RNA,通过RT - PCR 获得高原鼠兔NGB cDNA,将其与pGEM - T Easy 载体连接,构建重组质粒,蓝白斑筛选阳性克隆并进行鉴定和测序;制备地高辛标记的RNA 探针并采用原位杂交法(In suit hybridization,ISH) 分析脑红蛋白基因在高原鼠兔脑组织中的分布;采用RT - PCR 和蛋白印记(Western blot)检测高原鼠兔不同组织中脑红蛋白的表达含量。将含有目的片段的阳性克隆经测序和Blast 分析,显示其部分编码序列与GenBank 中绵羊、大鼠等同源性很高(大于84% ),表明本实验所克隆的序列为脑红蛋白基因;原位杂交结果显示NGB 在青藏高原土著动物高原鼠兔脑部分布较为广泛;高原鼠兔不同组织中都有NGB mRNA 表达,NGB 基因并不是中枢神经系统所特有的,睾丸和肾上腺也有较高的表达。NGB 基因在高原鼠兔脑组织和其他组织中分布较为广泛,推测NGB mRNA 可能在高原鼠兔机体较为广泛的区域中发挥着作用,同时为高原低氧适应相关基因的研究提供了实验依据。
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| 关 键 词： | 脑红蛋白 高原鼠兔 基因克隆 基因表达 |
Genetic cloning and expression of neuroglobin in high altitude hypoxic adaptation species--Plateau pika (Ochotona curzoniae) |
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| BAI Zhenzhong,HAN Shufen,YANG Yingzhong,CAO Yue,MA Lan,LIU Shou,GE Rili. Genetic cloning and expression of neuroglobin in high altitude hypoxic adaptation species--Plateau pika (Ochotona curzoniae)[J]. Acta Theriologica Sinica, 2010, 30(1): 74 |
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| Authors: | BAI Zhenzhong HAN Shufen YANG Yingzhong CAO Yue MA Lan LIU Shou GE Rili |
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| Affiliation: | Research Center for High Altitude Medicine,Qinghai University Medical School,Xining 810001,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gene cloning Gene expression Neuroglobin Plateau pika (Ochotona curzoniae) |
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