mRNA差异显示技术在动物早期胚胎发育相关基因研究中的应用 |
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引用本文: | 李书鸿,韩文,马海飞.mRNA差异显示技术在动物早期胚胎发育相关基因研究中的应用[J].基因组蛋白质组与生物信息学报,1997(2). |
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作者姓名: | 李书鸿 韩文 马海飞 |
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作者单位: | 中国科学院发育生物学研究所 |
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摘 要: | 动物从卵裂开始的早期胚胎发育始终伴随着mRNA不断的合成与降解。最初受着受精卵内母体mRNA的控制。当这些mRNA在发育过程中逐渐被降解时,有些动物(如小鼠)在比较早的时期已有新基因的转录;而有些动物(如鱼类、两栖类)迟到囊胚中期以后,合子核的基因才开始转录新的mRNA。mRNA这种有规律的代谢活动控制着细胞的分化、胚层的形成以及模式形成(paternformation)。所有这些mRNA水平上的变化都可以用mRNA差异显示法(mRNAdiferentialdisplay)检测出来并进而获得与早期胚胎发育有关的基因。mRNA差异显示法是由Liang和Pardee于1992年建立起来的,用于显示两种不同组织之间mRNA差异的方法。基于绝大多数mRNA有一个poly(A)尾巴,选用一个较特殊的3’端引物─5’T11MN3’,其中M可以是dATP,dCTP,dGTP之一,而N可以是dATP,dTTP,dCTP,dGTP之一,进行逆转录时,1/12的mRNA可被逆转录为cDNA。这种cDNA第一链被用来PCR扩增,所使用的3’端引物与逆转录引物相同,而5’端引物为10个碱基的一段寡核苷酸,这类任意(arbitrar
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Application of mRNA Differential Display to the Identification of Genes Related to Embryonic Development |
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Abstract: | |
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Keywords: | mRNA differential display embryonic development gene |
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