| 单引物法扩增马尾松毛虫CPV基因组第8片段及其序列分析 |
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| 引用本文： | 胡建芳,张珈敏,杨娟,邓晓军,汪洋,胡远扬.单引物法扩增马尾松毛虫CPV基因组第8片段及其序列分析[J].中国病毒学,2003,18(1):39-43. |
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| 作者姓名： | 胡建芳 张珈敏 杨娟 邓晓军 汪洋 胡远扬 |
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| 作者单位： | 武汉大学病毒研究所,湖北,武汉,430072 |
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| 摘 要： | 本文利用T4 RNA连接酶将5'-磷酸、3'-氨基修饰的引物1连接到马尾松毛虫质型多角体病毒第8片段dsRNA的3'-OH端.经逆转录、退火、补齐形成全长双链cDNA.使用单一的互补引物2进行PCR扩增.扩增产物克隆在pMD18-T载体上.对重组子进行限制性内切酶分析及序列测定,结果表明,克隆片段全长330bp,S'端具有CPV-1型末端保守序列AGTAAA'端具有保守序列GTTAGCC.起始密码子从ATG位于38-40残基,终止密码子TAA位于1208～1210残基.推测S8片段编码390个氨基酸多肽,分子量为44kDa.与舞毒蛾质型多角体病(LdCPV)第8片段相比较,核苷酸和氨基酸同源性分别为97%和98%.与家蚕质型多角体病毒(BmCPV)第8片段相比较,核苷酸和氨基酸的同源性分别为83%和85%.与人的呼肠孤病毒第8片段比较没有明显的同源性.
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| 关 键 词： | T4RNA连接酶 马尾松毛虫 质型多角体病毒 |
| 文章编号： | 1003-5125(2003)01-0039-05 |
| 修稿时间： | 2002年5月14日 |
Molecular Cloning Dendrolimus punctatus cytoplasmic polyhedrosis virus Segment 8 by Single Primer Amplification and Sequence Analysis |
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