| SARS病毒核蛋白基因的克隆及其表达研究 |
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| 引用本文： | 朱函坪,陆群英,卢亦愚,姚苹苹,徐芳,葛琼,翁景清,严菊英,龚黎明,施雯,赵芝雅,朱智勇.SARS病毒核蛋白基因的克隆及其表达研究[J].中国病毒学,2003,18(5):451-453. |
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| 作者姓名： | 朱函坪 陆群英 卢亦愚 姚苹苹 徐芳 葛琼 翁景清 严菊英 龚黎明 施雯 赵芝雅 朱智勇 |
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| 作者单位： | 浙江省疾病预防控制中心病毒研究所,浙江杭州,310009 |
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| 摘 要： | 从一例输入性传染性非典型性肺炎病人血清中提取病毒RNA,通过RT-PCR方法扩增出SARS病毒核蛋白基因片段,克隆入质粒载体pUCm-T后,进行核苷酸序列的测定及分析,与已公布的SARS病毒基因序列进行比较,证实为SARS冠状病毒核蛋白基因.为了解该病毒核蛋白的抗原特性,将核蛋白基因插入表达载体,构建重组质粒pET28a-SN,转导大肠杆菌BL21(DE3)后,加IPTG诱导表达.产物经SDS-PAGE电泳分析,表达出相对分子量约为50kDa的蛋白,占整个菌体的45%左右.Western-blot分析表明,表达产物仅与SARS阳性病人血清起反应,而与正常血清不起反应.间接ELISA免疫检测,抗原滴度达112500.表明表达的核蛋白为SARS特异性抗原,这为SARS病毒的诊断试剂的研制提供了方便而安全的抗原来源.
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| 关 键 词： | SARS病毒(SARS-associated coronavirus SARS-CoV) 核蛋白基因 序列分析 表达 抗原性 |
| 文章编号： | 1003-5125(2003)05-0451-03 |
| 修稿时间： | 2003年7月23日 |
Cloning and Expression of Nucleocapsid Protein Gene of SARS Associated Coronavirus |
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| ZHU Han—ping,LU Qun—ying,LU Yi—yu,YAO Ping—ping,XU Fang,GE Qong,WENG Jing—qing,YAN Ju—ying,GONG Li—ming,SHI W en,ZHAO Zhi—ya,ZHU Zhi—yong.Cloning and Expression of Nucleocapsid Protein Gene of SARS Associated Coronavirus[J].Virologica Sinica,2003,18(5):451-453. |
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| Authors: | ZHU Han—ping LU Qun—ying LU Yi—yu YAO Ping—ping XU Fang GE Qong WENG Jing—qing YAN Ju—ying GONG Li—ming SHI W en ZHAO Zhi—ya ZHU Zhi—yong |
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| Institution: | 1.Institutefor Virus Disease Research，Zhefiang Centerfor Disease Prevention and Control,Hangzhou 310009，China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Key word:SARS-associated coronavirus(SARS-CoV) Nucleocapsid gene Sequence analysis Protein expression |
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