| 人参皂苷Rb3糖基水解酶的纯化及其反应特性 |
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| 引用本文： | 张睿哲,徐龙权,宋建国,鱼红闪.人参皂苷Rb3糖基水解酶的纯化及其反应特性[J].广西植物,2020,40(5):706-714. |
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| 作者姓名： | 张睿哲 徐龙权 宋建国 鱼红闪 |
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| 作者单位： | 大连工业大学 生物工程学院, 辽宁 大连 116034 |
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| 基金项目： | 国家高端外国专家项目(GDT20152100019)[Supported by the National Foreign Expert Program( GDT20152100019)]。 |
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| 摘 要： | 人参皂苷Rb3是三七茎叶皂苷的主要成分。为了充分利用廉价的三七茎叶皂苷,该研究以微生物Aspergillus sp. P90r菌为对象,综合运用生物转化的方法,经过提取、分离纯化和酶活力测定等步骤,最终以确定酶反应途径的方式得到了所产的特异性人参皂苷Rb3糖基水解酶的相关性质和动力学等反应特性。结果表明:该酶比Absidia sp. GRB3-X8r菌产酶活力高15%~25%,SDS-PAGE电泳结果测得分子量约为65.6ku,纯化后酶蛋白的含量为0.237 mg·mL~(-1),蛋白比活力可达到169 U·mg~(-1),纯化倍数为13.70,回收率为9.39%。人参皂苷Rb3糖基水解酶在pH=5.0的偏酸性环境下酶活力很高,最适反应条件:pH=3.0~5.0,温度45℃,其中在pH=4.0~6.0范围内相对稳定。该酶在20 min时进入混合级反应,酶反应米氏常数Km值为8.77 mmol·L~(-1),V_(max)为57.44 mmol·L~(-1)·h~(-1),在60 min时反应速度达到最大,Vmax趋于稳定,为66.63mmol·L~(-1)·h~(-1)。通过对酶的催化特性研究表明,该酶先水解Rb3的20-O-木糖基,其次水解3-O-葡萄糖基,最终催化反应产物中有F2和C-K生成。综上结果,微生物Aspergillus sp. P90r菌酶具有能水解人参皂苷Rb3木糖基和葡萄糖基的特异性。
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| 关 键 词： | 人参皂苷Rb3 人参皂苷Rb3糖基水解酶 酶学性质 酶分离纯化 酶促反应动力学 |
| 收稿时间： | 2019/4/30 0:00:00 |
Purification and reaction characteristics of
hydrolyzed ginsenoside Rb3-glycosylase |
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| ZHANG Ruizhe,XU Longquan,SONG Jianguo,YU Hongshan.Purification and reaction characteristics of
hydrolyzed ginsenoside Rb3-glycosylase[J].Guihaia,2020,40(5):706-714. |
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| Authors: | ZHANG Ruizhe XU Longquan SONG Jianguo YU Hongshan |
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| Institution: | College of Biology Engineering, Dalian Polytechnic University, Dalian 116034, Liaoning, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hydrolyzed ginsenoside Rb3 hydrolyzed ginsenoside Rb3-glycosylase enzyme properties isolation and purification enzyme kinetics |
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