| 抗乙型脑炎病毒单抗重链可变区基因的筛选和鉴别 |
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| 引用本文： | 陈伯权.抗乙型脑炎病毒单抗重链可变区基因的筛选和鉴别[J].遗传学报,1992,19(2):169-176. |
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| 作者姓名： | 陈伯权 |
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| 作者单位： | 中国科学院遗传研究所，中国科学院遗传研究所，中国科学院遗传研究所，中国科学院遗传研究所，中国科学院遗传研究所，中国科学院遗传研究所，中国预防医学科学院病毒研究所，中国预防医学科学院病毒研究所，中国预防医学科学院病毒研究所，中国预防医学科学院病毒研究所，黑龙江省应用微生物所 北京 100101，北京 100101，北京 100101，北京 100101，北京 100101，北京 100101，北京，北京，北京，北京，哈尔滨 |
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| 摘 要： | 为了制备抗乙型脑炎病毒的人-鼠嵌合抗体,以分泌抗乙型脑炎病毒单抗的51-8杂交瘤细胞株为材料,分离这一单抗的重链可变区基因。杂交瘤细胞的大分子量DNA经Bam HI部分酶切后,以λEMBL-3为载体,构建了总数为2×10~7pfu的基因文库。以抗乙脑病毒单抗重链可变区cDNA为探针,从360000个噬菌斑中筛选出9个阳性斑,经点杂交及Southern杂交证明它们都含有重链可变区基因的片段。进一步以J_(11)探针(含J_3、J_4和重链增强子)对其中4个重组体进行鉴别。经EcoRI酶切后,有3个重组体含有与肝细胞和Sp2/0细胞相同的3.8kb片段,而第4个重组体(λ8a4)没有这一片段,却有一个4.5kb片段,这是在肝细胞和Sp2/0细胞中不存在的。从而证明前3个重组体的插入片段是未经重排的重链可变区基因片段,而λ8a4中的插入片段含有经过重排的功能性可变区基因。这一4.5kb片段不能与含有J_1—J_2的探针杂交,却同时含有V_H、J,或/和J_4和增强子。进一步证明,这是一个功能性的可变区基因。因此,将这一4.5kb片段分离出来之后,在pUC19中亚克隆并作酶切图。为构建抗乙脑病毒的人-鼠嵌合重链基因奠定了基础。
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| 关 键 词： | 乙脑病毒 可变区基因 单克隆抗体 |
Screening and Distinguishing Heavy chain Variable region Genes of McAb Against Encephalitis Type B Virus |
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| Huang Hualiang Gui Jin Song Haiyan Wang Yanli Shang Furong Lin Qing.Screening and Distinguishing Heavy chain Variable region Genes of McAb Against Encephalitis Type B Virus[J].Journal of Genetics and Genomics,1992,19(2):169-176. |
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| Authors: | Huang Hualiang Gui Jin Song Haiyan Wang Yanli Shang Furong Lin Qing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Variable region gene Monoclonal antibody Encephalitis type B virus Gene library |
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