| 一个新的人类睾丸特异基因的cDNA克隆和表达分析 |
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| 引用本文： | 李丹,卢光琇,傅俊江,莫亚勤,邢晓为,刘刚.一个新的人类睾丸特异基因的cDNA克隆和表达分析[J].遗传学报,2004,31(6):545-551. |
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| 作者姓名： | 李丹 卢光琇 傅俊江 莫亚勤 邢晓为 刘刚 |
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| 作者单位： | 中南大学生殖与干细胞工程研究所,长沙,410078 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划 ( 973 )资助项目 (No .G19990 5 5 90 1)~~ |
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| 摘 要： | 运用“数据库消减杂交”(DigitalDifferentialDisplay)方法筛选人类睾丸特异表达新基因 ,获得了有差异显示的代表新基因的克隆重叠群 ,挑选其中一个克隆重叠群HS .12 9794进行多组织RT PCR ,初步证实该重叠群在人睾丸中有高表达。然后从包含该重叠群的IMAGE克隆出发 ,采用生物信息学的方法快速克隆了一个人类新基因的全长cDNA序列 ,其全长 2 4 30bp ,开放阅读框为 6 76～ 12 4 8bp ,定位于 3p2 1 1,编码由 190个氨基酸组成 ,分子量为 2 0 4 17 8Da ,等电点为 5 2 3的一个偏酸性蛋白质 ,该蛋白与已知蛋白质无明显同源性。克隆实验验证该基因阅读框完全正确 ,半定量RT PCR进一步显示该基因在人不同发育时期的睾丸及精子细胞中有表达 ,推测其可能与精子生成相关 ,暂命名为SRG5 (TestisSpermatogenesisRelatedGene 5 ,SRG5 ) (GenBank登录号 :AY2 2 1117)。SRG5基因的成功克隆表明 ,“数据库消减杂交”与实验验证相结合的技术路线是一种快捷高效的发现更多人类功能新基因的新策略。
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| 关 键 词： | 基因克隆 数据库消减杂交 逆转录聚合酶反应 睾丸 组织特异表达 |
| 文章编号： | 0379-4172(2004)06-0545-07 |
Molecular Cloning and Expression Analysis of a Novel Human Testis-specific Gene |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | gene cloning Digital Differential Display RT-PCR testis tissues-specific expression |
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