| 人高密度脂蛋白受体胞外片段在甲醇酵母中的表达 |
| |
| 引用本文： | 胡箭,洪斌,李元.人高密度脂蛋白受体胞外片段在甲醇酵母中的表达[J].遗传学报,2003,30(1):20-24. |
| |
| 作者姓名： | 胡箭 洪斌 李元 |
| |
| 作者单位： | 中国医学科学院,中国协和医科大学医药生物技术研究所,北京,100050 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目 (39930 190 )~~ |
| |
| 摘 要： | 高密度脂蛋白受体在胆固醇逆向运输中起重要作用，并且其可以做为动脉粥样硬化的新型治疗靶点。为了构建以竞争性受体-配体相互作用为基础的体外高通量药物筛选模型，在甲醇酵母中表达了高密度脂蛋白受体胞外结构域。应用RT-PCR方法从人肝癌Bel-7402总RNA中扩增了编码高密度脂蛋白受体胞外结构域的基因片段，此基因片段测序证实后亚克隆至甲醇酵母分泌表达质粒pPIC9K中。经测序验证读码框正确后将重组质粒电转至Pichia pastorisGS115中。应用PCR方法确定目的基因的整合和Mut^ 表型。重组菌株用1％甲醇诱导5天后取发酵上清进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果表明，在分子量约64.5kDa处有sHDLR表达。随后应用Dil-AcLDL为配体证明了表达的sHDLR具有结合其配体AcLDL的生物学活性。
|
| 关 键 词： | 人高密度脂蛋白受体 胞外片段 甲醇酵母 表达 |
| 文章编号： | 0379-4172(2003)01-0020-05 |
| 修稿时间： | 2002年6月3日 |
Expression of the Human Extracellular Domain of High Density Lipoprotein Receptor in Methylotropic Yeast |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | high density lipoprotein receptor Pichia pastoris |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
