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| SARS-CoV Sars7a和EGFP融合蛋白真核表达载体构建及其表达 | |
| 引用本文： | 何贤辉,徐丽慧,刘毅,蔡小嫦,曾耀英.SARS-CoV Sars7a和EGFP融合蛋白真核表达载体构建及其表达[J].中国病毒学,2004,19(3):209-213. |
| 作者姓名： | 何贤辉 徐丽慧 刘毅 蔡小嫦 曾耀英 |
| 作者单位： | 1. 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室,广东,广州,510632 2. 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室,广东,广州,510632;暨南大学生物工程研究所,广东,广州,510632 3. 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室,广东,广州,510632;郑州大学第一附属医院皮肤科,河南郑州,450052 4. 暨南大学第一附属医院皮肤科,广东广州,510632 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目(No.30230350);国家重点基础研究发展规划"973"项目(No.G200057006);暨南大学SARS攻关基金和暨南大学自然科学基金资助 |
| 摘 要： | 根据SARS-CoV sars7a基因设计并化学合成部分重叠引物,经二轮PCR获得sars7a基因片段,以此片段为模板并利用一对带有Kozak序列及删除终止密码的引物进行PCR,获得产物与pEGFP-N1载体连接,使sars7a基因位于EGFP的基因上游,得到含编码Sars7a-EGFP融合蛋白基因的哺乳动物细胞表达载体.采用细胞核转染技术将重组表达载体转染K562细胞,以流式细胞仪和共聚焦显微镜分析,可检测到EGFP的绿色荧光,表明Sars7a-EGFP得到表达,该蛋白分布于整个细胞,提示Sars7a并非膜蛋白,更可能是胞浆蛋白.此外,该蛋白的表达对K562细胞凋亡无明显影响. |
| 关 键 词： | 严重急性呼吸综合征 冠状病毒 Sars7a 绿色荧光蛋白 融合蛋白 表达 |
| 文章编号： | 1003-5152(2004)03-0209-05 |
| 修稿时间： | 2003年11月10 |
Construction of an Eukaryotic Expression Vector for SARS-CoV Sars7a and EGFP Fusion Protein Expression |
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