| IBDV多聚蛋白基因真核表达质粒的构建与表达 |
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| 引用本文： | 孙建和,蒋静,陆苹.IBDV多聚蛋白基因真核表达质粒的构建与表达[J].中国病毒学,2004,19(3):232-236. |
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| 作者姓名： | 孙建和 蒋静 陆苹 |
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| 作者单位： | 上海交通大学农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海,201101 |
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| 基金项目： | 上海市科学技术发展基金资助项目(01JC14034) |
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| 摘 要： | 将IBDV上海超强毒株的多聚蛋白基因(vp2-4-3)克隆入真核表达载体pALTER-MAX,构建成功pALTER-MAX-VP2-4-3真核表达质粒,经纯化后,pALTER-MAX-VP2-4-3在LipofectamieTM 2000介导下转染Vero细胞、11日龄鸡胚的绒毛尿囊膜(CAM)和肌肉注射2日龄的雏鸡,1周后,分别提取细胞或组织中的总DNA或总RNA,用DIG标记探针均可检测到阳性杂交信号;转染的Vero细胞飞片和肌肉冰冻切片,进行免疫荧光检测均呈现阳性结果;转染的鸡胚CAM匀浆上清,用兔抗IBDV超强毒的高免血清,经Dot-ELISA检测呈现阳性.表明转染后基因获得表达,表达的蛋白具有免疫反应性.
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| 关 键 词： | IBDV超强毒 多聚蛋白(VP2-4-3)基因 真核表达质粒 表达与检测 |
| 文章编号： | 1003-5152(2004)03-0232-05 |
| 修稿时间： | 2003年10月21 |
Construction and Expression of Eukaryotic Expression Plasmid of VP2-4-3 Gene of Very Virulent Infectious Bursal Disease Virus |
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