| 登革病毒2型E蛋白基因真核表达和DNA免疫的研究 |
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| 引用本文： | 高阳,江丽芳,方丹云,曾祥凤.登革病毒2型E蛋白基因真核表达和DNA免疫的研究[J].中国病毒学,2003,18(3):201-205. |
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| 作者姓名： | 高阳 江丽芳 方丹云 曾祥凤 |
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| 作者单位： | 中山大学中山医学院微生物学教研室,广州,510080 |
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| 摘 要： | 将编码登革病毒2型(DV2)氨基末端80%的E蛋白的DNA片段克隆到真核表达载体pCXN2 AG强启动子下游,构建成DV2E重组真核表达质粒pCXN-E.间接免疫荧光显示其可在COS-7细胞中表达.ELISA法检测pCXN2-E DNA免疫BALB/c鼠血清中的E抗体变化和维持规律,结果显示三次免疫后2周已有抗体产生,15周时仍维持较高的水平;血清空斑减数中和实验显示其中和滴度高于1640;流式细胞计数仪(FACS)检测DNA免疫鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞变化情况,与注射空载体pCXN2的阴性鼠相比,CD4+淋巴细胞水平略有上升,CD8+细胞水平有较大升高(p＜0.01);动物保护性实验结果显示,当用致死剂量登革病毒攻击免疫鼠时,其保护率为60%.以上结果表明pCXN2-E在实验动物内表达出的DV2E蛋白可以诱导免疫动物的体液免疫和细胞免疫应答,尤其是MHC-Ⅰ限制性杀伤性CD8+T淋巴细胞水平的提高对清除病毒是十分有利的.因此,DV2 E DNA免疫为登革病毒DNA疫苗的发展进行了有益的探索.
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| 关 键 词： | 登革病毒2型(DV2) E蛋白 基因克隆 DNA免疫 |
| 文章编号： | 1003-5125(2003)03-0201-05 |
| 修稿时间： | 2002年11月4日 |
Eukaryotic Expressing and the DNA Immunization of E Protein Gene of Dengue virus 2 |
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