| TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR技术快速检测H5亚型禽流感病毒 |
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| 引用本文： | 卢亦愚,严菊英,冯燕,徐昌平,史雯,茅海燕.TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR技术快速检测H5亚型禽流感病毒[J].中国病毒学,2006,21(5):472-476. |
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| 作者姓名： | 卢亦愚 严菊英 冯燕 徐昌平 史雯 茅海燕 |
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| 作者单位： | 浙江省疾病预防控制中心,浙江杭州,310009 |
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| 摘 要： | 建立以TaqMan-MGB荧光探针为特点的荧光定量RT-PCR方法,用于检测H5亚型禽流感病毒.针对H5亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因保守区域设计特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,筛选并优化荧光定量RT-PCR反应体系与反应条件,用以提高方法的特异性、敏感性与准确性;并通过体外克隆技术建立病毒基因拷贝数进行定量分析.结果表明引物与探针的优化浓度分别640nmol/L和480nmol/L,体系具有良好的保守性和特异性,与其他呼吸道病毒均无交叉反应.方法检测灵敏度为100拷贝/反应,标准曲线线性范围为107～102拷贝/反应,从病毒核酸提取至检测完成仅需3h左右,操作简便,重现性好.本研究建立的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法特异、敏感、快速,适合于临床实验室进行H5亚型禽流感病毒的快速定量检测.
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| 关 键 词： | 荧光定量RT-PCR TaqMan-MGB探针 H5亚型禽流感病毒(AIV H5) |
| 文章编号： | 1003-5125(2006)05-0472-05 |
| 修稿时间： | 2006年3月16日 |
Rapid Detection of Avian Influenza virus H5 by Real-Time RT-PCR and TaqMan-MGB probe |
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| LU Yi-yu,YAN Ju-ying,FENG Yan,XU Chang-ping,SHI Wen,MAO Hai-yan.Rapid Detection of Avian Influenza virus H5 by Real-Time RT-PCR and TaqMan-MGB probe[J].Virologica Sinica,2006,21(5):472-476. |
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| Authors: | LU Yi-yu YAN Ju-ying FENG Yan XU Chang-ping SHI Wen MAO Hai-yan |
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