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利用高灵敏的TSA-FISH在玉米中定位bz1、bz2基因(英文)
引用本文:李宗芸,宁顺斌,韩永华,刘立华,宋运淳.利用高灵敏的TSA-FISH在玉米中定位bz1、bz2基因(英文)[J].基因组蛋白质组与生物信息学报,2002(1).
作者姓名:李宗芸  宁顺斌  韩永华  刘立华  宋运淳
作者单位:武汉大学植物发育生物学教育部重点实验室 武汉430072 (李宗芸,宁顺斌,韩永华,刘立华),武汉大学植物发育生物学教育部重点实验室 武汉430072(宋运淳)
基金项目:NationalNaturalScienceFoundationofChina (No.30 0 70 376),theResearchFundforDoctoralProgramofHigherEducation (No.2 0 7980 112 )
摘    要:植物中 ,程序性细胞死亡 (PCD)发生在植物生殖和发育的许多方面 ,已有的研究表明 ,在玉米种子的发育过程中 ,胚乳组织经历了程序性细胞死亡的过程。bz1 (bronze)和bz2是与种子的糊粉层发育相关的花青素生物合成基因 ,在玉米基因组中 ,bz1基因所在区域是重组热点 ,bz2与类黄酮的酰化、糖基化、转运、沉积等有关 ,基因的物理定位有利于基因的分离和克隆。TSA FISH (Tyramidesignalamplificationfluorescenceinsituhybridization)是一种新颖的高灵敏度的荧光原位杂交技术 ,它的主要反应原理是辣根过氧化物酶催化过氧化氢和标记的酪胺分子 (tyramide)的苯环部分反应 ,使荧光标记的酪胺分子在直接带有或间接带有HRP报告分子的探针周围沉积 ,信号因此得以极大的放大 ,从而大大提高了荧光原位杂交技术的灵敏度 ,90年代中期开始引入动物和人类组织化学和细胞遗传学研究中 ,2 0 0 1年才应用于植物细胞遗传学的研究。利用这一技术 ,我们将bz1基因定位于玉米的第 9染色体的短臂和第 1染色体的长臂上 ,其信号点距着丝粒的百分距离分别为 40 .2 ,75 .4;bz2基因定位于玉米的第 1染色体的长臂和第 5染色体的短臂上 ,其信号点距着丝粒的百分距离分别为2 1 .6,1 5 .3。本文讨论了TSA FISH技术在植物中小的、低拷贝的DNA序

关 键 词:程序性细胞死亡(PCD)  bronze-gene  TSA-FISH(酪胺信号放大的荧光原位杂交Tyramide  signal  amplification  fluorescence  in  situhy  bridization)  玉米

Chromosomal Localization of Genes bz1,bz2 in Maize by Using Ultra-sensitive FISH with Tyramide Signal Amplification(TSA-FISH)
Abstract:It has been reported that endosperm undergoes programmed cell death (PCD) during maize kernel development.Both bz1 (bronze ) and bz2 are anthocyanin biosynthetic genes,and related to development of aleuronic layer of maize seeds.Tyramide signal amplification fluorescence in situ hybridization (TSA FISH) is a novel and high sensitive FISH technique,which is suitable for routine application in plant cytogenetic research.Using this technique,we physically mapped the bz1 gene onto the short arm of chromosome 9 and the long arm of chromosome 1;the percentage distances from centromere to hybridization site were 40.2,75.4 respectively,and the bz2 onto the long arm of chromosome 1 and the short arm of chromosome 5;the percentage distances from centromere to hybridization site were 21.6,15.3 separately.The TSA FISH techniques of small low copy DNA sequences for plants are discussed.
Keywords:programmed cell death (PCD)  bronze  genes  tyramide signal amplification fluorescence  in situ  hybridization (TSA  FISH)  maize
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