| 桔梗RAPD反应体系的优化 |
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| 引用本文： | 孙丽娜,严一字,吴基日,吴松权,金东淳,王立平,.桔梗RAPD反应体系的优化[J].广西植物,2007,27(3):410-413. |
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| 作者姓名： | 孙丽娜 严一字 吴基日 吴松权 金东淳 王立平 |
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| 作者单位： | 延边大学,农学院,吉林,龙井,133400 |
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| 基金项目： | 吉林省科技厅资助(20040553)，延边大学校课题[延大科合字(03)第07号]~~ |
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| 摘 要： | 以通化桔梗为材料,用改进的CTAB法提取桔梗叶片的总DNA,通过对不同镁离子浓度、dNTP浓度、模板DNA含量、引物浓度、DNA聚合酶量条件下的RAPD扩增反应的效果,建立了一个适合桔梗的比较稳定的RAPD反应体系,用于桔梗遗传多样性分析。结果表明,桔梗RAPD扩增反应的最佳体系为:模板DNA20ng,dNTP150μmol/L,引物0.3μmol/L,Mg2+浓度2.0mmol/L,TaqDNA聚合酶1Unit,10×Buff-er2.0μL,PCR反应总体积为20μL。按此优化RAPD条件进行实验,重现性良好。
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| 关 键 词： | 桔梗 体系优化 CTAB RAPD |
| 文章编号： | 1000-3142（2007）03-0410-04 |
| 修稿时间： | 2006-03-302006-12-03 |
Optimization of RAPD conditions of Platycodon grand florus |
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| SUN LiNa,YAN Yi-Zi,WU Ji-Ri,WU Song-Quan,JIN Dong-Chun,WANG Li-Ping.Optimization of RAPD conditions of Platycodon grand florus[J].Guihaia,2007,27(3):410-413. |
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| Authors: | SUN LiNa YAN Yi-Zi WU Ji-Ri WU Song-Quan JIN Dong-Chun WANG Li-Ping |
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| Institution: | College of Agriculture, Yanbian University, Longjing 133400, China |
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| Abstract: | The total DNA in young leaves of Platycodon grandiflorus from Tonghua was successfully extracted by using the developed CTAB method.The optimum reaction system of RAPD for the P.grandiflorus was established by RAPD analysis of the different Mg2+,DNA templates,primers and DNA polymerase.The results show that the most optimal reaction system of RAPD is:20 ng template DNA,dNTP concentration 150 μL,0.3 μmol/L primer,MgCl2 2.0 mmol,1 U Taq polymerase,10×Taq polymerase buffer at 2.0 μL in the 20 μL reaction volume.A high reproducibility was obtained with the optimized experiment condition. |
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| Keywords: | Platycodon grandiflorus system optimation CTAB RAPD |
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