| 人呼吸道合胞病毒RNA聚合酶复合体蛋白N、P的表达鉴定 |
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| 引用本文： | 虞结梅,何金生,李栋梁,杨兵,袁媛.人呼吸道合胞病毒RNA聚合酶复合体蛋白N、P的表达鉴定[J].中国病毒学,2006,21(3):213-216. |
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| 作者姓名： | 虞结梅 何金生 李栋梁 杨兵 袁媛 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学免疫学教研室,安徽,合肥,230032 |
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| 摘 要： | 本研究根据编码A亚型人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory Syncytial Virus,HRSV)核壳体蛋白(Nucleocapsid protein, N)和磷蛋白(phosphoprotein, P)的基因序列,各设计一对特异性的引物,应用RT-PCR技术,从感染HRSV的HEp-2细胞中扩增获得n和p的基因片断,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+).获得的重组质粒通过脂质体Lipofectamine 2000转染COS-7细胞,72 h后再用Western blot鉴定蛋白的表达.结果显示真核表达载体pcDNA3.1(+)/N和pcDNA3.1(+)/P的限制性内切酶分析结果与预期一致,基因序列分析显示没有发生无义突变,利用蛋白印记方法也检测到了N和P的特异性条带.于是我们认为成功构建了含有HRSV N和P编码基因的真核表达载体,在真核细胞内能顺利表达.为进一步开展HRSV反向遗传学等研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 人呼吸道合胞病毒(HRSV) 核壳体蛋白 磷蛋白 真核表达 |
| 文章编号： | 1003-5125(2006)03-0213-04 |
| 修稿时间： | 2005年10月18 |
Cloning and Expression of N and P of Human Respiratory Syncytial Virus RNA Polymerasa Complex |
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| YU Jie-mei,He Jin-sheng,LI Dong-liang,YANG Bing,YUAN Yuan.Cloning and Expression of N and P of Human Respiratory Syncytial Virus RNA Polymerasa Complex[J].Virologica Sinica,2006,21(3):213-216. |
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| Authors: | YU Jie-mei He Jin-sheng LI Dong-liang YANG Bing YUAN Yuan |
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| Institution: | 1.Department of Immunology, Anh.ui Medical University, Hefei 230032, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Human respiratory syncytial virus(HRSV) Nucleocapsid protein Phosphoprotein Eukaryotic expression |
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