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一步法双重RT-PCR检测SARS冠状病毒技术研究
引用本文:周敦金,唐少文,王斌,杨华芬,刁平,许青,刘斌,杨继红.一步法双重RT-PCR检测SARS冠状病毒技术研究[J].中国病毒学,2003,18(3):232-236.
作者姓名:周敦金  唐少文  王斌  杨华芬  刁平  许青  刘斌  杨继红
作者单位:1. 武汉市疾病预防控制中心,湖北,武汉,430022
2. 武汉市传染病医院,湖北,武汉,430022
3. 武汉市疾病预防控制中心,湖北,武汉,430022;中国科学院武汉病毒研究所,中国科学院分子病毒学重点实验室,湖北武汉,430071
摘    要:参照WHO公布的PCR检测SARS相关冠状病毒的引物序列,我们合成了4对引物,建立了一步法RT-PCR检测SARS相关冠状病毒的方法.利用该方法,对武汉市非典型肺炎疑似病例喉漱液进行了SARS相关冠状病毒检测,其中w20用4对引物检测均在相应的位置出现了DNA条带,W1只有BNIin-s/as引物出现预期产物.同时我们将样品W20的RT-PCR扩增产物进行了序列测定,结果显示该片段序列与其他地区和国家分离的SARS冠状病毒基因高度同源性,这进一步说明RT-PCR扩增的产物是SARS冠状病毒基因片段.在此基础上我们又建立了四种SARS冠状病毒一步法双重RT-PCR检测方法,在一个RT-PCR反应中用两套引物同时对SARS冠状病毒基因两个不同的片段进行检测,检测结果具有更高的特异性.

关 键 词:传染性非典型肺炎  冠状病毒  一步法RT-PCR  双重RT-PCR  检测
文章编号:1003-5125(2003)03-0232-05
修稿时间:2002年5月25日

One-step Duplex RT-PCR Assay for Detection SARS Associated Coronavirus
Abstract:
Keywords:
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