pCR3.1—bvLDH-C4′的构建及在体内外的表达 |
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引用本文: | 常建军,杨颖,彭景楩.pCR3.1—bvLDH-C4′的构建及在体内外的表达[J].动物学杂志,2003,38(1):28-33. |
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作者姓名: | 常建军 杨颖 彭景楩 |
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摘 要: | 精子特异性乳酸脱氢酶(LDH—C4)在精子的运动和存活等生理活动中起着重要的作用。研究表明,LDH—C4接种鼠、兔等能够降低动物的生育率。通过RT—PER方法从布氏田鼠睾丸总RNA中克隆出编码抗原决定簇的LDH—C4基因片断;采用T—A克隆的方法将其插入到pCR3.1载体中构建重组载体pCR3.1—bvLDH—C4′,测序结果表明克隆的基因片断与已知小鼠相应片断有83%的序列同源。通过质脂体法转染HeLa细胞,RT—PCR证实其可在mRNA水平有效表达;通过肌肉接种BAIB/c小鼠,RT-PER结果表明其在体内也可有效表达。
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关 键 词: | LDH-C4 布氏田鼠 基因疫苗 质脂体转染法 精子特异性乳酸脱氢酶 基因表达 pCR3.1-bvLDH-C4′ |
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