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表达绿色荧光蛋白的重组CVI988病毒的构建及特性
引用本文:张雪莲,范伟兴,周玉传,缪德年,钱莺娟,陈溥言.表达绿色荧光蛋白的重组CVI988病毒的构建及特性[J].中国病毒学,2003,18(5):468-472.
作者姓名:张雪莲  范伟兴  周玉传  缪德年  钱莺娟  陈溥言
作者单位:南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京,210095
基金项目:国家863计划(2002AA245051)
摘    要:提取马立克氏病毒I型疫苗毒株CVI988的总DNA为模板,利用PCR技术扩增出病毒生长非必需的US2基因并克隆入T-easy载体.将CMV启动子和增强子控制的含GFP基因表达盒克隆入US2基因中,成功构建了含GFP基因的转移质粒载体pGUS2GFP.用脂质体将其与CVI988 株共转染CEF细胞,用96孔板稀释法得到纯化的表达绿色荧光蛋白的重组CVI988病毒株rCVIGFP,并分别测定其在体内和体外的生长情况.表达EGFP基因的重组病毒在细胞上生长曲线与亲本毒CVI988类似,体外实验表明,1日龄腹腔接种该重组毒后,可以从鸡体内分离到表达绿色荧光的病毒.

关 键 词:马立克氏病病毒  绿色荧光蛋白  转染  重组病毒  生长曲线
文章编号:1003-5125(2003)05-0468-05
修稿时间:2003年4月28日

Construction and Characterization of Recombinant CVI988 Expressing the Green Fluorescent Protein
ZHANG Xue-lian,FAN Wei-xing,ZHOU Yu-chuan,MIAO Denian,QIAN Ying-juan,CHEN Puyan.Construction and Characterization of Recombinant CVI988 Expressing the Green Fluorescent Protein[J].Virologica Sinica,2003,18(5):468-472.
Authors:ZHANG Xue-lian  FAN Wei-xing  ZHOU Yu-chuan  MIAO Denian  QIAN Ying-juan  CHEN Puyan
Institution:1.Key Lab ofAnimal Diseases Diagnostic and Immunology,Ministry ofAgriculture,Nanjing Agriculture University,Nanjing 2 10095
Abstract:
Keywords:Marek’S disease virus  GFP  Tran sfection
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