| 建立快速定量检测猪瘟兔化弱毒苗的荧光定量PCR技术 |
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| 引用本文： | 陈玉栋,张楚瑜,邹俊煊,潘兹书,陈立新,李田,郭长林.建立快速定量检测猪瘟兔化弱毒苗的荧光定量PCR技术[J].中国病毒学,2003,18(2):124-128. |
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| 作者姓名： | 陈玉栋 张楚瑜 邹俊煊 潘兹书 陈立新 李田 郭长林 |
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| 作者单位： | 1. 武汉大学生命科学学院,湖北武汉,430072
2. 武汉中博生化有限公司,湖北武汉,430072 |
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| 基金项目： | 国家"973"项目资助(G1999011905) |
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| 摘 要： | 在猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株的5'非编码区设计一对引物和一条荧光探针,利用荧光定量PCR原理,结合LightCycler检测系统,首次建立了定量检测猪瘟兔化弱毒苗方法.结果表明,该方法的灵敏度为102拷贝数,线性范围为107-102,达6个数量级;标准样品的变异系数为2.3%-5.1%(n=10),疫苗样品组内实验变异系数为0.85%-2.8%(n=5)、组间实验为2.5%-7.3%(n=5),对同一样品分5次RNA提取和逆转录,其变异系数为5.0%;对9份疫苗样品进行了检测,与兔体定型热反应方法相比较,有很好的相关性;整个检测过程仅需4h.该法可望取代传统的兔体定型热反应用于疫苗生产过程中的效价测定及指导疫苗的配制,也为猪瘟病毒分子生物学研究提供了一种新的、简捷有效的工具.
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| 关 键 词： | 猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV) 荧光定量PCR 定量检测 |
| 文章编号： | 1003-5125(2003)02-0124-05 |
| 修稿时间： | 2002年6月14日 |
Development of a Fluorogenic Quantitative PCR Assay for Rapid Quantification of Hog cholera lapinized virus |
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