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荧光定量RT-PCR技术快速检测SARS病毒核酸
引用本文:冯燕,卢亦愚,严菊英,史雯,李敏红,龚黎明,葛琼,周敏.荧光定量RT-PCR技术快速检测SARS病毒核酸[J].中国病毒学,2005,20(3):228-231.
作者姓名:冯燕  卢亦愚  严菊英  史雯  李敏红  龚黎明  葛琼  周敏
作者单位:浙江省疾病预防控制中心,浙江杭州,310009
基金项目:浙江省科技厅资助重点项目:2004C33103
摘    要:建立以特异性荧光探针为特点的TaqMan荧光定量RT-PCR方法用于检测严重急性呼吸道综合症病毒(severe acute respiratory syndrome -associate coronavirus,SARS-CoV)核酸.筛选针对SARS病毒基因保守区域设计的引物与TaqMan探针,并对荧光定量RT-PCR反应体系与反应条件进行优化,验证本方法的特异性、敏感度与重复性. 实验结果表明本方法对SARS病毒核酸的检测具有高度特异性,与甲1型、甲3型、乙型流感病毒、禽流感病毒H5N1、麻疹及其他呼吸道病毒均无交叉反应;检测灵敏度达0.1TCID50;从病毒核酸提取至检测完成仅需3h左右,且操作简便,重复性好.本研究建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法特异、敏感、快速,适合于临床实验室进行SARS病毒的早期快速检测.

关 键 词:荧光定量RT-PCR  TaqMan探针  SARS病毒
文章编号:1003-5125(2005)03-0228-04
修稿时间:2004年11月16

Real-time Quantitative RT-PCR Assay for Quick Detection of SARS-associated Coronavirus RNA
FENG Yan,LU Yi-yu,YAN Ju-ying,Shi Wen,LI Min-hong,GONG Li-ming,Ge Qiong,ZHOU Min.Real-time Quantitative RT-PCR Assay for Quick Detection of SARS-associated Coronavirus RNA[J].Virologica Sinica,2005,20(3):228-231.
Authors:FENG Yan  LU Yi-yu  YAN Ju-ying  Shi Wen  LI Min-hong  GONG Li-ming  Ge Qiong  ZHOU Min
Abstract:
Keywords:
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