| 棉铃虫核多角体病毒泛素基因的克隆表达及抗体制备 |
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| 引用本文： | 李京京,姚青,杨东叶,余泽华,陈新文.棉铃虫核多角体病毒泛素基因的克隆表达及抗体制备[J].中国病毒学,2005,20(3):298-302. |
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| 作者姓名： | 李京京 姚青 杨东叶 余泽华 陈新文 |
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| 作者单位： | 1. 华中师范大学昆虫学研究所,武汉,430079
2. 中国科学院武汉病毒研究所分子病毒学实验室,武汉,430071 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发现规划项目(973计划) (No.2002CCCA02800),国家自然科学基金资助项目(No.39870039) |
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| 摘 要： | 昆虫杆状病毒和痘病毒是目前已知唯一编码泛素基因的病毒.通过PCR方法,克隆了棉铃虫核多角体病毒(HaSNPV)泛素基因(Ubiquitin,Ubi).序列分析表明,该基因编码区全长252bp,编码83个氨基酸残基,预计分子量为9.24kDa.将泛素基因克隆到原核表达载体pET-28a上,构建重组质粒pET-Ubi,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导表达融合蛋白.用His-tag抗体检测目的蛋白,Westen-blot实验证明所表达的蛋白是带有His-tag的重组融合蛋白.通过改变IPTG浓度和诱导时间对表达条件进行了优化.利用NI-琼脂糖凝胶亲和层析柱纯化目的蛋白,SDS-PAGE鉴定为单一条带,同时用提纯蛋白制备了特异性抗体,为进一步的研究打下基础.
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| 关 键 词： | 棉铃虫核多角体病毒 泛素 克隆 原核表达 抗血清 |
| 文章编号： | 1003-5125(2005)03-0298-05 |
| 修稿时间： | 2004年11月17 |
Cloning and Expression of Ubiquitin Gene of Helicoverpa armigera Single-nucleocapsid Nucleopolyhedrovirus and its Antiserum Preparation |
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| LI Jing-jing,YAO Qing,YANG Dong-ye,YU Ze-huai,CHEN Xin-wen.Cloning and Expression of Ubiquitin Gene of Helicoverpa armigera Single-nucleocapsid Nucleopolyhedrovirus and its Antiserum Preparation[J].Virologica Sinica,2005,20(3):298-302. |
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| Authors: | LI Jing-jing YAO Qing YANG Dong-ye YU Ze-huai CHEN Xin-wen |
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