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人胚胎干细胞和分化细胞差别基因的筛选
引用本文:杜娟,林戈,卢光琇.人胚胎干细胞和分化细胞差别基因的筛选[J].遗传学报,2004,31(9):956-962.
作者姓名:杜娟  林戈  卢光琇
作者单位:中南大学生殖与干细胞工程研究所,长沙,410078
基金项目:国家自然科学基金重点项目 (编号 :3 0 0 3 0 0 70 ),国家重点基础研究发展规划 (973 )项目 (编号 :0 0 1CB51 0 1 0 )资助 ~~
摘    要:人类胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)在增殖过程中如何保持未分化状态是干细胞生物学的核心问题之一,已有的LIF通路、Oct-4因子及Nanog基因的作用还不能对这一问题做出全面的解释。为进一步了解维持hESC未分化状态的机制,采用自行建立培养的hESC及分化的hESC细胞克隆(differentiated hESC,dhESC),应用抑制消减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)结合反向cDNA斑点杂交技术,筛选出在hESC高表达、在dhESC中低表达或不表达的表达序列标签(Expressed Sequence Tag,EST)共105个。通过与GenBank比较,显示其中76个EST代表61个已知基因,18个EST代表15个假想基因,另有11个属于未知EST。选取其中8个克隆进行半定量RT-PCR分析,证实其中7个克隆在hESC中高表达,在dhESC中低表达或不表达。结果表明,hESC分化前后涉及多个基因的差异表达,对这些在hESC中高表达、在dhESC中低表达或不表达基因的进一步功能研究为阐明维持hESC未分化状态的机制提供了基础。

关 键 词:人类  胚胎干细胞  分化细胞  反向cDNA斑点杂交技术  表达序列标签  差别基因
文章编号:0379-4172(2004)09-0956-07

Screening of Differential Genes Between Human Embryonic Stem Cell and Differentiated Cell
Abstract:
Keywords:human embryonic stem cell  suppression subtractive hybridization  differentiated expressed genes  undifferentiated state
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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