一步法双重RT-PCR检测SARS冠状病毒技术研究 |
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引用本文: | 周敦金,唐少文,王斌,杨华芬,刁平,许青,刘斌,杨继红.一步法双重RT-PCR检测SARS冠状病毒技术研究[J].中国病毒学,2003,18(3):232-236. |
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作者姓名: | 周敦金 唐少文 王斌 杨华芬 刁平 许青 刘斌 杨继红 |
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作者单位: | 1. 武汉市疾病预防控制中心,湖北,武汉,430022 2. 武汉市传染病医院,湖北,武汉,430022 3. 武汉市疾病预防控制中心,湖北,武汉,430022;中国科学院武汉病毒研究所,中国科学院分子病毒学重点实验室,湖北武汉,430071 |
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摘 要: | 参照WHO公布的PCR检测SARS相关冠状病毒的引物序列,我们合成了4对引物,建立了一步法RT-PCR检测SARS相关冠状病毒的方法.利用该方法,对武汉市非典型肺炎疑似病例喉漱液进行了SARS相关冠状病毒检测,其中w20用4对引物检测均在相应的位置出现了DNA条带,W1只有BNIin-s/as引物出现预期产物.同时我们将样品W20的RT-PCR扩增产物进行了序列测定,结果显示该片段序列与其他地区和国家分离的SARS冠状病毒基因高度同源性,这进一步说明RT-PCR扩增的产物是SARS冠状病毒基因片段.在此基础上我们又建立了四种SARS冠状病毒一步法双重RT-PCR检测方法,在一个RT-PCR反应中用两套引物同时对SARS冠状病毒基因两个不同的片段进行检测,检测结果具有更高的特异性.
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关 键 词: | 传染性非典型肺炎 冠状病毒 一步法RT-PCR 双重RT-PCR 检测 |
文章编号: | 1003-5125(2003)03-0232-05 |
修稿时间: | 2002年5月25日 |
One-step Duplex RT-PCR Assay for Detection SARS Associated Coronavirus |
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Abstract: | |
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