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汉滩病毒M、S基因不同拼接方式在昆虫细胞中融合表达效果比较
引用本文:罗雯,徐志凯,张芳琳,阎岩,吴兴安,刘勇,白文涛,王海涛.汉滩病毒M、S基因不同拼接方式在昆虫细胞中融合表达效果比较[J].中国病毒学,2002,17(3):226-229.
作者姓名:罗雯  徐志凯  张芳琳  阎岩  吴兴安  刘勇  白文涛  王海涛
作者单位:第四军医大学微生物学教研室,陕西西安,710032
基金项目:国家自然科学基金资助(30070686);国家教育部骨干教师计划资助
摘    要:将汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与核蛋白(NP)部分片段以不同方式拼 接,构建G1S0.7或S0.7G1嵌合基因,分别插入杆状病毒表达载体pFBD,转化DH10Bac致敏菌, 获得含有嵌合基因的重组穿梭质粒Bacmid,用其转染Sf9细胞,快速筛选出含有G1S0.7或S0.7 G1嵌合 基因的重组杆状病毒,在昆虫细胞中表达外源融合蛋白.利用间接免疫荧光、ELISA和免疫 印迹对表达产物进行检测.结果表明,含G1S0.7嵌合基因之重组杆状病毒可在昆虫细胞中表 达出融合蛋白,该蛋白可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G1特异性单抗所识别,其分子量约97 kD;含S0.7G1嵌合基因之重组杆状病毒在昆虫细胞中表达的融合蛋白,只能被抗汉滩病毒核 蛋白特异性单抗所识别,其分子量约43kD.上述结果提示,G1S0.7嵌合基因可能在昆虫细胞 中表达出完整的具有生物学活性的融合蛋白,S0.7G1嵌和基因的昆虫细胞表达产物不完整 ,且生物学活性不如G1S0.7嵌合基因的表达产物.

关 键 词:汉滩病毒  杆状病毒  昆虫细胞  融合表达
文章编号:1003-5125(2002)03-0226-04
修稿时间:2002年1月11日

Comparison of Expression Results of Different Connection M anners of Hantaan Virus M and S Gene Segments in Insect Cells
LUO Wen,XU Zhi—kai”,ZHANG Fang—lin,YAN Yan,W U Xing—an,LIU Yong,BA I W en—tao,W ANG Hai—tao.Comparison of Expression Results of Different Connection M anners of Hantaan Virus M and S Gene Segments in Insect Cells[J].Virologica Sinica,2002,17(3):226-229.
Authors:LUO Wen  XU Zhi—kai”  ZHANG Fang—lin  YAN Yan  W U Xing—an  LIU Yong  BA I W en—tao  W ANG Hai—tao
Institution:1.Department of Microbiology,Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,China
Abstract:
Keywords:Hantaan virus  Baculovirus  Insect cell  Fused expresion
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