| 盐藻肌动蛋白基因启动子驱动的bar基因表达作为核转化筛选标记 |
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| 引用本文： | 姜国忠,吕玉民,牛向丽,薛乐勋.盐藻肌动蛋白基因启动子驱动的bar基因表达作为核转化筛选标记[J].遗传学报,2005,32(4):424-433. |
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| 作者姓名： | 姜国忠 吕玉民 牛向丽 薛乐勋 |
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| 作者单位： | 郑州大学医学院细胞生物学研究室,郑州,450052 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基因项目(编号: 30270031 )，国家“863计划”项目(编号: 2002AA628050 )资助~~ |
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| 摘 要： | 运用基因组步行方法克隆盐藻肌动蛋白基因5′上游调控序列，发现相对于ATG上游-573和-424bp的位置上分别有75bp长的两个重复序列。没有典型的TATA盒，但有两个TATA样结构、一个CCAAT结构和一个与GCTC(G／C)AAGGC一致的序列。以700bp的盐藻肌动蛋白基因启动子区序列驱动bar基因的表达作为转化盐藻的筛选标记。转化的藻细胞暗光恢复24h后，在含0．5μg／mL除草剂的培养基中常规培养生长1周，然后将细胞平铺于含0．5μg／mL除草剂的固体培养基上继续筛选培养。约20d后从固体培养板上挑选出5个藻落并作了进一步培养和分析。结果显示，5个转化藻中携带bar嵌合基因的整合位点均位于核基因组内。Southern blotting分析表明，仅有一个转化藻整合单拷贝的bar基因，而另外4个转化藻株则包含多个拷贝bar基因片段，提示盐藻核基因转化主要是外源基因的随机整合，外源基因在转化盐藻中的整合拷贝数并不影响其除草剂抗性。RT-PCR方法证明了bar基因在转化藻中的转录。5个转化藻在含除草剂的液体培养基中维持生长了至少7个月，表明核基因转化的稳定性。
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| 关 键 词： | 杜氏盐藻 肌动蛋白启动子 重复序列 bar基因 选择标记 |
The Actin Gene Promoter-driven bar as a Dominant Selectable Marker for Nuclear Transformation of Dunaliella salina |
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| JIANG Guo-Zhong,L Yu-Min,NIU Xiang-Li,Xue Le-xun.The Actin Gene Promoter-driven bar as a Dominant Selectable Marker for Nuclear Transformation of Dunaliella salina[J].Journal of Genetics and Genomics,2005,32(4):424-433. |
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| Authors: | JIANG Guo-Zhong L Yu-Min NIU Xiang-Li Xue Le-xun |
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| Institution: | JIANG Guo-Zhong,L(U) Yu-Min,NIU Xiang-Li,Xue Le-xun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Dunaliella salina actin promoter repetitive sequences bar gene selectable marker |
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